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        半葉紫菜游離絲狀體培育技術(shù)

        2016-03-28 09:31:50唐興本陳百堯連紹興薛學(xué)坤龔琪本安健伏光輝孫苗苗
        水產(chǎn)養(yǎng)殖 2016年3期
        關(guān)鍵詞:條斑絲狀燒瓶

        唐興本,陳百堯,連紹興,薛學(xué)坤,龔琪本,安健,伏光輝,孫苗苗

        (1.連云港市海洋與水產(chǎn)科學(xué)研究所,江蘇連云港222046;2.中科院海洋研究所,山東青島266071;3.連云港市海洋與漁業(yè)局,江蘇連云港222000)

        半葉紫菜游離絲狀體培育技術(shù)

        唐興本1,陳百堯1,連紹興2,薛學(xué)坤3,龔琪本1,安健1,伏光輝1,孫苗苗1

        (1.連云港市海洋與水產(chǎn)科學(xué)研究所,江蘇連云港222046;2.中科院海洋研究所,山東青島266071;3.連云港市海洋與漁業(yè)局,江蘇連云港222000)

        中國(guó)是世界紫菜的主要生產(chǎn)國(guó)和出口國(guó),而主要栽培種類只有條斑紫菜和壇紫菜兩個(gè)品種,養(yǎng)殖品種相對(duì)比較單一,而紫菜新品種的開發(fā)和利用首要解決的一個(gè)問(wèn)題是苗種培育,也就是解決紫菜絲狀體的質(zhì)與量的問(wèn)題。

        我國(guó)的半葉紫菜主要分布在山東青島至遼寧大連的黃海西部海區(qū),通過(guò)培養(yǎng)半葉紫菜的游離絲狀體,用游離絲狀體接種貝殼進(jìn)行半葉紫菜苗種培育,或者將半葉紫菜游離絲狀體培養(yǎng)成熟,直接用游離絲狀體在半葉紫菜網(wǎng)簾上采集殼孢子,培養(yǎng)半葉紫菜的游離絲狀體,在一定程度上可以及時(shí)、足量、高質(zhì)量的解決網(wǎng)簾上半葉紫菜海上養(yǎng)殖的苗種供應(yīng)問(wèn)題。

        迄今為止,對(duì)半葉紫菜葉狀體的研究比較多,也有個(gè)別絲狀體培育成苗的研究,但未見關(guān)于半葉紫菜游離絲狀體培育技術(shù)方面的系統(tǒng)報(bào)道。

        1 使用種菜、工具、用水的準(zhǔn)備

        1.1種菜準(zhǔn)備

        2013年2月15日上午,在山東省青島市附近島嶼的巖石上,找到有半葉紫菜葉狀體的巖石,先鏟掉巖石上的藤壺、牡蠣殼,撿掉雜草、塊狀物,反復(fù)用干凈的海水盡可能的清除巖石和半葉紫菜葉狀體上的浮泥,將全部的紫菜葉狀體采集放在水桶里,到一個(gè)安全方便的地方,再次挑選長(zhǎng)度大于10 cm的葉狀體,要求葉狀體完整、無(wú)畸形、無(wú)病斑、無(wú)難以去除的附著物、表面具光澤,把葉狀體放在裝水的帶蓋的塑料桶內(nèi),之后運(yùn)到江蘇連云港的省紫菜良種繁育場(chǎng),待處理。

        1.2器具消毒準(zhǔn)備

        處理種菜、果孢子的用具有解剖盤、解剖刀、毛筆、紗布、脫脂棉、解剖剪刀、鑷子、一次性手套、玻璃培養(yǎng)皿、50 mL三角燒瓶20個(gè)等;擴(kuò)增的用具有量筒、量杯,100 mL、250 mL、500 mL三角燒瓶,3 000 mL、10 000 mL細(xì)口玻璃瓶等;消毒用具有酒精燈、酒精噴壺、燒水的鍋、電爐、70%的消毒酒精等。

        小型器皿放在燒水的鍋內(nèi)沸水消毒;不能加熱的器具酒精消毒;三角燒瓶蒸煮消毒;必要時(shí)用酒精噴壺消毒;房間用紫外線消毒,在半葉紫菜送到良種室前,做好上述消毒準(zhǔn)備工作。

