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慢性HBV感染不同免疫狀態(tài)與外周血T、B細胞亞群和NK細胞的相關(guān)性分析*

鄒劍

(深圳市公安邊防支隊衛(wèi)生隊檢驗科，廣東深圳518045)

摘要：目的探討慢性HBV感染不同免疫狀態(tài)與外周血T、B細胞亞群和NK細胞的相關(guān)性。方法選取2013年3月-2014年12月我院收治的慢性HBV患者118例，根據(jù)不同免疫狀態(tài)分為免疫耐受組(39例)、免疫清除組(37例)、免疫不全組(42例)，并選取同期體檢中心健康人35例作為對照組。比較不同組別中T、B細胞亞群和NK細胞相關(guān)性。結(jié)果四組CD3+細胞百分比和絕對數(shù)比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。各組CD4+細胞及免疫清除組CD8+細胞、NK細胞、B細胞百分比和絕對數(shù)與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。免疫耐受組和免疫不全組CD4+細胞、CD8+細胞、NK細胞百分比與免疫清除組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。免疫耐受組和免疫不全組CD4+細胞及NK細胞絕對數(shù)與免疫清除組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論慢性HBV感染者細胞免疫和淋巴細胞亞群處于紊亂狀態(tài)，外周血T、B細胞亞群和NK細胞水平檢測對患者免疫功能、病情評估、治療有重要價值。

關(guān)鍵詞：慢性乙肝；免疫；T淋巴細胞；NK細胞；B淋巴細胞

慢性HBV感染為世界公共衛(wèi)生問題，我國為感染大國，流行病率約為7.2%[1]。HBV屬嗜肝DNA病毒科，具有較強抵抗能力，室溫下可存活7d，在低溫冰箱中可存活數(shù)年。目前臨床無治療特效藥，主要以抗病毒為主，機體免疫功能狀況在慢性HBV治療中發(fā)揮重要作用，因此治療進展取決于病毒強度和機體免疫功能[2]。2011年國際肝病協(xié)會將慢性HBV感染自然過程劃分為免疫耐受期、免疫清除期、免疫不全期，不同感染時期機體免疫功能不同[3]。為探究慢性HBV感染不同免疫狀態(tài)與外周T、B細胞亞群及NK細胞相關(guān)性，筆者研究如下。

1資料與方法

1.1一般資料選取2013年3月-2014年12月我院收治慢性HBV患者118例，根據(jù)不同免疫狀態(tài)分為免疫耐受組(39例)、免疫清除組(37例)、免疫不全組(42例)，并選取同期體檢中心健康人35例作為對照組。四組患者在性別構(gòu)成比、年齡上比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，所有患者均自愿參加本次研究，并簽署知情同意書。

1.2入組標準(1)患者入院后根據(jù)病史、臨床癥狀，結(jié)合實驗室檢查均明確診斷為慢性HBV感染，并根據(jù)感染狀態(tài)明確分組。(2)排除合并有其它類型肝炎患者。(3)排除近期1月內(nèi)有使用免疫抑制劑、核苷酸類藥物、免疫調(diào)節(jié)劑患者。(4)排除進展為肝癌，合并有嚴重心肺腎腦障礙患者。(5)排除合并有重癥慢性疾病，如高血壓、糖尿病患者。

1.3方法檢測4組研究對象CD3+細胞、CD4+細胞、CD8+細胞、NK細胞及B細胞水平。肝功能檢測采用AEROSET全自動生化儀器檢測。HBV血清標記物采用分辨熒光分析法檢測。HBV-DNA采用實時熒光探針定量聚合酶鏈反應方法檢測。外周淋巴細胞采用熒光標記流式細胞技術(shù)，抽取研究對象靜脈血，采用四色淋巴細胞亞群試劑檢測。血細胞采用全血自動分析儀檢測。T、B淋巴細胞亞群及NK細胞計算=外周細胞淋巴細胞絕對數(shù)×T、B淋巴細胞亞群及NK下?lián)馨俜直萚4]。

2結(jié)果

2.1四組CD3+細胞、CD4+細胞、CD8+細胞、NK細胞及B細胞百分比比較見表1。

組別例數(shù)CD3+細胞CD4+細胞CD8+細胞NK細胞B細胞免疫耐受組3971.2±8.034.5±5.1ab27.6±5.8ab13.2±4.6b12.7±4.0免疫清除組3770.6±9.530.6±5.2a32.3±6.2a9.6±4.1a15.8±3.7a免疫不全組4269.6±9.435.5±4.2ab28.2±5.9ab12.9±3.8b13.1±3.2對照組3572.1±8.240.2±6.723.7±5.714.4±5.511.6±4.0

注:a與對照組比較P<0.05，b與免疫清除組比較P<0.05。

2.2四組CD3+細胞、CD4+細胞、CD8+細胞、NK細胞及B細胞絕對數(shù)比較見表2。

組別例數(shù)CD3+細胞CD4+細胞CD8+細胞NK細胞B細胞免疫耐受組391460±118762±197ab581±158280±65b246±55免疫清除組371429±311581±193a591±135a211±55a301±65a免疫不全組421481±290707±182ab574±166261±61b224±51對照組351571±419960±189556±174322±67231±54

