黃　瑩，劉敬喜

(1.白銀市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,甘肅白銀 730900；2.寧波美康生物科技股份有限公司,浙江寧波 315100)

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·論著·

不同抗凝劑對5種特定蛋白檢測結(jié)果的影響

黃瑩1，劉敬喜2

(1.白銀市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,甘肅白銀 730900；2.寧波美康生物科技股份有限公司,浙江寧波 315100)

摘要:目的觀察常見的4種血樣采集管對C3、C4、IgA、IgG、IgM這5項(xiàng)生化項(xiàng)目檢測結(jié)果的影響，探討能否用抗凝血漿替代血清用于生化檢測。方法對43名體檢人員的靜脈血管，連續(xù)用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管、肝素鋰抗凝管、普通血清管、枸櫞酸鈉抗凝管各抽取一管血液，經(jīng)混勻、離心分離后提取血清或血漿在儀器上同時用C3、C4、IgA、IgG、IgM試劑盒進(jìn)行測定。結(jié)果在相同條件下，5個項(xiàng)目中肝素鋰抗凝管與普通血清管比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，枸櫞酸鈉抗凝管與用普通血清管的結(jié)果比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，EDTA-K2抗凝管與用普通血清管的結(jié)果比較，IgA、IgM、IgG差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，C3、C4差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論IgA、IgM、IgG生化檢驗(yàn)項(xiàng)目可用肝素鋰抗凝血漿和EDTA-K2血漿代替血清，C3和C4生化檢驗(yàn)項(xiàng)目可用肝素鋰抗凝血漿代替血清，但C4應(yīng)建立血漿參考區(qū)間。

關(guān)鍵詞:補(bǔ)體；免疫球蛋白；抗凝劑

樣本采集過程是保證樣本質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié),其中就有抗凝劑的使用和樣本容器的要求[1]?，F(xiàn)在醫(yī)院廣泛使用一次性真空采血管采集樣本進(jìn)行生化項(xiàng)目檢測，可能在實(shí)際操作過程中，為了減少采血管數(shù)量,常會統(tǒng)一使用一種或兩種采血管,或者是為了使患者盡快拿到檢測報告而使用抗凝血漿進(jìn)行檢測。而一般的C3、C4、IgA、IgG、IgM試劑說明書上均要求使用血清，所以本文對常見的3種抗凝血漿與普通血清在生化檢驗(yàn)分析上進(jìn)行對比試驗(yàn)，現(xiàn)將本次試驗(yàn)所檢測情況報道如下。

1資料與方法

1.1儀器與試劑東芝TBA-2000FR型全自動生化分析儀，由日本東芝醫(yī)療系統(tǒng)公司提供。維護(hù)完成后對5個試劑進(jìn)行校準(zhǔn)，質(zhì)控結(jié)果在控后待用。補(bǔ)體C3檢測試劑盒(免疫比濁法)，批號為20111103。補(bǔ)體C4檢測試劑盒(免疫比濁法)，批號為20120309。免疫球蛋白IgA檢測試劑盒(免疫比濁法)，批號為20120116。免疫球蛋白IgG檢測試劑盒(免疫比濁法)，批號為20120621。免疫球蛋白IgM檢測試劑盒(免疫比濁法)，批號為20120109。5種試劑均由寧波美康生物科技股份有限公司生產(chǎn)。抗凝劑的選用[2]：臨床檢驗(yàn)常用的3種抗凝劑，枸櫞酸鈉(檸檬酸鈉)，枸櫞酸與血液的比例為1∶9；乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)；肝素：本次所用為肝素鋰抗凝管。普通血清管：所用血清管為不加任何促凝劑的紅色普通管。所有采血管均由美康國賓體檢中心提供。

1.2方法在體檢中，對自愿獻(xiàn)血的43人抽4管靜脈血(EDTA-K2抗凝管、肝素鋰抗凝管、普通血清管、枸櫞酸鈉抗凝管各一管)。所有血樣都是一針見血，以防止組織損傷外源性凝血因子進(jìn)入試管影響試驗(yàn)結(jié)果[3]。立即將3種抗凝管進(jìn)行混勻、編號、分類、靜置。選擇4 000 r/min(約1 160×g)的轉(zhuǎn)速，離心10 min[4]。離心完成后，將4種采血管，每管用一次性吸管輕輕吸取中段血清或血漿，放入生化分析儀中進(jìn)行檢測并記錄結(jié)果。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理采用Microsoft Excel 2003軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。

2結(jié)果

2.13種抗凝血漿與血清生化檢驗(yàn)結(jié)果見表1。5個項(xiàng)目的肝素鋰血漿管結(jié)果與普通血清管結(jié)果比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；枸櫞酸鈉抗凝管結(jié)果與普通血清管結(jié)果比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；3個免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的EDTA-K2抗凝管結(jié)果與普通血清管結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；補(bǔ)體C3和C4的EDTA-K2抗凝管結(jié)果與普通血清管結(jié)果比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.2結(jié)果分析血清和3種抗凝血漿生化檢測結(jié)果的相關(guān)性和回歸方程、血漿檢測結(jié)果與血清檢測結(jié)果的平均偏倚見表2、3。

