李 鑫劉麗婭夏 俊

(1.阿勒泰地區(qū)動物疾病控制與診斷中心,新疆阿勒泰 836000; 2.新疆畜牧科學院獸醫(yī)研究所,新疆烏魯木齊 830099)

奶牛乳房炎的病原分離鑒定與藥敏實驗

李 鑫1劉麗婭2夏 俊2

(1.阿勒泰地區(qū)動物疾病控制與診斷中心,新疆阿勒泰 836000; 2.新疆畜牧科學院獸醫(yī)研究所,新疆烏魯木齊 830099)

奶牛乳房炎是奶牛最常見疾病之一,也是最難以預防和控制的常在性疾病。通過對新疆某規(guī)?；膛瞿膛Ｈ榉垦椎牟≡蛛x鑒定及藥敏實驗,進一步對該牛場更好的綜合防控奶牛乳房炎提供技術資料參考。

奶牛乳房炎;分離鑒定;藥敏實驗;防控

新疆某規(guī)模化奶牛場奶牛，是新疆屈指可數的優(yōu)秀牛場及奶源地，管理良好，但奶牛常年處于工業(yè)化生產模式，配種、妊娠、產犢、產奶、再配種，高負荷的運轉使奶牛的乳房變得極脆弱，易生病。曾采用青霉素、鏈霉素、黃芪多糖等藥物治療，但因混合感染及耐藥菌株的出現，收效甚微。本研究對該場引起奶牛乳房炎病原菌進行分離鑒定及藥敏試驗，對更好的預防和治療奶牛乳房炎起到了重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 乳樣來源 從該規(guī)模化奶牛場采集奶樣3份，編號分別為054366、054603、087077。采集時嚴格無菌操作，先對乳頭進行消毒，棄掉前10～20 ml奶樣后無菌取乳樣5 ml，放入EP管中，貼好編號后冰袋冷凍保存，24 h之內進行分菌培養(yǎng)。

1.1.2 試劑 普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，50 ml/L兔鮮血培養(yǎng)基，按實驗室常規(guī)配置。

1.1.3 藥敏紙片 抗菌藥物紙片共12種，包括頭孢曲松、炎毒咳喘王、沙拉沙星、頭孢他啶、慶大霉素、阿米卡星、卡那霉素、青霉素、鏈霉素、林可霉素、克林霉素。

1.2 方法

1.2.1 病原菌的培養(yǎng)與分離 3份奶樣取少量，分別劃線接種到普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、血瓊脂平板，37℃培養(yǎng)12～24 h。

1.2.2 病原菌鑒定 將分離的不同病菌進行涂片，革蘭染色，鏡檢，觀察菌體的形態(tài)及染色特性。

1.2.3 藥物敏感性試驗 用臨床上常用的、價格較低廉的12種抗生素對分離培養(yǎng)細菌進行藥物敏感性試驗。

2 結果

2.1 病原菌的培養(yǎng)分離

3份奶樣分別接種普通瓊脂、血瓊脂平板，在37℃培養(yǎng)12h觀察，結果如下：

054366號樣品：在普通瓊脂平板和血瓊脂平板上沒有任何細菌生長。

054603號樣品：在普通瓊脂平板和血瓊脂平板上細菌生長情況基本相同，主要有三種菌落，一種是大而無規(guī)則的菌落，一種是中等大小菌落，一種是針尖大小菌落。其中以大而無規(guī)則的菌落占多數。

087077號樣品：在普通瓊脂平板和血瓊脂平板上細菌生長情況基本相同，主要有三種菌落，一種是大而無規(guī)則的菌落，一種是中等大小菌落，一種是針尖大小菌落。其中以中等大小菌落及針尖大小菌落占多數，大而無規(guī)則的菌落很少。

2.2 病原菌鑒定（革蘭氏染色）

將分離的三種不同病菌（大、中、小）進行革蘭氏染色鑒定。結果大而無規(guī)則的細菌為革蘭氏陽性桿菌（牛棒狀桿菌、化膿桿菌等）；中等大小細菌為革蘭氏陽性球菌（葡萄球菌、雙球菌）；針尖大小菌落為革蘭氏陽性球菌（鏈球菌）。