注:a與對照組比較P<0.05，b與免疫清除組比較P<0.05。

3討論

慢性HBV感染自然分期分為免疫耐受期、免疫清除期、免疫不全期，免疫耐受期為HBV攜帶者初期表現(xiàn)，表現(xiàn)為HBsAg和HBeAg陽性，HBV-DBA陽性，但肝功能正?；蛴休p度炎癥反應、慢性肝纖維化進展，可持續(xù)數(shù)年甚至十年[5]。免疫清除期為慢性HBV感染者癥狀表現(xiàn)開始期，肝功能開始出現(xiàn)明顯異常，伴有丙氨酸轉(zhuǎn)移酶(ALT)間歇性或持續(xù)升高，肝組織出現(xiàn)中、重度炎癥反應，肝纖維化發(fā)展迅速，嚴重者可發(fā)生為肝硬化或肝衰竭[6]。免疫不全期又稱為非活動期，表現(xiàn)為HBsAg陰性而抗-HBeAg陽性，HBV-DNA水平持續(xù)降低或檢測不出，肝組織炎癥反應較輕，ALT水平正常，為HBV感染通過獲得性免疫控制結(jié)果[7]。

研究指出，HBV感染者肝細胞并不直接受HBV病毒損傷，而是病毒引起機體免疫反應導致宿主細胞免疫受損，而細胞免疫為導致宿主細胞損傷主要發(fā)生機制。T淋巴細胞為機體免疫反應主要主導細胞，其中CD3+為總T細胞。根據(jù)T細胞表現(xiàn)功能不同可分為CD4+和CD8+兩個亞群，CD4+為輔助T細胞，可誘導和輔助發(fā)生免疫反應，并能分泌白介素2(IL-2)、干擾素等炎癥因子，CD8+細胞免疫系統(tǒng)中清除病毒主要效應細胞。機體內(nèi)各T淋巴細胞相互輔助、相互制約發(fā)揮免疫功能，如免疫平衡發(fā)生紊亂則可降低患者免疫功能。本次研究得出，各組間CD3+細胞百分比和絕對數(shù)比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，分析指出，慢性HBV感染患者在免疫過程中由CD4+和CD8+細胞直接參與反應，并不影響CD3+水平。本次研究得出，各組CD4+細胞百分比和絕對數(shù)與對照組比較均降低，而CD8+水平升高。研究指出，免疫反應過程中CD4+遭受破壞而降低，提示機體免疫功能不足，不能清除游離HBV病毒，而CD8+細胞升高可進一步抑制CCD4+細胞生成，降低免疫功能并增強對肝細胞損傷。B細胞為人體體液免疫中主要細胞，本次研究得出，免疫清除組中B細胞百分比和絕對數(shù)均高于對照組。HBV感染人體后，可激發(fā)免疫系統(tǒng)促使B細胞轉(zhuǎn)化為漿細胞，產(chǎn)生相應抗體，以發(fā)揮免疫和保護功能。NK細胞為人體天然免疫主要細胞，同時調(diào)節(jié)獲得性免疫細胞，NK細胞通過CD8+細胞途徑殺傷病毒細胞，并可通過死亡受體系統(tǒng)誘導細胞凋亡，將受病毒感染細胞清除，還能分泌大量炎癥細胞和免疫調(diào)節(jié)因子發(fā)揮抗病毒作用。本次研究中，免疫清除組中NK細胞百分比和絕對數(shù)低于對照組，且免疫耐受組和免疫不全組NK細胞百分比和絕對數(shù)相對降低。分析指出，NK細胞在慢性HBV感染者體內(nèi)活性降低，并和慢性程度和病情嚴重程度有一定相關(guān)性。

綜上所述，慢性HBV感染者體內(nèi)淋巴細胞亞群失去平衡，臨床中通過檢測患者外周淋巴細胞亞群水平，可評估患者病情、進展時期，具有一定臨床價值。

參考文獻：

[1]王娟華,顧錫炳,朱銀芳，等.慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平與濾泡輔助性T淋巴細胞的關(guān)系和意義[J].中華實驗和臨床病毒學雜志,2013,27(5):351-353.

[2]王姣,鄧洪,謝冬英，等.HBV特異性CTLs表面CD244和PD-1共表達與慢性乙型肝炎嚴重程度的相關(guān)性[J].中國病理生理雜志,2012,28(12):2254-2260.

[3]劉蓮,王慰,黃艷，等.HBV攜帶者外周血中輔助性T淋巴細胞1/輔助性T淋巴細胞2相關(guān)細胞因子的研究[J].中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志,2014,24(6):336-337,353.

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[5]謝冬英,劉瓊,謝俊強，等.乙型肝炎病毒特異性CD8+T淋巴細胞表達T淋巴細胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3和程序性死亡受體-1的水平及其與肝臟炎癥活動度的相關(guān)性[J].中華傳染病雜志,2013,31(5):285-289.

[6]姚思敏,劉映霞,李曉鶴，等.慢性乙型肝炎患者外周血Th17細胞及相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子表達的檢測[J].中華實驗和臨床病毒學雜志,2015,29(1):2-4.

[7]華忠,顧錫炳,湯琴，等.慢性乙型肝炎患者不同HBV DNA水平誘導細胞免疫不同及其意義[J].實用醫(yī)學雜志,2013,29(22):3718-3720.

收稿日期(2015-10-12)

doi:10.3969/j.issn.1004-7115.2016.01.030

中圖分類號：R446.6

文獻標識碼：B

文章編號：1004-7115(2016)01-0078-02

作者簡介：*鄒劍，主要從事臨床檢驗工作。