闕金花，李煌，黃鳴清，徐偉，孫照霞，喬麗菲

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復(fù)方熊膽茵陳顆粒的制備工藝研究

闕金花，李煌，黃鳴清，徐偉，孫照霞，喬麗菲

[摘要]目的：制備復(fù)方熊膽茵陳顆粒，優(yōu)選復(fù)方熊膽茵陳顆粒劑成型工藝。方法：以顆粒的成型率、休止角、堆密度、溶化性為指標(biāo)篩選合適的輔料，以口感、成形性為指標(biāo)篩選最佳矯味劑，并以水分控制確定干燥時間，以綠原酸有無被破壞來確定干燥溫度。并了解顆粒的吸濕性及相對臨界濕度，控制顆粒的貯藏條件，確保顆粒的質(zhì)量。結(jié)果：復(fù)方熊膽茵陳顆粒的最佳配方為復(fù)方熊膽茵陳浸膏，加入與熊膽粉混勻的輔料（蔗糖：糊精）以1:1.5:1.5混合，制軟材，12目過篩，干燥溫度為65 ℃，10目整粒。結(jié)論：篩選得到的復(fù)方熊膽茵陳顆粒劑制備方法簡便可行，成型工藝穩(wěn)定可控，建議密閉、置干燥陰涼處保存。

[關(guān)鍵詞]復(fù)方熊膽茵陳顆粒劑；輔料；矯味劑；成型工藝

[作者單位]福建中醫(yī)藥大學(xué),福建 閩侯 350122

復(fù)方熊膽茵陳由熊膽粉、茵陳、澤瀉、北柴胡、山楂、白術(shù)、甘草7味中藥組成；具有清肝利濕，化痰祛瘀的功效。對肝膽濕熱、痰濁血瘀型脂肪肝有較好療效。8年內(nèi)在福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬人民醫(yī)院收集82例患者使用本品情況，服用方法均為茵陳、澤瀉、白術(shù)、山楂、柴胡、甘草水煎后，加入熊膽粉混勻，飯后服用，早晚各服一次?；颊哂盟幰粋€月后癥狀明顯改善，表明水煎煮液在臨床上效果明顯。原方在臨床上使用的劑型是湯劑，將湯劑劑型改革為顆粒劑，由于顆粒劑保有湯劑作用迅速的特點，且具有體積小，服用、存儲及運輸較方便、性質(zhì)穩(wěn)定、質(zhì)量可控等特點[1]。所以本實驗選擇對復(fù)方熊膽茵陳顆粒劑制備工藝進(jìn)行研究，為工業(yè)化生產(chǎn)提供參考依據(jù)。

1　材料與儀器

1.1主要試劑

1.1.1藥材 澤瀉、茵陳、柴胡、山楂、白術(shù)、甘草（均購自福州回春中藥飲片有限公司，批號分別為：10020504、20110901、11101702、20110901、11112801、11011807）；熊膽粉（購自歸真堂，批號：20120503）。

經(jīng)鑒定，以上藥材均符合《中國藥典》2005年版規(guī)定，鑒定人楊成梓教授（福建中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院）。

1.1.2 試藥 綠原酸對照品（批號：110753-200413；中國食品藥品檢定研究院）；微晶纖維素（批號：110123；上海源聚生物科技有限公司）；糊精（批號：20101225；北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠）；可溶性淀粉（批號:20100719；北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠）；環(huán)拉酸鈉（批號：20120625，四川瀚華藥用輔料有限公司）

1.2主要儀器

XS105 電子分析天平（梅特勒-托利多國際股份有限公司）；U3000美國戴安高效液相色譜儀；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱DHG-9240（上海精宏實驗設(shè)備有限公司）；KQ-500DE超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；FW135中草藥粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司）；KDM調(diào)溫電熱套（山東甄城華魯電熱套儀器有限公司）；DLSB-5/40（低溫冷卻循環(huán)泵鄭州長城科工貿(mào)有限公司）；RE-52旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；LXJ-II（離心機(jī)上海安亭科學(xué)儀器廠）；微孔濾膜（江蘇漢邦科技有限公司）；快速水分測定儀（奧豪斯MB23 水分分析儀）。

