華德興 彭 青 曾香連 羅 君 蔡聰藝

某院嗜血桿菌臨床分布與藥敏特征

華德興 彭 青 曾香連 羅 君 蔡聰藝

目的 探討我院嗜血桿菌臨床分布特點(diǎn)與藥敏情況，為臨床診斷與治療提供依據(jù)。方法選取我院2014－2015年全院細(xì)菌培養(yǎng)患者為對象，分析嗜血桿菌屬培養(yǎng)陽性的患者年齡、性別，標(biāo)本類型、臨床科室分布和季節(jié)性特點(diǎn)，且對菌株藥敏情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果流感嗜血桿菌除2月、4月份未能檢出，其他月份均有分布;副流感嗜血桿菌全年均可檢出，以3～5月分布最多;在105株嗜血桿菌屬中，以副流感嗜血桿菌最多，其次為流感嗜血桿菌、b型流感嗜血桿菌，副溶血嗜血桿菌，未檢測到其他嗜血桿菌;臨床科室以內(nèi)科為主，呼吸內(nèi)科最多;年齡分布以老年患者最多，但也同時(shí)存在于兒童患者中(包括嬰兒);除復(fù)方新諾明耐藥率較高外，其他抗生素均保持較高敏感性。結(jié)論我院分離的嗜血桿菌屬流行具有一定季節(jié)性，科室分布以內(nèi)科為主，抗生素敏感性仍較好。

嗜血桿菌;臨床分布;藥敏試驗(yàn)

【Author's address】Yuebei People’s Hospital，Affiliated to Shantou Medical College，Shaoguan 512026，China

嗜血桿菌屬隸屬于巴斯德菌科。該屬細(xì)菌共有17個(gè)種，其中與臨床有關(guān)的有9個(gè)種:流感嗜血桿菌、副流感嗜血桿菌、溶血嗜血桿菌、副溶血嗜血桿菌、杜克嗜血桿菌、埃及嗜血桿菌、嗜沫嗜血桿菌、副嗜沫嗜血桿菌、遲緩嗜血桿菌［1－2］。生長過程中均需含有生長因子Ⅹ和Ⅴ的血液瓊脂而得名［1－2］。本研究擬回顧2014－2015年粵北人民醫(yī)院全部的細(xì)菌培養(yǎng)臨床資料，分析嗜血桿菌臨床分布特點(diǎn)及其對抗生素的敏感情況。

1 材料與方法

1．1 一般資料

選取2014年1月－2015年12月全院的痰培養(yǎng)、分泌物培養(yǎng)及血培養(yǎng)等的患者為研究對象，分析嗜血桿菌陽性患者的年齡、性別，標(biāo)本類型、臨床科室分布和月份季節(jié)性特點(diǎn)。

1．2 試劑及儀器

所需細(xì)菌培養(yǎng)基均購自鄭州安圖有限公司。VITEK－2全自動微生物分析儀及藥敏卡和頭孢硝噻酚紙片購自法國梅里埃公司。質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923、流感嗜血桿菌ATCC10211購自廣東省臨床檢驗(yàn)中心。

1．3 檢測方法

按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》操作流程將標(biāo)本接種于血瓊脂平板、專用巧克力平板上，然后將其放置于CO2含量為5%的環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間為18～24 h，以菌落的形態(tài)，革蘭染色作為根據(jù)實(shí)施首次篩選，應(yīng)用Ⅴ因子、Ⅹ因子、Ⅴ+Ⅹ因子試驗(yàn)和嗜血桿生化鑒定卡鑒定。VITEK－2全自動微生物分析儀進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。

1．4 β－內(nèi)酰胺酶試驗(yàn)

采用頭孢硝噻酚法，在頭孢硝噻酚法紙片上加一滴無菌生理鹽水，紙片濕潤以后將菌落涂布于紙片上，10 min內(nèi)變紅表示為β－內(nèi)酰胺酶試驗(yàn)陽性菌株。

1．5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用WHONET 5.6對細(xì)菌和藥敏結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，藥敏標(biāo)準(zhǔn)按照CLSI2014。數(shù)據(jù)比對分析采用SPSS 13.0進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，P＜0.05判讀差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1 細(xì)菌分離

2014－2015年共送檢22 122例痰培養(yǎng)，分離嗜血桿菌105株，陽性率0.47%，其中62株副流感嗜血桿菌、38株流感嗜血桿菌、4株b型流感嗜血桿菌，1株副溶血嗜血桿菌，未分離到溶血嗜血桿菌、杜克嗜血桿菌、埃及嗜血桿菌、嗜沫嗜血桿菌、副嗜沫嗜血桿菌、遲緩嗜血桿菌。分泌物、靜脈血、腦脊液、胸腹水、尿等培養(yǎng)物未分離嗜血桿菌。

