仲立新　張莉　范瑞　鄭香玉

【摘要】 目的 觀察晚期非小細胞肺癌（NSCLC）患者βⅢ-tubulin和Tau 表達情況與含紫杉醇化療敏感性的關(guān)系。方法 45例病理學(xué)確診的晚期NSCLC患者， 化療前對腫瘤組織采用免疫組化法檢測βⅢ-tubulin和Tau表達情況， 對所有患者采用紫杉醇+鉑類（順鉑或卡鉑）方案化療。觀察βⅢ-tubulin和Tau表達情況與含紫杉醇化療方案治療非小細胞肺癌有效率之間的關(guān)系。結(jié)果 βⅢ-tubulin和Tau表達與患者性別、年齡、病理類型、臨床分期及既往化療無關(guān)。βⅢ-tubulin陰性者紫杉醇化療有效率明顯高于βⅢ-tubulin陽性者（P<0.05）；Tau陰性表達者應(yīng)用紫杉醇化療的有效率示高于陽性表達者（P<0.05）；βⅢ-tubulin陰性及Tau表達陰性患者應(yīng)用紫杉醇化療有效率為83.3%。結(jié)論 βⅢ-tubulin和Tau可作為晚期NSCLC患者應(yīng)用紫杉醇聯(lián)合方案的有效性的預(yù)測指標(biāo)， 為晚期NSCLC患者的個體化治療提供參考。

【關(guān)鍵詞】 晚期非小細胞肺癌；微管蛋白；紫杉醇；化療敏感性

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.05.110

肺癌近年來成為全球癌癥發(fā)病率最高的腫瘤， 大概有85%的為NSCLC， 因大多數(shù)腫瘤被發(fā)現(xiàn)時已屬晚期， NSCLC總的5年生存率僅為10%～15%。化學(xué)治療仍是NSCLC的主要治療方法。研究顯示， 晚期NSCLC應(yīng)用鉑類為基礎(chǔ)聯(lián)合紫杉醇等化療方案有效率僅為30%～60%[1]， 隨著腫瘤分子生物學(xué)的進展， 如何精準(zhǔn)和個體化的選擇化療藥物以期獲得更高的有效率， 是目前醫(yī)學(xué)研究的熱點。多項研究表明[2]， βⅢ-tubulin和Tau 表達可能與微管蛋白結(jié)合類化療藥物的敏感性有關(guān)。本次研究運用免疫組化法對45例晚期NSCLC患者腫瘤組織內(nèi)的βⅢ-tubulin和Tau表達情況進行測定， 同時化療方案為鉑類聯(lián)合紫杉醇的治療方案， 觀察其表達情況與含紫杉醇化療方案治療非小細胞肺癌有效率之間的關(guān)系， 為臨床精準(zhǔn)及個體化療提供依據(jù)?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇2012年6月～2014年6月收治的45例晚期NSCLC患者， 其中男29例， 女16例， 年齡29～75歲， 中位年齡52歲。所有患者符合以下條件：①確診為腺癌、鱗癌患者， 其中肺鱗癌25例， 肺腺癌20例；②化療前經(jīng)過相應(yīng)的檢查， 如胸部CT、全身骨掃描等， 確診為ⅢB～Ⅳ期患者；③在化療前均進行肝腎功能、心電圖、血常規(guī)等常規(guī)性檢查。

1. 2 治療方案 化療前應(yīng)用免疫組化法檢測45例NSCLC患者腫瘤組織中βⅢ-tubulin和Tau表達水平， βⅢ-tubulin抗體試劑盒購自Zyued公司， 陽性組化法檢測。肺癌組織βⅢ-tubulin蛋白表達陽性為細胞內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒。根據(jù)切片陽性細胞數(shù)分為：（-）陽性細胞數(shù)<10%；（+）陽性細胞數(shù)10%～25%；（++）陽性細胞數(shù)25%～75%；（+++）陽性細胞數(shù)>75%。

Tau蛋白在腫瘤組織中陰性表達為腫瘤細胞無染色， 陽性產(chǎn)物為棕黃色顆粒， 定位于細胞質(zhì)。根據(jù)陽性細胞染色范圍及強度分為4級。0為無明顯陽性細胞， 無著色；（+）為陽性細胞≤25%， 著色為淡黃色；（++）為陽性細胞25%～50%， 著色為棕黃色；（+++）為陽性細胞≥50%， 著色為深褐色；（++）～（+++）為陽性；0～（+）為陰性。每張切片由3位醫(yī)師盲法閱片。

1. 3 療效評價標(biāo)準(zhǔn) 療效評定按照實體瘤評價標(biāo)準(zhǔn)（RECIST1.0）分為完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、進展（PD）、穩(wěn)定（SD）。有效率=（CR+PR）/總例數(shù)×100%。采用CT測量病灶大?。p徑測量）。毒性評價按美國NCT指定的毒性評價通用標(biāo)準(zhǔn)（CTC第3版）評價， 從停止治療開始隨診， 每隔1～3個月重復(fù)1次， 直至患者死亡或失診。