2.3 藥物敏感性試驗

用臨床上常用的、價格較低廉的12種抗生素對分離培養(yǎng)細菌進行藥物敏感性試驗。結果阿米卡星（紅色箭頭所指）對大、中、小三種病菌均存在明顯的抑菌環(huán)，能有效抑制病原菌的生長，效果最好。

3 討論

（1）依據藥敏試驗結果，為該規(guī)?；膛鲋贫朔乐畏桨?，具體如下：

治療：使用阿米卡星，藥量及用藥方法參照藥品說明，連用5～7d。

預防：藥物預防：首選蘭州畜牧與獸藥研究所生產的速效乳炎散（中藥），成年/青年母牛全群投藥，每次5d，一年2～3次。

（2）防治建議

①奶牛乳房炎是乳腺受到物理、化學、病菌等因素的刺激所發(fā)生的一種炎癥變化，是一種多因素疫病。但是，除病原微生物外，其他因素隨著奶牛飼養(yǎng)業(yè)的發(fā)展而逐漸改善，病菌就成為當前引起奶牛乳房炎的主要原因。已經報道的奶牛乳房炎病原微生物有150多種，包括細菌、真菌、支原體等，但研究證明，引發(fā)奶牛乳房炎的病原主要為金黃色葡萄球菌、鏈球菌和桿菌[5]，由這3種病原菌引起的奶牛乳房炎約占該病發(fā)病總數的90%以上。單純由某一個病原菌引起的奶牛乳房炎較少，而多數是由2種～3種甚至是3種以上的病原菌引起的，這也是傳統(tǒng)的治療藥物（如青、鏈霉素）難以取得令人滿意效果的原因。由于規(guī)?；膛銎毡榇嬖趶V泛使用抗生素的情況，使病原菌存在普遍的耐藥性，那么當需要用藥治療或預防流行病時，就需要講究科學“先對病原進行實驗室確診，再進行高效藥物的篩選（藥敏試驗）”。否則使用了對病原菌無效的藥物治療疫病，不但浪費人力、財力、增加了藥物在動物體內的殘留量，更重要的是耽誤了疫病防治的最佳時機，使疫情蔓延，造成不必要的、更大的經濟損失，況且病重、病程長的奶牛往往很難治愈。

②有臨床型（顯性）乳房炎，就暗示隱性乳房炎一定不少。這在全世界都很普遍，就像犢牛肺炎和腹瀉一樣，不必恐慌，只要科學用藥、疫苗預防，奶牛乳房炎是可控可治的。

③建議貴場加強環(huán)境衛(wèi)生管理，牛舍定期消毒，清潔牛床，保持環(huán)境干燥；擠奶時正確使用擠奶器，盡量縮短擠奶時間，擠奶時用力要均勻，盡量擠凈乳汁；病牛及時予以治療。加強在分娩前后，尤其是產犢初期的飼養(yǎng)管理。分娩前，乳房明顯腫脹時，應減少多汁飼料和精料喂量，分娩后控制飲水并適當增加運動和擠奶次數。此外，加強干奶期奶牛的飼養(yǎng)管理對奶牛乳房炎的預防及治療也很重要，有資料顯示，干奶期治療奶牛乳房炎不但能治愈現有疾病，也能預防新的感染，還有治愈率比泌乳期高、能夠較長時問使用高濃度抗生素、不存在乳汁中藥物殘留等優(yōu)點。因此，對于奶牛養(yǎng)殖場來說，奶牛乳房炎的預防及治療在奶牛生產的任何時期都應是一項常抓不懈的工作。

[1] 吳凌，劉志忠，夏成，等.荷顛坦奶牛乳房炎鏈球菌的分離與鑒定[J].畜牧與獸醫(yī)，2003，35（3）：35.