陳賽英，蘇成芳，朱啟江

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銅綠假單胞菌聯(lián)合TP方案化療對復(fù)發(fā)性卵巢癌患者免疫功能影響以及療效觀察

陳賽英，蘇成芳，朱啟江

[摘要]目的：觀察銅綠假單胞菌注射液(PA-MASH)聯(lián)合TP方案化療對復(fù)發(fā)性卵巢癌患者免疫功能影響并觀察其療效。方法：復(fù)發(fā)性卵巢癌患者46例，觀察組23例，對照組23例，2組采用相同的化療方案，觀察組加用銅綠假單胞菌注射液，治療結(jié)束后分別檢測患者的免疫指標并評價臨床療效。結(jié)果：觀察組IFN-Γ和IL-2的血清濃度較治療前升高，IL-4和IL-10的血清濃度降低，治療前后差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；觀察組治療后Karnofsky評分顯著高于對照組治療后的評分，明顯改善患者的體力狀況；觀察組的臨床總有效率(82%)高于對照組(57%)。結(jié)論：銅綠假單胞菌注射液與化療藥物聯(lián)合使用可以提高患者的細胞免疫功能，改善患者的體力狀況，提高臨床療效，是卵巢癌患者理想的輔助治療藥物。

[關(guān)鍵詞]卵巢腫瘤; 銅綠假單胞菌注射液; 化療; 免疫功能; 治療結(jié)果

卵巢癌是因早期無癥狀，發(fā)病時多屆晚期，極易復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，5年生存率僅為30%~40%[1]?；熓峭砥诤蛷?fù)發(fā)性卵巢癌的主要治療手段，在控制腹水以及預(yù)防復(fù)發(fā)的同時也會對機體產(chǎn)生不良反應(yīng)，進一步的降低機體的免疫功能[2]。銅綠假單胞菌注射液是一種細菌類生物制劑，由滅活的銅綠假單胞菌——敏感血凝菌毛株(PA-MASH)制備而成，能夠有效激活人體免疫反應(yīng)，預(yù)防腫瘤的復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移。本研究對銅綠假單胞菌聯(lián)合TP方案化療對復(fù)發(fā)性卵巢癌患者免疫功能的影響及其臨床療效進行了觀察探討，旨在為尋找最佳的治療方案提供可靠依據(jù)。

1資料與方法

1.1臨床資料我院2008年1月-2012年12月卵巢癌復(fù)發(fā)腹水患者共46例，均行理想的腫瘤細胞減滅術(shù)。其中漿液性囊腺癌18例，粘液性囊腺癌13例，子宮內(nèi)膜樣癌11例，透明細胞癌4例，高分化25例，中分化15例，低分化6例。中位年齡53.2歲。所有患者均經(jīng)B超和磁共振證實有中等量或大量腹水，連續(xù)監(jiān)測CA125水平3次以上均逐漸升高，腹水脫落細胞學(xué)檢查證實有腫瘤細胞。所有患者均簽署知情同意書。按隨機表將患者分為觀察組23例(銅綠假單胞菌注射液+TP方案化療)和對照組23例(單純TP方案化療)。 2組患者病例類型和分期情況無顯著性差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2治療方法采用紫杉醇靜脈化療(135 mg/m2，第1天)、洛鉑(50 mg/m2，第1天)，每21天為1個周期，共4個周期。觀察組聯(lián)合銅綠假單胞菌注射液5 ml(北京萬特爾生物制藥有限公司生產(chǎn)，規(guī)格為每支1.0 ml，每毫升含菌1.6×109~2.0×109，腹腔灌注化療。首次應(yīng)用銅綠假單胞菌患者在腹腔化療前3 h在上臂皮下注射劑量為0.5 ml，觀察有無過敏反應(yīng)，如無過敏反應(yīng)方可繼續(xù)使用。

1.3觀察指標每個療程開始前1~2 d行血常規(guī)、肝腎功能檢查，觀察藥物毒副反應(yīng)并記錄，化療開始后每周檢查血常規(guī)2~3次，在治療前后盲法進行Karnofsky評分；化療前后抽取患者靜脈血并采用雙抗體夾心ELISA(試劑盒購自上海西塘生物科技有限公司)測定患者血清中細胞因子(IFN-Γ，IL-2，IL-4，IL-10)變化情況，觀察藥物反應(yīng)，記錄不良反應(yīng)的發(fā)生時間、表現(xiàn)、程度、處理經(jīng)過及轉(zhuǎn)歸。