2　方法

2.1處方篩選

2.1.1復(fù)方試制粒 干膏粉直接制粒：取過篩后的干膏粉20 g同相應(yīng)的熊膽粉混勻噴以70 ％乙醇制粒，但制粒時粘性大，難過篩，且干燥時結(jié)塊、花斑，顆粒硬度大。加入適量輔料可克服這些缺點。用濕稠膏加輔料直接制粒，方法簡單，操作簡便，生產(chǎn)成本低，我們選用此方法進(jìn)行制粒。

2.1.2輔料的篩選 ①以成型性、休止角、堆密度和溶化性為考察指標(biāo)，篩選最佳的輔料。

成型性的測定：按照《中國藥典》一部2010年版附錄XI B篩分法中的雙篩分法測定[2]。藥篩為一號篩在上五號篩在下組成的雙篩，將制備好的顆粒稱取100 g，稱定重量，置于1號篩上，保持水平過篩，左右往返，邊篩邊輕叩3 min。收集能通過1號篩但不能通過5號篩的顆粒，即留在五號篩上的顆粒，稱定稱重，計算所占百分比。

休止角的測定：采用固定漏斗法，即將3只漏斗串聯(lián)并固定于水平放置的坐標(biāo)紙上1 cm的高度處，此時漏斗下口距坐標(biāo)紙的距離為H，小心地將過篩后的顆粒沿漏斗壁倒入最上面的漏斗中，直到最下面漏斗顆粒的圓錐體尖端接觸到漏斗口為止，此時由坐標(biāo)紙測出圓錐體底部的直徑R，計算出休止角α [休止角tgα=H/R][3]。

堆密度的測定：取過篩后的顆粒適量，倒入干燥的100 mL量筒中輕輕振動至刻度(mL)，精密稱定重量(g)，計算堆密度 [堆密度 =顆粒重量(g)．量筒體積(mL)-1[4]。

溶化率的測定：在干燥至恒重的10 mL離心管中加入顆粒約1 g，精密稱定，加入沸水至10 mL，攪拌振蕩5 min，以3000 r．min-1離心15 min，棄去上清液，在80 ℃將殘渣烘干至恒重，精密稱定，計算溶化率[溶解率(％) = 溶解顆粒質(zhì)量/顆粒質(zhì)量×100％][5]。

②顆粒的制備：取浸膏，加入與熊膽粉混勻的輔料，照擬定的處方輔料品種用量配料，混勻，制軟材，12目過篩，60 ℃干燥，10目整粒。照實驗內(nèi)容測定各項指標(biāo)，見表1。

表1　100g浸膏制粒所用輔料及用量

2.1.3矯味劑的篩選——調(diào)試口感 前期試驗得到的顆粒，因含熊膽粉，具有苦腥難咽，為提高病人對藥物的依從性和順應(yīng)性，應(yīng)加入一定量的甜味劑和矯味劑。在顆粒劑中，最常用的既可作為稀釋劑又可作為甜味劑的輔料為蔗糖。因此選用糊精和蔗糖混合作為顆粒劑的稀釋劑。進(jìn)一步選用阿斯巴甜、甜菊糖甙、環(huán)拉酸鈉、糖精、安賽蜜、桂皮醛、桔子香精作為而矯味劑或甜味劑，對顆粒的口感進(jìn)行考察。

①蔗糖用量比例：以制粒情況、成型性為考察指標(biāo)

制粒情況：考察制粒過程中軟材的過篩情況及過篩后顆粒的形狀，還有顆粒的口感。

成型性：按照《中國藥典》一部2010年版附錄XI B篩分法中的雙篩分法測定[2]。藥篩為一號篩在上五號篩在下組成的雙篩，將制備好的顆粒稱取100 g，稱定重量，置于1號篩上，保持水平過篩，左右往返，邊篩邊輕叩3 min。收集能通過1號篩但不能通過5號篩的顆粒，即留在五號篩上的顆粒，稱定稱重，計算所占百分比。