2．2 臨床分布和季節(jié)性特點(diǎn)

科室分布呼吸內(nèi)科49株(47.1%)，其他內(nèi)科科室33株(31.4%)，重癥醫(yī)學(xué)科7株(6.7%)，外科8株(7.7%)，兒科8株(7.7%)。性別為男性患者檢出 59株(56.7%)，女性患者檢出 45株(43.3%)。年齡分布為0～1歲4株(含25天嬰兒1株)，2～6歲3株，7～17歲2株，18～40歲5株，41～50歲7株，51～60歲25株，61～92歲58株。菌株月份分布為:b型流感嗜血桿菌6月、8月各1株，7月2株;流感嗜血桿菌除2月和4月沒有檢出，其他月份均有分布;副流感嗜血桿菌全年均有檢出，以3－5月分布最多，副溶血嗜血桿菌在3月檢出。如果1－3月為春季，4－6月為夏季，7－9月為秋季，10－12月為冬季，則嗜血桿菌以春夏分布最多，特別是春季。見圖1。

圖1 嗜血桿菌月份分布圖

2．3 抗菌藥物藥敏情況

104株嗜血桿菌(不包括副溶血嗜血桿菌)對頭孢曲松、頭孢克洛、頭孢呋辛、左旋氧氟沙星、阿奇霉素保持較高的敏感性;氨芐西林、復(fù)方新諾明保持中度敏感，加β－內(nèi)酰胺酶抑制劑(氨芐西林/舒巴坦)敏感性有所增加;在所測試抗生素中未發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重耐藥現(xiàn)象。b型流感嗜血桿菌對氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、頭孢呋辛、頭孢曲松、左旋氧氟沙星、頭孢克洛100%敏感，對阿奇霉素保持中度敏感，對復(fù)方新諾明有較高程度的耐藥。1株副溶血嗜血桿菌對所測試抗生素(氨芐西林、氨曲南、阿奇霉素、頭孢噻肟、頭孢吡肟、左旋氧氟沙星、美洛培南、復(fù)方新諾明)均保持敏感。見表1。

表1 流感/副流感嗜血桿菌對常用抗生素敏感率

2．4 β－內(nèi)酰胺酶試驗(yàn)

105株嗜血桿菌中，有21株產(chǎn)β－內(nèi)酰胺酶，陽性率20%，其中流感嗜血桿菌9株(23.7%)，副流感嗜血桿菌12株(19.4%)，副溶血嗜血桿菌未檢測到β－內(nèi)酰胺酶。

2．5 抗菌藥物敏感率比對情況

38株流感嗜血桿菌與62株副流感嗜血桿菌對所測抗生素敏感率經(jīng)卡方檢驗(yàn)P＞0.05，說明兩組菌的敏感率差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。

表2 流感嗜血桿菌與副流感嗜血桿菌對抗生素敏感率比對表

我院104株嗜血桿菌與2013－2014全國細(xì)菌耐藥監(jiān)測菌株［3］敏感率比對表明:流感嗜血桿菌差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的是氨芐西林/舒巴坦、復(fù)方新諾明、頭孢呋辛、頭孢曲松;副流感嗜血桿菌差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的是氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、頭孢呋辛、左旋氧氟沙星。見表3。

表3 嗜血桿菌與文獻(xiàn)報(bào)道敏感率比對統(tǒng)計(jì)表 (%)

3 討論

嗜血桿菌屬存在于正常人上呼吸道，定值率達(dá)人群的50%，主要通過呼吸道感染，引起原發(fā)性和繼發(fā)性感染，原發(fā)性感染多由b型夾膜強(qiáng)毒株引起化膿性感染［1－2］。流感嗜血桿菌、副流感嗜血桿菌原發(fā)性和繼發(fā)性感染，包括腦膜炎、鼻咽炎、關(guān)節(jié)炎、心包炎、鼻竇炎、中耳炎、心內(nèi)膜炎及尿道炎等。溶血嗜血桿菌、副溶血嗜血桿菌均為口腔條件致病菌，引起咽炎，化膿性口腔炎及心內(nèi)膜炎等［1－2］。杜克嗜血桿菌是性傳播疾病軟下疳病原體，引起外陰膿皰，潰瘍、淋巴結(jié)腫大等［2］。劉一平［4］在尿道、前列腺、宮頸和陰道分離到53株副流感嗜血桿菌，實(shí)際上副嗜沫嗜血桿菌也可在陰道分泌物分離。

