張慧，夏厚林，楊孟妮，徐慶凱，鄧放

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不同pH值對維生素C注射液的影響研究

張慧，夏厚林，楊孟妮，徐慶凱，鄧放

[摘要]目的：考察不同pH值對維生素C（Vc）注射液的影響。方法：采用紫外分光光度法對不同pH值的Vc注射液進行最大吸收波長考察，進行穩(wěn)定性試驗篩選最穩(wěn)定的pH值，采用百分吸收系數(shù)法測定穩(wěn)定pH值的Vc注射液含量。結(jié)果：隨著pH值的增大，最大吸收波長紅移，反之則紫移；pH值在3左右時最大吸收波長比較穩(wěn)定；把pH值控制在3左右測定Vc注射液的含量為：95.36％～98.64％。結(jié)論：pH值影響Vc注射液的最大吸收波長，把pH值控制在3左右，Vc注射液較穩(wěn)定。

[關(guān)鍵詞]維生素C注射液；紫外分光光度法；穩(wěn)定性；pH；含量測定

[作者單位]成都中醫(yī)藥大學(xué) 中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點實驗室 中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用省部共建國家重點實驗室培育基地，四川 成都 611137

維生素C又叫抗壞血酸，能減少毛細(xì)血管的通透性，加速血液的凝固，刺激造血功能，促進鐵在腸內(nèi)吸收，降低血中甘油三酯和膽固醇，增加對感染的抵抗力，參與解毒功能，是維持人體機能的一種重要的維生素[1]。

目前，文獻報道的Vc含量測定方法有高效液相色譜法[2]、2，4—二硝基苯肼比色法[2]、熒光法[3]、紫外分光光度法[4]、碘酸鉀滴定法[4]、2，6一二氯酚靛酚法[5]等。高效液相色譜法、熒光法要求樣品的純度較高，還需要有昂貴的儀器；2，4—二硝基苯肼比色法操作麻煩，耗時較長；2，6一二氯靛酚法雖然簡便，但是藥品價格昂貴；碘量法[6]需標(biāo)定滴定液碘，麻煩費時，基準(zhǔn)物毒性大。光度法測定Vc含量的方法很多[7-9]，相比之下，紫外法較為簡便，易操作，準(zhǔn)確度高。綜合考慮本文采用直接紫外法測定維生素C的含量。

Vc穩(wěn)定性較差，維生素C結(jié)構(gòu)中含有烯二醇結(jié)構(gòu)，在水溶液、堿性溶液中極不穩(wěn)定，且很容易被氧化分解[10-11]。維生素C注射液隨著臨床應(yīng)用的日益廣泛，其穩(wěn)定性也越來越引起人們的重視，本實驗通過對不同pH維生素C注射液穩(wěn)定性的考察，篩選出最適宜的維生素C注射液pH，為注射制劑pH的控制奠定基礎(chǔ)。

1　儀器與材料

紫外分光光度儀（UV1000 spectrophotometer）；PHS-25雷磁pH計（依法分別用pH=6.86、pH=4.00的緩沖溶液進行校正）；實驗用Vc注射液（5 mL:1 g）（批號：1408324-A10、1408324-A12、1408324-A14）購自國藥集團容生制藥有限公司；維生素C對照品購自中國藥品檢定研究所(批號：2159C)；分析純鹽酸（36％～38％）購置成都科龍化工試劑廠。

2　方法與結(jié)果

2.1對照品溶液的制備

取維生素C對照品適量，精密稱定，加蒸餾水制成每1 mL含0.2 mg的溶液。

2.2供試品儲備溶液的制備

吸取Vc注射液5 mL加蒸餾水定容到50 mL，再從中取1 mL加蒸餾水定容到100 mL作為儲備液。再從中取不同體積的儲備液加不同濃度的鹽酸（1 mol．L-1、0.1 mol．L-1、0.01 mol．L-1、0.001 mol．L-1）定容到100 mL即得供試品溶液。

2.3最大吸收波長的選擇

精密取對照品溶液2 mL定容到100 mL，進行195 nm～500nm的全波長掃描，標(biāo)準(zhǔn)品在243 nm處有最大吸收，故選擇243 nm作為Vc的檢測波長。

2.4線性范圍考察

精密吸取“2.1”項下的對照品溶液各1 mL、2 mL、4 mL、5 mL、8 mL、10 mL定容到100 mL，于245 nm波長下用1 cm比色皿進行紫外掃描測定吸光度A，以Vc的濃度為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為y=54.350x+0.0047，r=0.9993，結(jié)果表明Vc的濃度在0.002 mg．mL-1～0.02 mg．mL-1之間線性范圍良好，結(jié)果見表1、圖1。