1.4療效判斷根據(jù)RECIST1.1[3]方法評價療效。臨床緩解情況分為完全緩解(CR):所有靶病灶消失且淋巴結(jié)直徑減少到10mm以下；部分緩解(PR):靶病灶最長徑之和與基線狀態(tài)比較減少30%；疾病進展(PD)：靶病灶最長徑之和與治療之后所記錄到的最小的靶病灶最長徑之和比較，增加20%且靶病灶必須絕對增大5 mm以上或者出現(xiàn)一個或多個新病灶；疾病穩(wěn)定(SD):靶病灶最長徑之和縮小未達部分緩解，或增大未達疾病進展。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法采用PSS130.軟件，計量資料的比較用t檢驗，計數(shù)資料比較用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.12組患者化療前后外周血細胞因子IFN-Γ，IL-2，IL-4，IL-10水平比較觀察組IFN-Γ和IL-2的血清濃度較治療前升高，而IL-4和IL-10的血清濃度降低，治療前后比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；對照組IFN-Γ和IL-2的血清濃度較治療前升高，而IL-4和IL-10的血清濃度降低，治療前后比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

±s)

注：與對照組治療前比較，#P<0.05；與觀察組治療前比較，*P<0.05；與對照組治療后比較，△P<0.05。

2.22組患者化療前后Karnofsky評分比較2組化療前后Karnofsky評分比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；觀察組治療后Karnofsky評分顯著高于對照組治療后的評分，說明銅綠假單胞菌注射液可以明顯改善患者的體力狀況。見表2。

組別治療前治療后觀察組75.20±7.1193.75±6.18*對照組78.20±7.4586.75±8.06*△

注：與對照組治療前比較，*P<0.05；與對照組治療后比較，△P<0.05。

2.32組患者臨床療效比較對照組臨床CR 2例，PR 11例，總有效率為57%，觀察組的臨床CR 7例，PR 12例，總有效率為82%，明顯高于對照組的57%。見表3。

表3　2組患者臨床療效比較 (n，%)

3討論

銅綠假單胞菌注射液是銅綠假單胞菌甘露糖敏感血凝菌毛株(PA-MSHA)的制劑，由中國大連醫(yī)科大學(xué)微生物專家牟西亞教授盡40年研發(fā)并于1984年4月成功建立。最新研究發(fā)現(xiàn)，PA-MSHA不但能激活機體的抗腫瘤免疫反應(yīng)，其MSHA菌毛上的甘露糖結(jié)合蛋白還能與腫瘤細胞表面的甘露糖靶向結(jié)合，直接誘導(dǎo)多種腫瘤細胞如乳腺癌、宮頸癌、肝癌、肺癌、結(jié)腸癌等腫瘤細胞凋亡[4]。銅綠假單胞菌注射液主要通過激活多種toll樣受體，誘導(dǎo)抗原提呈細胞，恢復(fù)機體免疫監(jiān)視功能[5]；另外可以誘導(dǎo)凋亡，改變腫瘤生物學(xué)行為，抑制腫瘤細胞的生長與繁殖；并且可以降低腫瘤細胞的侵襲能力，阻止腫瘤細胞播散和轉(zhuǎn)移。

研究證實，腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與機體的免疫功能密切相關(guān)，卵巢癌患者機體的免疫功能較正常人低下[6]，在機體的抗腫瘤免疫應(yīng)答中，存在Th1向Th2漂移造成的細胞免疫抑制狀態(tài)[7]。IL-2和IFN-γ由Th1細胞分泌，主要調(diào)節(jié)細胞免疫反應(yīng)；而IL-4和IL-10由Th2細胞分泌，主要調(diào)節(jié)體液免疫反應(yīng)，其中以細胞毒性T細胞(CTL)為效應(yīng)細胞的細胞免疫是人體最主要的抗腫瘤免疫機制。本研究發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)性卵巢癌患者化療前TL-4、TL-10占優(yōu)勢，存在Th2漂移，與以往的研究結(jié)果相類似?；熥鳛橐环N重要的治療手段，在卵巢癌的治療中具有重要意義，化療藥物均為細胞毒性藥物，在殺滅腫瘤細胞發(fā)揮治療作用的同時也對正常細胞具有殺滅作用，使機體原先的免疫抑制狀態(tài)進一步減弱。