1. 4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS11.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 βⅢ-tubulin和Tau表達與患者性別、年齡、病理類型、臨床分期及既往化療無關(guān)（P>0.05）。見表1。

2. 2 療效評價 βⅢ-tubulin陰性者紫杉醇化療有效率明顯高于βⅢ-tubulin陽性者（P<0.05）；Tau陰性表達者紫杉醇化療有效率高于陽性表達者（P<0.05）；βⅢ-tubulin陰性及Tau陰性表達患者應(yīng)用紫杉醇化療有效率為83.3%。見表2。

表2 βⅢ-tubulin患者紫杉醇化療有效率與

Tau有效率比較[n（%）]

項目 例數(shù) 有效率 P

βⅢ-tubulin陽性 21 5（23.8） 0.0193

βⅢ-tubulin陰性 24 14（58.3）

Tau陽性 20 5（25.0） 0.0364

Tau陰性 25 14（56.0）

βⅢ-tubulin陽性Tau陽性 30 6（20.0） 0.0000

βⅢ-tubulin陰性Tau陰性 24 20（83.3）

3 討論

紫杉醇是一種有絲分裂抑制劑， 其可與有絲分裂的紡錘體微管上的微管蛋白有機結(jié)合， 通過促使其聚合， 抑制解聚并保持微管蛋白的穩(wěn)定性， 以此來制約腫瘤細胞的有絲分裂[3]。它是目前最有效的抗腫瘤物質(zhì)之一， 但并不是對所有的腫瘤有效， 同一腫瘤的不同患者， 有效率也有較大差異。研究表明βⅢ-tubulin表達與作用在微管類化療藥物的敏感性有明顯的關(guān)系[4]， 機制可能如下：①βⅢ-tubulin TuBB突變， 影響tubulin和紫杉醇藥物的結(jié)合點， 但微管蛋白功能是不會受到影響的；②TuBB基因突變， 將微管蛋白聚合相關(guān)的微管蛋白二聚體的重要區(qū)域轉(zhuǎn)變， 同時減弱了之間的相互作用， 造成微管的不穩(wěn)定性。

當(dāng)前國內(nèi)、國外很多研究都表明了βⅢ-tubulin高表達NSCLC患者對紫杉類藥物耐藥， 低表達NSCLC患者對紫杉類藥物敏感[5]。Sève等[5]研究發(fā)現(xiàn)βⅢ-tnubuli低表達NSCLC患者對紫杉類藥物有效率為64.3%～78.6%， 而βⅢ-tnubuli高表達者有效率為16.7%～55.0%。與本研究發(fā)現(xiàn)一致， 且βⅢ-tnubulin低表達晚期和局部晚期NSCLC患者使用紫杉類藥物后重獲手術(shù)機會更高。

微管是細胞骨架的重要組成部分， 對細胞的有絲分裂、維持細胞形態(tài)等有重要作用。Tau基因是一個微管相關(guān)基因， 其主要的生物學(xué)作用是促進微管組裝和穩(wěn)定微管。Mimori等[6]發(fā)現(xiàn)Tau蛋白低表達的胃癌組織對紫杉醇化療敏感性良好， 推測低濃度Tau蛋白環(huán)境中， 紫衫醇藥物分子容易與微管蛋白結(jié)合。國內(nèi)也有多個研究表明Tau基因與紫杉醇的敏感性有關(guān)。此次的研究表明， Tau基因表達陰性的晚期NSCLC患者， 應(yīng)用紫杉醇化療的敏感性高于Tau基因陽性表達者， 提示Tau基因可作為紫杉醇療效的預(yù)測因子， 為臨床肺癌個體化治療提供依據(jù)。

綜上所述， 紫杉醇化療的敏感性與多種因素相關(guān)， 多種基因的表達水平不同影響著腫瘤化療藥物的療效， βⅢ-tubulin和Tau蛋白表達情況可作為預(yù)測含紫杉醇化療方案有效性和指導(dǎo)患者個體化化療的指標(biāo)。

參考文獻

[1] 吳平平， 李蘇宜.紫杉醇耐藥與β微管蛋白的研究進展.臨床腫瘤學(xué)進雜志， 2008， 13（8）：45-46.

[2] 楊全良， 將華蔚.紫杉醇耐藥與β-微管蛋白Ⅲ研究進展.腫瘤研究與進展， 2001， 23（2）：137.

[3] 楊俊泉， 高獻書.Ⅵ期非小細胞肺癌組織表達與紫杉醇類化療耐藥.第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報， 2008， 29（10）：930.

[4] Sève P， Reiman T， Dumontet C. The role of betaIII tubulin in predicting chemoresistance in non-small cell lung cancer. Lung Cancer， 2010， 67（2）：136-143.

[5] Sève P， Dumontet C. Is class Ⅲ beta-tubulin a predictive factor in patients receiving tubulin-binding agents？ Lancet Oncol， 2008， 9（2）：168-175.

[6] Mimori K， Sadanaga N， Yoshikawa Y. et al. Reduced tau expression in gastric cancer can identify candidates for successfal paclitaxel treatment. British Journal of Cancer， 2006， 94（12）：1894-1897.

[收稿日期：2015-09-17]