表1　維生素C濃度與對應(yīng)吸光度關(guān)系表

圖1　維生素C標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

2.5穩(wěn)定性考察

吸取“2.2”項下的供試品儲備液3 mL，加不同濃度的鹽酸定容到100 mL，分別在0 h、0.5 h、1 h、2 h、3 h、4 h、6 h、8 h于紫外掃描最大吸收波長（λmax），考察不同pH對Vc注射液穩(wěn)定性的影響見表2、圖2。

表2　不同pH的Vc注射液最大吸收波長隨時間變化關(guān)系表

結(jié)果顯示用0.001 mol．L-1的鹽酸定容相當(dāng)于調(diào)節(jié)Vc注射液pH在3左右時最大吸收波長保持在243 nm基本上穩(wěn)定，RSD為0.42％。

2.6精密度、重復(fù)性、重現(xiàn)性和加樣回收率的考察

取同一支Vc注射液供試品儲備液依法考察，精密度試驗RSD為0.81％，重復(fù)性試驗RSD為0.89％，重現(xiàn)性試驗RSD為0.49％，加樣回收率的平均回收率為98.42％，RSD為1.03％。表明該法可靠性良好。

2.7含量測定

吸取Vc注射液5 mL加蒸餾水定容到50 mL，再從中取1 mL加蒸餾水定容到100 mL，再從中取3 mL 加0.01 mol．L-1鹽酸定容到100 mL，于紫外243 nm下測定Vc的吸光度值A(chǔ)，并利用百分吸收系數(shù)法計算Vc注射液中Vc的百分標(biāo)示含量（E1％1cm=560），結(jié)果見表3。

表3　Vc百分標(biāo)示含量測定結(jié)果表（n=3）

結(jié)果顯示用0.01 mol．L-1的鹽酸定容到pH在3左右時，Vc的百分標(biāo)示含量為95.36％～98.64％。

3　討論

1.根據(jù)穩(wěn)定性考察結(jié)果顯示不同的pH對Vc注射液最大吸收波長影響較大，隨著pH的增大，最大吸收波長往長波長方向移動，但當(dāng)用0.01 mol．L-1的鹽酸調(diào)節(jié)pH在3左右時，隨著時間的變化，最大吸收波長保持在243 nm比較穩(wěn)定，故提示測量維生素C注射液含量時應(yīng)該把pH調(diào)節(jié)在3左右有利于其穩(wěn)定。

2.本實驗也研究了Vc注射液在堿性條件下的最大吸收波長，實驗結(jié)果顯示在堿性條件下幾乎沒有吸收，考慮到Vc是一個酸性物質(zhì)，在堿性條件下被中和，所以表現(xiàn)出無吸收。

3.紫外分光光度法測量Vc注射液的含量，具有操作簡便、快速、準(zhǔn)確的優(yōu)點，查閱文獻有用標(biāo)準(zhǔn)曲線測含量的，本實驗探討了百分吸收系數(shù)法測定Vc的含量，把Vc的pH控制在3左右，最大吸收波長保持在243 nm處測定含量跟文獻報道結(jié)果基本一致。

[參考文獻]

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(責(zé)任編輯：傅舒)

Influence of different pH on vitamin C injection

ZHANG-Hui, XIA Hou-lin, YANG Meng-ni, Xu Qing-kai, DENG Fang
(School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137,Sichuan)

[Abstract]Objective: To study the influence of different pH on vitamin c (Vc) injection.Method: Ultraviolet spectrophotometry was applied to investigate the maximum absorption wavelength of Vc injection at different pH.The most suitable pH value was chosen and the stable Vc injection content was detected using percent absorption method.Result: With the increase of pH value, maximum absorption wavelength was shifted to long wavelength.Maximum absorption wavelength was stable at pH 3.And Vc injection content was 95.36％-98.64％ at pH 3.Conclusion: pH values affect the wavelength of maximum absorption of Vc injection.Vc injection is stable at pH 3.

[Key words]Vitamin C injection; uv spectrophotometry; stability; pH; content determination

[收稿日期]2015-04-27

[通訊作者]鄧放，男，博士，從事中藥及其復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)和質(zhì)量控制研究 Email:dengf99@163.com

[作者簡介]張慧，女，在讀碩士，從事中藥質(zhì)量控制研究Tel:13880459062 Email:zhanghui9101@163.com

[中圖分類號]R 283.1

[文獻標(biāo)識碼]A

[文章編號]1674-926X(2016)01-011-03