②制備方法

取浸膏，加入與熊膽粉混勻的輔料，照擬定的處方輔料品種用量配料，混勻，制軟材，12目過篩，60 ℃干燥，10目整粒。

③矯味劑的篩選

以口感（多人的口感評價折中為標(biāo)準(zhǔn)），選擇阿斯巴甜、甜菊糖甙、環(huán)拉酸鈉、糖精、安賽蜜、桂皮醛、桔子香精作為矯味劑或甜味劑，對顆粒的口感進(jìn)行考察，見表2。

制備方法：以100 g浸膏加入150 g糊精和150 g蔗糖混勻（含熊膽粉），按照下表的矯味劑處方（約占濕顆粒重的百分比算）制粒，12目過篩，60 ℃干燥，10目整粒。

表2　矯味劑的考察

2.2顆粒干燥條件的測定

顆粒對烘干的溫度有一定要求，如果干燥溫度太低，顆粒干得慢，干燥時間長，效率低，浪費能源，提高成本；而溫度太高容易導(dǎo)致表面干燥而內(nèi)部仍然未干，有些藥效成分也容易因過熱而被破壞。本實驗以水分控制確定干燥時間，以綠原酸有無被破壞來確定干燥溫度。

2.2.1顆粒干燥溫度的考察 對照品溶液制備：精密稱取綠原酸加入50 ％甲醇溶解得50.4 μg．mL-1的對照品溶液。供試品溶液制備：取各溫度下顆粒精密稱定2份，共8份，每份精密加入50％甲醇20 mL，稱定重量，超聲30 min，放冷，再稱定重量，用50 ％甲醇不足減失的重量，搖勻，過濾，取續(xù)濾液，即得。色譜條件：色譜柱（Ultimate XB-C18柱，4.6 mm x 250 mm，5 μL）；流動相為乙腈-0.1 ％磷酸(10:90)；檢測波長為327 nm；柱溫為25 ℃；進(jìn)樣量為10 μL；流速為1.0 ml．min-1。

實驗方法：取50 g濕顆粒平鋪于搪瓷盤上厚度不超過2 mm，平行4份，分別放入55 ℃、65 ℃、75℃、80 ℃的烘箱中，干燥2 h，取出，經(jīng)HPLC法測綠原酸含量。

2.2.2顆粒干燥時間的考察 以顆粒劑中所含水分為考察指標(biāo)，取50 g濕顆粒平鋪于搪瓷盤上，厚度不超過2 mm，放入65 ℃烘箱中，定時(1 h，2 h，3 h，4 h)取樣，采用快速水分測定儀測水分，平行做4份。

2.3顆粒吸濕性考察及臨界相對濕度的測定[6]

了解顆粒的吸濕性，控制顆粒的貯藏條件，確保顆粒的質(zhì)量。臨界相對濕度是藥物吸濕率迅速增加的臨界值，它是確定生產(chǎn)時的環(huán)境濕度的依據(jù)。大生產(chǎn)中分裝顆粒時可參考此值對車間的相對濕度進(jìn)行控制，以避免吸濕使產(chǎn)品的含水量過高而影響質(zhì)量。

2.3.1顆粒吸濕性測定 取一定量的顆粒于60 ℃烘箱中干燥至恒重。將底部盛有氯化鈉飽和溶液的玻璃干燥器放入25 ℃的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)恒溫24 h，此時干燥器內(nèi)的相對濕度為75 ％。在已恒重的稱量瓶底部放入厚約2 mm的干顆粒，準(zhǔn)確稱重后置于氯化鈉過飽和溶液的玻璃干燥器內(nèi)(稱量瓶蓋打開)，于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱保存，定時(4 h，6 h，12 h，24 h，36 h，48 h，60 h，72 h，84 h，96 h，108 h，120 h后)稱量，按下式計算吸濕百分率。并以吸濕百分率為縱坐標(biāo)，時間為橫坐標(biāo)作圖。

