陳學(xué)清,陳小村

(臨潁縣人民醫(yī)院,河南臨潁462600)

酪氨酸硝基化對分泌性中耳炎致耳蝸損傷療效

陳學(xué)清,陳小村

(臨潁縣人民醫(yī)院,河南臨潁462600)

目的探討3-硝基酪氨酸應(yīng)用于分泌性中耳炎致耳蝸損傷的臨床效果。方法單純性中耳炎致耳蝸損傷的患者為對象，測定患者中耳積液的中NO含量、硝基酪氨酸含量及NOS活性，檢測前后的氣骨導(dǎo)平均聽閾變化。應(yīng)用SPSS21.0軟件，所獲數(shù)據(jù)采用方差分析、t檢驗和χ2檢驗。結(jié)果兩組治療前氣導(dǎo)聽閾比較，P＞0.05;骨導(dǎo)聽閾比較，P＜0.0005。同組治療前后比較，對照組氣導(dǎo)聽閾P＜0.0005；骨導(dǎo)聽閾比較P＞0.05。觀察組氣導(dǎo)聽閾P＜0.0005；骨導(dǎo)聽閾比較,P＜0.005。兩組治療后氣導(dǎo)聽閾P＜0.0005；骨導(dǎo)聽閾P＜0.0005。兩組治療前后差值比較，氣導(dǎo)聽閾P＜0.0005;骨導(dǎo)聽閾P＜0.0005。兩組中耳積液NO含量、硝基酪氨酸及NOS活性比較,P均＜0.0005。兩組顯效率比較，P＜0.005兩組總效率比較，P＜0.01。結(jié)論酪氨酸硝基化在分泌性中耳炎導(dǎo)致的耳蝸損傷中具有致病的作用，可避免酪氨酸硝基化對分泌性中耳炎致耳蝸損傷進行治療。

酪氨酸硝基化；一氧化氮；一氧化氮合酶；分泌性中耳炎/治療；耳蝸損傷

分泌性中耳炎的臨床表現(xiàn)主要為中耳部位積有漿液、黏液等，并伴有聽力下降,其屬一種中耳非化膿性的炎癥性疾病[1]。分泌性中耳炎在兒童中的發(fā)病率高達75％，臨床上往往容易引起耳蝸損傷，進而給患者造成更大的困擾[2]。機體內(nèi)一氧化氮含量的過量可能與分泌性中耳炎的發(fā)病有關(guān)，過量的自由基不僅會對內(nèi)耳產(chǎn)生氧化損傷。為此，我們自2014年3月—2015年12月間采用酪氨酸硝基化對分泌性中耳炎進行治療，取得了滿意療效?，F(xiàn)報道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料單純性中耳炎致耳蝸損傷90例，均為單耳患病。隨機分為兩組，對照組分泌性中耳炎伴有感音神經(jīng)性聽力下降者58例，男33例，女25例，年齡21～47歲，平均年齡34.5歲；觀察組分泌性中耳炎不伴有感音神經(jīng)性聽力下降者32例，男19例，女13例，年齡24～41歲，平均年齡29.1歲。所有病程均小于一個月，平均病程11.8 d，兩組一般資料比較，P＞0.05，無顯著性差異，具有可比性。

1.2 方法兩組在就診前的3個月里避免使用激素類的免疫抑制藥物，且無耳毒性藥物使用史及其他遺傳耳病史。治療前先對病史及其用藥情況進行考察、純音測試。確認各項指標無特殊性后，抽取患者的中耳中的漿液和黏液，穿刺耳膜抽取積液同時注射潑尼松龍，給予口服抗生素及糖皮質(zhì)激素治療。對患者中耳積液的中一氧化氮（NO）含量、硝基酪氨酸含量及一氧化氮合酶（NOS）活性進行測定。并對患者治療前后的氣骨導(dǎo)平均聽閾。給患者發(fā)放調(diào)查問卷并統(tǒng)計患者的治療效果。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用SPSS 21.0軟件，所獲數(shù)據(jù)采用方差分析、t檢驗和χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者氣骨導(dǎo)平均聽閾治療前后變化情況見表1。

表1 兩組氣骨導(dǎo)平均聽閾治療前后變化對比±s，db)

兩組治療前氣導(dǎo)聽閾比較，t=0.59674,P＞0.05;骨導(dǎo)聽閾比較，t=7.4893,P＜0.0005。同組治療前后比較，對照組氣導(dǎo)聽閾比較，t=14.044，P＜0.0005；骨導(dǎo)聽閾比較，t=1.3959，P＞0.05。觀察組氣導(dǎo)聽閾比較，t=7.3721，P＜0.0005；骨導(dǎo)聽閾比較，t= 2.7975，P＜0.005。兩組治療后氣導(dǎo)聽閾比較，t=4.3085，P＜0.0005；骨導(dǎo)聽閾比較，t=4.6236，P＜0.0005。兩組治療前后差值比較，氣導(dǎo)聽閾比較，t=13.037，P＜0.0005;骨導(dǎo)聽閾比較，t= 13.274，P＜0.0005。