        1.3培養(yǎng)海水的準(zhǔn)備

        所用海水符合養(yǎng)殖用水要求,鹽度28,經(jīng)過(guò)黑暗沉淀,再經(jīng)90℃加溫消毒處理,在半葉紫菜到良種室前,準(zhǔn)備好兩份海水備用,一份是10 000 mL加熱消毒的海水,一份是10 000 mL添加營(yíng)養(yǎng)鹽的培養(yǎng)液,前一份是處理種菜使用,后一份是將果孢子培養(yǎng)成游離絲狀體時(shí)使用。

        2 制作半葉紫菜游離絲狀體

        2.1處理種菜

        2月16日上午,在保種室的操作車間的操作臺(tái)上,先選擇個(gè)體大的半葉紫菜葉狀體,平攤在解剖盤里,用脫脂棉蘸取消毒海水,反復(fù)正反兩面擦洗半葉紫菜葉狀體,操作2~3次。然后,在白瓷盤中裝消毒海水,用毛筆仔細(xì)逐個(gè)正反兩面洗刷葉狀體2~3次。用消毒鑷子夾半葉紫菜葉狀體放入帶蓋的廣口瓶中,注入消毒海水,加蓋,往復(fù)振蕩廣口瓶,洗滌半葉紫菜葉狀體。之后從廣口瓶中取出葉狀體,用濾紙吸掉藻體上海水,將紫菜葉狀體平擺在洗刷并消毒的笊簾中,用消毒紗布蓋在葉狀體上,進(jìn)行陰干刺激24 h。

        2.2種菜放散果孢子

        2月17日,在多個(gè)三角燒瓶?jī)?nèi),分別添加40 mL培養(yǎng)液。

        將種菜平攤在解剖盤中,用解剖刀在半葉紫菜葉狀體的端部和前部,各取5 cm2大小的葉狀體小塊,用鑷子夾入50 mL的三角燒瓶中,每個(gè)瓶子1塊,共在20個(gè)小三角燒瓶中投放半葉紫菜葉狀體小塊。每個(gè)三角燒瓶加上標(biāo)簽,紀(jì)錄紫菜種的名稱、來(lái)源時(shí)間與地點(diǎn)、性狀等,整個(gè)操作爭(zhēng)取在在無(wú)菌的條件下進(jìn)行。將三角燒瓶放在僻靜的地方,3~5 d搖動(dòng)瓶子1次,一方面促進(jìn)殼孢子大量放散,另一方面讓果孢子均勻的沉淀于瓶底,3月20日用鑷子把種菜取出。這期間,光線強(qiáng)度為50~200 lx,水溫15~20℃,鹽度28。

        3 半葉紫菜游離絲狀體的擴(kuò)增

        3.1剛接種絲狀體的換瓶

        4月30日—5月10日,挑選、整理三角燒瓶?jī)?nèi)游離絲狀體,將肉眼觀察有明顯綠藻、硅藻、藍(lán)藻等污染以及肉眼還沒(méi)有觀察到絲狀體的瓶子,全部清理。通過(guò)統(tǒng)計(jì),20個(gè)50 mL的三角燒瓶,硅藻污染7個(gè),肉眼看不到游離絲狀體的5個(gè),藍(lán)藻污染的1個(gè),破碎瓶子1個(gè),成功培育出無(wú)污染的游離絲狀體6個(gè),成功率30%。

        在室內(nèi)操作臺(tái)上,準(zhǔn)備10個(gè)100 mL三角燒瓶和2 000 mL加熱處理的海水,在2 000 mL海水中加入營(yíng)養(yǎng)液制成培養(yǎng)液。由于大部分半葉紫菜游離絲狀體貼附在三角燒瓶底部或瓶壁,操作時(shí)用消過(guò)毒的毛筆將藻絲刷離瓶底或瓶壁,然后將藻絲及其原培養(yǎng)液倒入準(zhǔn)備好的100 mL三角燒瓶中,加入新的培養(yǎng)液到100 mL。用白紙封口放在適當(dāng)位置,貼上預(yù)先準(zhǔn)備好的標(biāo)簽,這樣一個(gè)換瓶子的操作就結(jié)束了,在這里要特別說(shuō)明的是整個(gè)操作要做到相互隔離,即每一個(gè)換瓶操作的器皿、工具、一次性手套等都是專用的,共同使用的器具在進(jìn)行下一個(gè)操作時(shí),要重新消毒處理;其二,在每一個(gè)換瓶操作中,每一個(gè)環(huán)節(jié)都要注意消毒處理,盡量減少每個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)絲狀體污染的可能性。