本研究回顧性地分析粵北人民醫(yī)院2014－2015年的全部細(xì)菌培養(yǎng)資料，僅發(fā)現(xiàn)痰培養(yǎng)分離到嗜血桿菌，包括流感流感嗜血桿菌、副流感嗜血桿菌和副溶血嗜血桿菌，未檢測到溶血嗜血桿菌、杜克嗜血桿菌、埃及嗜血桿菌、嗜沫嗜血桿菌、副嗜沫嗜血桿菌、遲緩嗜血桿菌，分離率為0.47%，說明嗜血桿菌在臨床分離率不高。同時(shí)由于嗜血桿菌生長環(huán)境要求較高，也間接地影響嗜血桿菌檢出率［2］。副流感嗜血桿菌在檢出的嗜血桿菌中占59.6%，說明我院副流感嗜血桿菌比較流行。b型流感嗜血桿菌，又稱乙型流感嗜血桿菌，為嗜血桿菌中含夾膜的強(qiáng)毒株，在嬰幼兒易引起嚴(yán)重疾病，特別是化膿性腦膜炎，但種植Hib疫苗的兒童，乙型流感嗜血桿菌感染明顯可以減少甚至消失［5－7］。本研究中檢測出4株乙型流感嗜血桿菌，但所幸對大部分抗生素100%敏感，僅復(fù)方新諾明有不同程度的耐藥。

臨床科室分布以內(nèi)科為主，呼吸內(nèi)科47.1%，其他內(nèi)科30.8%，重癥醫(yī)學(xué)科6.7%，兒科7.7%，外科僅為7.7%。由此可見，分離的嗜血桿菌在我院多流行于內(nèi)科性疾病，以呼吸道疾病最多。本研究還表明我院男性患者發(fā)病率高于女性患者，有可能為男性呼吸道疾病高發(fā)于女性的原因［8］。

年齡分布資料表明，我院的老年患者嗜血桿菌感染率最高，占79.8%。這可能與老年患者住院時(shí)間長、免疫力低下、接觸嗜血桿菌時(shí)間長等有密切的關(guān)系［8］。同時(shí)，流感嗜血桿菌、副流感嗜血桿菌是引起小孩腦膜炎的病原菌，也引起其他敗血癥、中耳炎、竇炎、慢性支氣管炎［9－10］。本研究顯示1歲內(nèi)的兒童共檢測到4株，特別是含有一位未滿月的嬰兒，應(yīng)加強(qiáng)警惕。

按月份統(tǒng)計(jì)，我院b型流感嗜血桿菌流行于6－8月份;流感嗜血桿菌除2、4月外其他月均檢測到，以5－7月最多;副流感嗜血桿菌全年均檢測到，集中在3－5月，尤以3月最多。以上資料表明，我院嗜血桿菌具有一定的季節(jié)性，以春季最多。而孫潺的報(bào)道為冬季流行高峰期［8］。

氨芐西林曾是治療嗜血桿菌首選藥［6］，由于耐藥酶的產(chǎn)生，敏感度有所下降，但加酶抑制劑后仍然保持較好的活性。本研究β－內(nèi)酰胺酶產(chǎn)生率為20%，低于文獻(xiàn)報(bào)道陽性率［8，10－11］，流感嗜血桿菌與副流感嗜血桿菌β－內(nèi)酰胺酶產(chǎn)生率基本相同。此外發(fā)現(xiàn)，盡管加了酶抑制但仍還有少數(shù)菌株耐藥，這可能這些菌株青霉素結(jié)合蛋白發(fā)生了變異有關(guān)，但是否如此還需進(jìn)一步探討［5］。

本研究藥敏結(jié)果與2013－2014年全國細(xì)菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)比較發(fā)現(xiàn)，我院流感嗜血桿菌對氨芐西林/舒巴坦、復(fù)方新諾明、頭孢呋辛、頭孢曲松敏感率高于全國的流感嗜血桿菌，氨芐西林、左旋氧氟沙星、阿奇霉素基本一致;我院副流感嗜血桿菌對氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、頭孢呋辛、左旋氧氟沙星敏感率高于全國的副流感嗜血桿菌，復(fù)方新諾明、頭孢曲松、阿奇霉素基本一致［3］。