組別n氣導(dǎo)聽閾骨導(dǎo)聽閾對照組治療前5848.6±10.119.6±5.1治療后5825.4±7.5*18.1±6.4*觀察組治療前3249.9±9.530.1±8.2治療后3232.9±8.6*24.8±6.9

2.2 兩組患者的中耳積液NO含量、硝基酪氨酸含量及NOS活性比較治療組患者的NO含量水平顯著提高，NOS活性也明顯增加，可見酪氨酸硝基化會加重耳蝸損傷。見表2。

表2 兩組患者中耳積液NO含量、硝基酪氨酸及NOS活性比較(±s)

兩組中耳積液NO含量、硝基酪氨酸及NOS活性比較,t= 3.9512～10.167,P均＜0.0005。

組別nNO含量硝基酪氨酸NOS活性(μ mol/L)(nmol/L)(U)對照組58138.75±41.0898.21±11.1674.33±27.13治療組32176.25±42.74*136.93±24.9*98.89±30.14*

2.3 兩組療效比較對照組58例，顯效9例，占15.5％；有效28例，占48.3％；無效21例，占36.2％，有效率58.6％。觀察組32例，顯效15例，占46.87％；有效14例，占43.75％；無效3例，占9.37％，有效率90.6％。兩組顯效率比較，χ2=10.369,P＜0.005；兩組總效率比較，χ2=7.5922,P＜0.01。

3 討論

分泌性中耳炎具有漿液及黏液積聚在中耳部，并伴有聽力下降等特征，且常引發(fā)中耳粘連及聽骨壞死等并發(fā)癥，嚴重時甚至?xí)?dǎo)致兒童語言發(fā)育障礙[3]。目前,關(guān)于分泌性中耳炎的發(fā)病機制尚不明確，多數(shù)學(xué)者認為該癥是由于各種易感因素而引起的一氧化氮釋放增加，或者其他代謝產(chǎn)物導(dǎo)致的體內(nèi)酪氨酸硝基化。而酪氨酸硝基化則是指人體內(nèi)游離酪氨酸或蛋白質(zhì)上的酪氨酸殘基在NO參與作用下，體內(nèi)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)由此發(fā)生改變，從而引起蛋白質(zhì)功能障礙等變化。酪氨酸硝基化后，對線粒體損傷極大，同時也強烈抑制酪氨酸的磷酸化，導(dǎo)致蛋白質(zhì)的正常功能嚴重受損。硝基酪氨酸是蛋白質(zhì)上或者游離的酪氨酸硝基化的產(chǎn)物，是一種穩(wěn)定的標志物，同時可準確有效的反應(yīng)體內(nèi)的酪氨酸硝基化水平[4]。分泌性中耳炎由于3-硝基酪氨酸的誘導(dǎo)，內(nèi)耳毛細胞會發(fā)生凋亡和死亡，引起炎癥的耳蝸損傷，嚴重者導(dǎo)致患者的聽力下降甚至形成神經(jīng)性耳聾。而通過總結(jié)大量研究結(jié)果,其引發(fā)分泌性中耳炎主要有以下幾點：（1）咽鼓管的功能性障礙，如咽鼓管阻塞或其清潔和防御能力下降。肥大的腺樣體、鼻咽癌、鼻竇炎、肥厚性鼻炎等各種鼻咽部的疾病極易引起患者的咽鼓管機械性阻塞。小兒肌肉薄弱、腭裂或咽鼓管表明缺乏表明活性物質(zhì)均能引發(fā)咽鼓管的功能性阻塞[5]。（2）由微生物感染引起的炎性疾病，例如一些細菌和病毒等感染。（3）細胞因子等免疫因子引起的免疫反應(yīng)導(dǎo)致炎癥發(fā)生。（4）神經(jīng)能性炎癥機制引起的分泌性中耳炎。研究報道，P物質(zhì)水平升高導(dǎo)致患者中耳黏膜的血管通透性增加，血管發(fā)生擴張。同時P物質(zhì)濃度越高，促進腺體分泌的作用更強烈和持久，引起的中耳積液發(fā)病時間越長[6]。（5）參與介導(dǎo)誰分子運輸?shù)乃ǖ赖鞍滓鸬难装Y性反應(yīng)。（6）氧自由基學(xué)說。機體內(nèi)由于各項因素而產(chǎn)生過量的自由基往往會極大的增重患者的病情，物質(zhì)的過氧化使得細胞組織損傷，發(fā)生相應(yīng)的功能障礙。同時，過量氧自由基會改變細胞膜的流動性和通透性，引起細胞膜破裂等時易導(dǎo)致發(fā)生細胞的死亡[7]。