        營(yíng)養(yǎng)液的肥料主要為硝酸鈉、磷酸二氫鉀、檸檬酸鐵、碘化鉀等,施肥量為氮14×10-6、磷7×10-6、鐵1×10-6、鉀0.1×10-6,由于培養(yǎng)期間,培養(yǎng)液會(huì)不斷的蒸發(fā),為了穩(wěn)定培養(yǎng)液的鹽度,在換水間隔期間,根據(jù)實(shí)際情況,在培養(yǎng)液中加入一定量的蒸餾水。在此期間,光線強(qiáng)度為150~300 lx,水溫15~20℃,鹽度28。

        3.2游離絲狀體的擴(kuò)種培養(yǎng)

        5月25日以后,開始了半葉紫菜游離絲狀體的擴(kuò)增操作,由于半葉紫菜養(yǎng)殖試驗(yàn)、推廣尚處于探索階段,該良種場(chǎng)主要進(jìn)行了半葉紫菜游離絲狀體保種和小規(guī)模的擴(kuò)增,用果孢子培育的良種游離絲狀體數(shù)量也有限,具體擴(kuò)增的方法參照條斑紫菜游離絲狀體培育的相關(guān)技術(shù)操作。

        4 半葉紫菜游離絲狀體的保種

        4.1半葉紫菜游離絲狀體保種方法

        保種主要參照條斑紫菜游離絲狀體的保種方法。一級(jí)保種∶將純凈游離絲狀體分裝于試管或小三角燒瓶中,置于展示柜中,進(jìn)行長(zhǎng)年保存。二級(jí)保種∶取部分一級(jí)保存的游離絲狀體,分裝于100 mL三角燒瓶?jī)?nèi),置于10~15℃、100~120 lx環(huán)境中培養(yǎng),控制游離絲狀體低速增長(zhǎng),保證隨時(shí)擴(kuò)增需要。

        4.2半葉紫菜游離絲狀體保種效果

        采取液相低溫保存半葉紫菜游離絲狀體。從目前的情況看,保存的半葉紫菜游離絲狀體,絕大多數(shù)形態(tài)結(jié)構(gòu)正常、狀態(tài)良好,保持原種品系特性。

        5 半葉紫菜游離絲狀體的形態(tài)特點(diǎn)

        對(duì)半葉紫菜游離絲狀體、壇紫菜游離絲狀體、條斑紫菜游離絲狀體培育形態(tài)進(jìn)行了觀察,并將它們的形態(tài)特點(diǎn)進(jìn)行了比較,形成了一點(diǎn)粗淺的認(rèn)識(shí)。

        半葉紫菜游離絲狀體適應(yīng)溫度范圍比較廣,生長(zhǎng)迅速,紫黑色,為豆粒狀的舒展開來(lái)的藻絲團(tuán),無(wú)明顯雜藻、無(wú)不健康藻絲團(tuán);壇紫菜游離絲狀體適應(yīng)溫度高、鹽度高,生長(zhǎng)不成團(tuán),而是成單絲,長(zhǎng)長(zhǎng)的,容易纏在散氣石、氣管等地方;條斑紫菜游離絲狀體適應(yīng)溫度偏低,適應(yīng)環(huán)境能力因產(chǎn)地不同而不同,該保種室的游離絲狀體,以日本的條斑紫菜游離絲狀體適應(yīng)環(huán)境能力最強(qiáng),生長(zhǎng)速度最快。

        doi:10.3969/j.issn.1004-2091.2016.03.013

        收稿日期:(2015-07-09)

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