表1　　血清與3種抗抗凝血漿的結(jié)果(g/L)

表2　　血清和3種抗凝血漿生化檢測結(jié)果的相關(guān)性和回歸方程

表3　　偏倚要求

3討論

首先對每個項(xiàng)目的血清和血漿檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，從表1結(jié)果可知，5個項(xiàng)目的肝素鋰血漿管結(jié)果、IgA、IgG、IgM的EDTA-K2抗凝管結(jié)果與普通血清管的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；而5個項(xiàng)目的枸櫞酸鈉抗凝管結(jié)果、補(bǔ)體C3和C4的EDTA-K2抗凝管結(jié)果與普通血清管差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

對有統(tǒng)計學(xué)意義的項(xiàng)目進(jìn)行相關(guān)性分析，對相關(guān)系數(shù)r2<0.95，計算每份血清和血漿樣本的相對偏倚，再計算其平均偏倚。對r2≥0.95，以血清檢測結(jié)果為X,血漿檢測結(jié)果為Y，計算回歸方程Y=a+bX,以臨界水平的值帶入回歸方程,計算血漿(Y)與血清(X)檢測結(jié)果之間的臨界水平偏倚。本文的臨界水平偏倚或平均偏倚需同時滿足小于或等于1/2的說明書偏倚要求和美國臨床實(shí)驗(yàn)室修正法規(guī)對室間評估偏倚[5]的要求(見表3)。若符合要求，則對生化檢測結(jié)果的影響在臨床可接受范圍之內(nèi)，可用血清參考區(qū)間解釋血漿檢測結(jié)果。因此，可以發(fā)現(xiàn)IgA、IgG、IgM的肝素與EDTA-K2血漿、C3的肝素血漿的偏倚均符合要求。而C4的肝素血漿的偏倚雖然符合說明書要求，但偏差超過了1/2的要求，有點(diǎn)偏大，故需要建立血漿參考區(qū)間。而枸櫞酸鈉抗凝管測定的5個項(xiàng)目結(jié)果均偏低應(yīng)該與血液被稀釋有關(guān)。

通常，血清樣本中有纖維蛋白絲遺留及分離過程中血液有形成分易發(fā)生破壞等缺點(diǎn)[6]，而且肝素鋰、EDTA-K2等血漿能為更快速f 的回報檢測結(jié)果提供很多方便[7]。涉及血液的液體成分,究竟應(yīng)當(dāng)選擇血漿抑或血清,主要取決于該指標(biāo)的性質(zhì)和檢測的目的[8]；涉及免疫成分的指標(biāo),絕大多數(shù)宜選用血清?？赡苁艿侥^程影響的指標(biāo),應(yīng)當(dāng)盡量選擇血漿；待檢物既不受凝血過程影響,也不會因制備血清而改變的指標(biāo),可以使用血清或血漿[9]。

通過本次實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)寧波美康生物科技股份有限公司生產(chǎn)的IgA、IgM、IgG生化檢驗(yàn)項(xiàng)目可用肝素鋰抗凝血漿和EDTA-K2血漿代替血清，C3和C4生化檢驗(yàn)項(xiàng)目可用肝素鋰抗凝血漿代替血清；C4項(xiàng)目的血清和肝素鋰抗凝

血漿相比有差異，臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)為C4項(xiàng)目確定可靠的參考區(qū)間[10]，方可使用肝素鋰抗凝血漿代替血清。

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Impact on the measurement results of five different specialty protein blood collection tube project

HuangYing1,LiuJingxi2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,theFirstPeople′sHospitalofBaiyin,Baiyin,Gansu730900,China;2.NingboMedicalSystemBiotechnologyCo.Ltd.,Ningbo,Zhejiang315100,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the effects of a common four kinds of blood collection tubes for C3,C4,IgA,IgG,IgM test results of five biochemical projects,exploring the possibility of using an alternative anticoagulant plasma serum for biochemical testing.MethodsVein 43 medical personnel,continuous tube with EDTA-K2anticoagulant,heparin lithium anticoagulant tube,normal serum tubes,sodium citrate anticoagulation a tube of blood drawn each tube,after mixing,extracted after centrifugation the serum or plasma to the instrument while in using C3,C4,IgA,IgG,IgM kit were measured.ResultsUnder the same conditions,lithium heparin anticoagulant tube with normal serum tube difference five projects was not statistically significant (P>0.05),sodium citrate anticoagulation tube and pipe the results with normal serum difference was statistically significance (P<0.05),EDTA-K2anticoagulated tubes and compare the results with normal serum tubes,IgA,IgM,IgG was no significant difference (P>0.05),C3,C4 difference was statistically significant (P<0.05).ConclusionIgA,IgM,IgG biochemical test items available lithium heparin anticoagulant plasma and EDTA-K2plasma instead of serum,C3 and C4 biochemical test items available plasma instead of serum lithium heparin anticoagulant,but C4 should establish plasma reference range.

Key words:complement； immunoglobulin；anticoagulants

(收稿日期：2015-09-28)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.04.015

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)04-0468-03