2.3.2復(fù)方顆粒的相對臨界濕度考察 取一定量的顆粒于60 ℃烘箱中干燥至恒重。配制KNO3、KCl、NaCl、NaBr、K2CO3、MgCl2、CH3COOK7種不同飽和鹽溶液，分別置于干燥器中，25 ℃室溫放置48 h，使其內(nèi)部濕度平衡，構(gòu)成不同相對濕度(RH)的環(huán)境，精密稱取復(fù)方顆粒約1 g，平鋪于干燥至恒重的稱量瓶中，厚度約為2 mm，精密稱定，按每3份為1組放置在不同RH的干燥器中，放于25 ℃室溫中，七天后取出，精密稱重，計算顆粒在不同RH下的平均吸濕百分率(n＝3)，以吸濕率為縱坐標(biāo)，相對濕度為橫坐標(biāo)作圖，曲線兩端切線的交點對應(yīng)的橫坐標(biāo)即為臨界相對濕度(CRH)。

3　結(jié)果與分析

3.1輔料的篩選

結(jié)果見表3。

表3　100 g浸膏制粒所用輔料及用量篩選結(jié)果

3.2矯味劑選擇

3.2.1蔗糖用量考察：結(jié)果見表4。

表4　100 g浸膏制粒所用蔗糖用量的篩選結(jié)果

由上表可知，處方4難制粒，成型性最差，因此不可行，而處方1、處方3、處方2的成型性都很高，三個配比成型率差不多，說明蔗糖和糊精作為本復(fù)方顆粒的輔料是可行的。本次實驗主要考察的是顆粒的口感，因此我們選用處方3作為最佳方案，浸膏：蔗糖：糊精=1:1.5:1.5。

3.2.2矯味劑種類選擇 從不同口感人員試喝，對表2的11組顆粒中，對環(huán)拉酸鈉評價比較好，因此選環(huán)拉酸鈉為最佳矯味劑0.2 ％環(huán)拉酸鈉的口感均表示沒有很苦，沒有那么酸和澀，味道淡淡的，而0.4％ 的環(huán)拉酸鈉有點偏酸和甜，稍苦，兩者的口感好像都有點欠缺。調(diào)試環(huán)拉酸鈉含量0.2 ％、0.3 ％、0.4 ％，試喝得到結(jié)果為0.3 ％環(huán)拉酸鈉的口感為腥，不酸，微苦，有點甜為最佳矯味劑量。

考慮到因每組處方的口感都有點腥，加入常用的氣味掩蓋劑桂皮醛和桔子香精。桂皮醛加入并沒有使顆粒的口感改善多少，還是有些腥，而加入桔子香精后，喝起來是有桔子香味，但味道很奇怪，并沒有很好的掩蓋熊膽的味道，達(dá)到矯味的目的，還不如沒加時口感來得自然。

因此矯味劑考察結(jié)果表明用糊精和蔗糖制粒，成型性效果好，加入0.3％環(huán)拉酸鈉能達(dá)到更好的口感。復(fù)方浸膏（相對密度為1.36，50 ℃）加入1.5份的蔗糖和1.5份的糊精及總重量的0.3 ％環(huán)拉酸鈉制粒，成型性好，口感佳。若以1000 g顆粒算，為浸膏270 g，熊膽粉8.33 g，糊精405 g，蔗糖405 g，環(huán)拉酸鈉3.3 g。

3.3顆粒干燥溫度的考察

實驗結(jié)果見圖1。

圖1　干燥溫度考察曲線圖

考慮到溫度的高低會影響有效成份綠原酸的穩(wěn)定及干燥的時間，而干燥時間長也會相應(yīng)增加成本，我們選用65 ℃作為顆粒干燥溫度。

3.4顆粒干燥時間的考察

結(jié)果見圖2。

圖2　干燥時間考察曲線圖

由實驗結(jié)果可知在溫度達(dá)到65 ℃時，干燥3 h后為2.7 ％，符合要求。

3.5驗證試驗結(jié)果

處方：熊膽粉8.33 g澤瀉 250 g茵陳278 g山楂278 g柴胡167 g白術(shù)167 g甘草167 g

取1倍處方量，根據(jù)提取工藝得浸膏，取8.33 g熊膽粉、0.3 ％環(huán)拉酸鈉、1.5份糊精和1.5份蔗糖，混勻，同浸膏混合制軟材，12目過篩，65 ℃干燥，10目整粒。平行做3份對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行了統(tǒng)計，結(jié)果見表5。