當患者發(fā)生分泌性中耳炎后，體內(nèi)的NO含量急劇增加，對核酸、蛋白質(zhì)及脂質(zhì)等大分子物質(zhì)生物功能活性造成極大的阻礙。在這樣的炎性反應(yīng)作用下，機體內(nèi)的平衡被打破，抗氧化物質(zhì)水平減低，最終導(dǎo)致機體的抗氧化作用下降。而就酪氨酸硝基化后的主要影響則有以下幾個方面：（1）酪氨酸硝基化發(fā)生后，由于線粒體膜上的超氧化物歧化酶的蛋白結(jié)構(gòu)被破壞，引起呼吸鏈的傳遞障礙，線粒體合成能量的能力大大減弱，不足以給細胞功能，最終導(dǎo)致細胞由于能量衰竭為走向死亡。（2）酪氨酸硝基化引起的內(nèi)耳細胞死亡或凋亡的直接結(jié)果是內(nèi)耳組織的損傷，使得相應(yīng)的功能受損，或者降低相應(yīng)的生物活性。（3）酪氨酸硝基化的產(chǎn)物是硝基酪氨酸，硝基酪氨酸參與導(dǎo)致DNA損傷，對蛋白質(zhì)的合成轉(zhuǎn)錄過程有著極大的阻礙作用，從而引起相應(yīng)的細胞損傷，進一步導(dǎo)致細胞組織的功能損害[8]。

研究結(jié)果表明，治療后患者的氣骨導(dǎo)聽閾明顯降低,且治療組的降低程度更為顯著，可見降低酪氨酸硝基化對提高患者的治療效果有重要的意義。同時，檢測結(jié)果表明治療組患者的NO含量水平顯著提高，NOS活性也明顯增加，可見酪氨酸硝基化對耳蝸損傷加重明顯。最后，患者的整體臨床治療效果調(diào)查顯示治療組的治療效果明顯優(yōu)于對照組，具有顯著性差異。

綜上所述，機體內(nèi)酪氨酸硝基化水平升高導(dǎo)致分泌性中耳炎患者的耳蝸損傷，這也給研究者提供了一個新的分泌性中耳炎的治療思路，對進一步研究分泌性中耳炎引起的耳蝸損傷有著重要的意義。

[1]楊燁,錢曉云,陳杰,等.中耳炎患者人工耳蝸植入二例報告[J].聽力學(xué)及言語疾病雜志,2014,22(4):440-441.

[2]王明婧.乳突輪廓化聯(lián)合鼓膜置管治療難治性分泌性中耳炎[J].安徽醫(yī)藥,2014,(13):311-313.

[3]郭文杰,江瀾.氫氣生理鹽水腹腔注射對豚鼠電離輻射所致耳蝸損傷的影響[J].山東醫(yī)藥,2013,53(38):25-27.

[4]李洪路.分泌性中耳炎患者免疫狀態(tài)及耳積液NO、IFN-γ、IL-2的變化研究[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報,2012,9(18):42-43.

[5]宋海燕,董楊,王靜,等.耳聾左慈丸“藥對”拆方拮抗慶大霉素所致耳蝸毛細胞損傷的研究[J].上海中醫(yī)藥雜志,2013,(8):70-73.

[6]閆宏嶺,陳麗君.克拉霉素聯(lián)合糖皮質(zhì)激素霧化吸入治療分泌性中耳炎臨床療效觀察[J].山西醫(yī)藥雜志,2014,43(19):2304-2305.

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The Nitro Tyrosine on Secretory Otitis Media to Cochlear Damage Effect

Chen Xueqing，Chen Xiaocun
(People's Hospital of Linyin County,Linying 462600,Henan)

Objective To study the 3-nitro tyrosine with secretory otitis media were applied to the clinical effect of cochlear damage.Methods Simple otitis media patients to cochlear damage as the object,the NO content in the pa?tients with middle ear effusion,nitro tyrosine content and NOS activity,and analysis of the bones guide average threshold of patients before and after treatment.SPSS21.0 application software,the data obtained using analysis of variance,t test and χ2test.Results The two groups before treatment air conduction audibility threshold comparison,P＞0.05.Bone con?duction audibility threshold comparison,P＜0.0005.Group comparison before and after the treatment,control air conduc?tion audibility threshold,P＜0.0005.Bone conduction audibility threshold is P＞0.05.Observation group air conduction au?dibility threshold P＜0.0005.Bone conduction audibility threshold is，P＜0.005.The two groups after treatment gas guide auditory threshold,P＜0.0005.Bone conduction audibility threshold，P＜0.0005.Difference comparison before and after treatment in both groups,air conduction audibility threshold,P＜0.0005.Bone conduction audibility threshold,P＜0.0005. Two groups of middle ear effusion,nitrotyrosine and NOS activity,NO content,P＜0.0005.Two groups show efficiency comparison,P＜0.005 two groups overall efficiency comparison,P＜0.01.Conclusion The nitro tyrosine in secretory oti?tis media leads to a pathogenic role in the cochlea damage,can avoid the nitro tyrosine to treat secretory otitis media to co?chlear damage.

Nitro tyrosine;Nitric oxide;Nitric oxide synthase;Secretory otitis media/therapy;Cochlear damage

R746.21

：A

：1008-4118（2016）04-0036-03

10.3969/j.issn.1008-4118.2016.04.011

2016-11-15