從總的藥敏結(jié)果來看，除復(fù)方新諾明敏感率較低(51.0%)外，其他均保持較高敏感率，由以氨芐西林/舒巴坦、頭孢呋辛、頭孢曲松、左旋氧氟沙星、阿奇霉素最好。

綜上，我院分離的嗜血桿菌臨床菌株的流行具有季節(jié)性，以內(nèi)科分離率最高，除了復(fù)方新諾明外，其他抗菌藥物均保持較好的敏感性。

［1］ RAWLINGS B A，HIGGINS T S，HAN J K．Bacterial pathogens in the nasopharynx，nasal cavity，and osteomeatal complex during wellness and viral infection［J］．Am J Rhinol Allergy，2013，27 (1):39－42．

［2］ 張卓然，倪語星．臨床微生物學(xué)和微生物檢驗(yàn)［M］．3版．北京:人民衛(wèi)生出版社，2003:177－178．

［3］ 李 耘，呂 媛，薛 峰，等．中國細(xì)菌耐藥監(jiān)測研究2013至2014年腸桿菌科及嗜血桿菌監(jiān)測報(bào)告［J］．中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，39(2):103－119．［4］ 劉一平．泌尿生殖道嗜血桿菌的感染及臨床意義分析［J］．世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘(連續(xù)型電子期刊)，2015，15(36):88．

［5］ 王愛華．流感嗜血桿菌感染與耐藥［J］．中華實(shí)用兒科臨床雜志，2016，31(4):256－258．

［6］ 王明清，管嬌瓊，朱文勇，等．B型流感嗜血桿菌疫苗的研究進(jìn)展［J］．醫(yī)學(xué)研究雜志，2015，44(6):155－157，137．

［7］ 謝桂香，梁艷金，謝美興，等．股外側(cè)肌肉注射法在疫苗接種中的應(yīng)用觀察［J］．現(xiàn)代醫(yī)院，2010，10(11):87－88．

［8］ 孫 潺．成人呼吸道感染流感嗜血桿菌臨床特點(diǎn)與耐藥性研究［J］．中國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理，2015，25(24):144－145．

［9］ 孟亞輝．42例確診小兒社區(qū)獲得性流感嗜血桿菌肺炎病臨床分析［J］．中國農(nóng)村衛(wèi)生，2015，66(12):16．

［10］周 莉，周建春．800例手足口病患兒呼吸道副流感嗜血桿菌分型及藥敏分析［J］．實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2015，22(4):499－501．

［11］江秀愛，趙自云，姜 蓓，等．呼吸道嗜血桿菌屬的生物學(xué)分型及耐藥性分析［J］．國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，36(19):2840－2841，2843．

Clinical Characteristics and Antibiotic Susceptibility of Haemophilus Isolated from a Hospital

HUA Dexing，PENG Qing，ZENG Xanglian，et al

Objective To investigate the clinical characteristic and antibiotic susceptibility results of haemophilus isolated from Yuebei People’s Hospital．MethodsHaemophiuls strains were collected from the infected patients in the hospital from 2014－2015．The patients’age，gender，clinical departments and seasons of collection were analyzed．The antibiotics susceptibility profiles were also determined．ResultsHaemophilus influenza strains were detected in most months but not in February and April．Haemophilus parainfluenzae were detected in every month，but more in March and April．The most detected strains were haemophilus parainfluenzae，followed by haemophilus influenzae，haemophilus influenzae(type b) and haemophilus parahaemolyticus among the 105 strains of haemophilus，and the other haemophilus species were not detected．Most strained were isolated from the departments of internal medicine，especially from the department of respiratory medicine．Among the senior patients，the haemophiuls infection rate was the highest，but the infection was also found in children (including infants)．Except co－trimoxazole，the strains showed sensitivity to the tested antibitics．ConclusionHaemophilus in our hospital vary with the seasons and it is mainly epidemic in the departments of Internal Medicine．The strains are sensitive to antibiotics．

Haemophilus;Clinical Distribution;Antimicrobial Susceptibility Test

R446．5;R969

:Adoi:10．3969/j．issn．1671－332X．2016．09．021

國家自然科學(xué)基金(編號:81202569);廣東省普通高校青年創(chuàng)新人才項(xiàng)目

華德興 曾香連 羅 君:汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬粵北人民醫(yī)院 廣東韶關(guān) 512026

彭 青:南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院/南方醫(yī)科大學(xué)再生醫(yī)學(xué)研究所廣東廣州 510282

蔡聰藝:汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院 廣東汕頭 515041

蔡聰藝