表5　三批顆粒檢查結(jié)果

經(jīng)驗證，該成型工藝方案穩(wěn)定性好，制得的顆粒溶解性好、成型率高、成本低。

3.6顆粒吸濕性測定

以吸濕百分率為縱坐標(biāo)，時間為橫坐標(biāo)作圖。結(jié)果見圖3。

圖3　顆粒吸濕性曲線圖

結(jié)論：顆粒在108 h（四天半）后即達(dá)到吸濕平衡時間。因此看出顆粒在T 25 ℃，RH 75 ％的條件下108 h后就可達(dá)到吸濕最大程度，考查其吸濕性放置時間要大于108 h。

4　討論

由表3可知，處方4和處方5的配方制作出的軟材太粘，沒法過篩成顆粒，因此單獨用可溶性淀粉或蔗糖作為輔料來制顆粒不適合本品顆粒。處方7，相較其他配方制粒較難，因中藥提取物本身的粘性大，吸濕性強(qiáng)，而可溶性的吸濕性強(qiáng)，因此過篩較費力。處方3，溶化率最小，難溶化，微晶纖維素本身在水中較難溶，因此也不適合本品。處方1和處方2，顆粒成型率高，易于溶化，且流動性好，故乳糖和糊精為良好的顆粒劑輔料，但其乳糖價格昂貴，成本高，故本實驗選用糊精作為輔料，糊精價格便宜，可以降低成本，物美價廉。

[參考文獻(xiàn)]

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[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社, 2010.

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[4]吳龍,易延逵,鄧虹珠.復(fù)方紅景天顆粒成型工藝研究[J].湖南中醫(yī)雜志,2012,28(3):151-152.

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[6]陳興,張志國.活血安痛顆粒成型工藝研究[J].中南藥學(xué), 2010,10,8(10):748-751.

（責(zé)任編輯：傅舒）

·藥理毒理·

Study on the preparation technology of Fufang-xiongdan-yinchen granule

QUE Jin-hua, LI Huang, HUANG Mingqing, XU Wei, SUN Zhao-xia, QIAO Li-fei
(Department of Pharmacy, Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 350122, Fujian)

[Abstract]Objective: To prepare Fufang-xiongdan-yinchen granule and optimize the technology.Method: The excipients were optimized with the indexes of moldability, angle of repose, bulk density and dissolution.The best corrigent was chosen with taste and moldability.The drying time was determined with moisture, and the drying temperature was determined with chlorogenic acid content.And the hygroscopicity of granule and critical relative humidity and the storage conditions were considered to ensure granules quality.Result: The optimum formula of Fufang-xiongdan-yinchen granule was optimized.Fufang-xiongdan-yinchen extractum was prepared.Bear gall powder was mixecd with cane sugar and dextrin in the ration of 1:1.5:1.5.After being sieved with 12 screen mesh, the soft material was dryed at 65 ℃ and then granulated with 10 screen mesh.Conclusion: The preparation method of Fufang-xiongdan-yinchen granule is convenience.The forming processes is stable and controllable.The granule should be sealed in cool and dry place for preservation.

[Key words]Fufang-xiongdan-yinchen granule; excipients; corrigent; preparation

[收稿日期]2015-06-04

[通訊作者]徐偉(1975-)，男，博士，主要研究方向：中藥制劑及其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究Tel:13950418662 Email:xwfjtcm@sina.com

[作者簡介]闕金花(1989-)，女，在讀碩士，主要研究方向：中藥制劑及其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究Tel:13950223774 Email:275376859@qq.com

[基金項目]福建省科技重大專項（2010YZ0001-1）

[中圖分類號]R285.5

[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A

[文章編號]1674-926X(2016)01-013-05