銅綠假單胞菌注射液作為一種非特異性免疫刺激物，用于復(fù)發(fā)性卵巢癌的輔助治療，本研究表明，銅綠假單胞菌注射液能明顯改善患者的體力狀況，對照組治療后Karnofsky評分與治療前相比下降，而觀察組治療后顯著上升；同時免疫指標結(jié)果顯示Th1型細胞因子IFN-Γ，IL-2在觀察組明顯升高(P<0.01)，Th2型細胞因子IL-4，IL-10在觀察組明顯降低(P<0.01)。研究中應(yīng)用銅綠假單胞菌注射液后Th1型細胞因子IFN-Γ，IL-2水平升高，而Th2型細胞因子IL-4，IL-10水平下降，說明銅綠假單胞菌注射液能促進免疫反應(yīng)由Th2型向Th1型轉(zhuǎn)化，顯示銅綠假單胞菌注射液增強機體的細胞免疫，從而達到殺滅腫瘤的目的，最終顯著的提高了臨床化療療效。

在臨床觀察中發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用銅綠假單胞菌的觀察組復(fù)發(fā)卵巢癌患者的腹水在化療后明顯消退直至消失，腫瘤標記CA125在化療2-3個療程后逐漸降至正常，而對照組仍有8例患者腹水未消失，2組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。觀察組腹腔灌注銅綠假單胞菌后患者會出現(xiàn)不同程度的發(fā)燒，腹痛，程度較輕，經(jīng)對癥處理后好轉(zhuǎn)。

總之，使用銅綠假單胞菌聯(lián)合TP方案化療可提高臨床療效，對改善患者全身狀況，惡性腹水明顯有效，且副作用低，是較好的化療輔助用藥，值得臨床推廣應(yīng)用。

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[作者單位] 解放軍第81醫(yī)院 婦產(chǎn)科，江蘇 南京 210029

·論著研究·

Influence of TP regimen chemotherapy with Pseudomonas aeruginosa on immune function and clinical effects in patients with recurrent ovarian cancer

CHENSai-ying,SUCheng-fang,ZHUQi-jiang．

(DepartmentofObstetricsandGynecology,TheNo.81HospitalofthePLA,Nanjing,Jiangsu210029,China)

[Abstract]Objective:To evaluate the influence of TP regimen chemotherapy with Pseudomonas aeruginosa on immune function in patients with recurrent ovarian cancer．Methods:46 patients with recurrent ovarian cancer (23 in the observation group and 23 in the control group)were included.Both groups applied the same chemotherapy,and the observation group was added with Pseudomonas aeruginosa．Immune function,clinical effects and changes of other indicators of patients were measured before and after the treatment.Results:IFN-Γand IL-2 levels were significantly higher while IL-4 and IL-10 levels were significantly lower in the observation group (P<0.05).The patients' physical status after treatment in the observation group was significantly improved，and the score in the observation group was significantly higher than that in the control group(P<0.05).The overall response rate(RR) in the observation group was higher than the control group (82% VS 57%)．There were statistical differences between the two groups (P<0.05).Conclusion:TP regimen chemotherapy combined with Pseudomonas aeruginosa for treatment of recurrent ovarian cancer has obvious effect and low toxicity.The patients' systemic symptom and immune function are significantly improved．PA-MASH has been proved to be an ideal supplementary therapy for recurrent ovarian cancer.

[Key words]Ovarian neoplasms; Pseudomonas aeruginosa; Chemotherapy; Immune function; Treatment outcome

收稿日期：(2015-07-22)

[中圖分類號]R 711.75

[文獻標識碼]A

[文章編號]1008-7044(2016)01-0007-03

DOI：10.14126/j.cnki.1008-7044.2016.01.003

[作者簡介]陳賽英(1975-)，女，副主任醫(yī)師，研究生.