乳酸左氧氟沙星注射液有關(guān)物質(zhì)測(cè)定的不確定度分析

高峰1，周維利2，王維劍2，杜亮3

(1.萊蕪市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，山東 萊蕪 271100；山東省食品藥品檢驗(yàn)研究院，山東 濟(jì)南 250101；

3.濟(jì)南軍區(qū)聯(lián)勤部疾病預(yù)防控制中心，山東 濟(jì)南 250014)

摘要：目的建立乳酸左氧氟沙星注射液有關(guān)物質(zhì)測(cè)定的不確定度評(píng)定方法。方法建立數(shù)學(xué)模型，對(duì)含量測(cè)定過(guò)程中各影響因素進(jìn)行分析評(píng)估。結(jié)果通過(guò)計(jì)算各變量的不確定度，合成不確定度，最終得出測(cè)定結(jié)果的擴(kuò)展不確定度。結(jié)論該評(píng)定方法適用于HPLC法測(cè)定乳酸左氧氟沙星注射液有關(guān)物質(zhì)的不確定度評(píng)定。

關(guān)鍵詞：左氧氟沙星；有關(guān)物質(zhì)；不確定度

基金項(xiàng)目：國(guó)家科技重大專項(xiàng)課題-重大新藥創(chuàng)制(No.2009ZX09313-023)

作者簡(jiǎn)介：高峰，男，研究方向：食品藥品檢驗(yàn)，E-mail:lwgaofeng@126.com

通訊作者：杜亮，女，研究方向：藥學(xué),Tel:0531-81216507；E-mail:michael19790623@hotmail.com

中圖分類號(hào)：R927.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

Evaluation of uncertainty for the related substances test of Levofloxacin Lactate Injection

GAOFeng1,ZHOUWei-li2，WANGWei-jian2，DULiang3

(1.LaiwuInstituteforFoodandDrugControl,Laiwu271100,China;2.ShandongInstitutefor

FoodandDrugControl,Jinan250101,China;3.CenterforDiseasePreventionandControl

ofJinanMilitaryCommand,Jinan250014,China)

Abstract：ObjectiveTo establish a method of uncertainty evaluation for the related substances test of Levofloxacin Lactate Injection.MethodsThe uncertainty was evaluated by an established mathematical model and the analysis of various factors affecting sample detection.ResultsEach componet of uncertainty was calculated and then the combined uncertainty was finally obtained by synthesizing the uncertainties of various component variables.ConclusionThis method was appropriate to be used in the uncertainty evaluation for the related substances test of Levofloxacin Lactate Injection.

Key words:Levofloxacin；Related substances；Uncertainty

藥品檢驗(yàn)的一項(xiàng)重要任務(wù)就是對(duì)藥品中特定成分的賦值，所賦值的準(zhǔn)確性和可靠性直接影響到對(duì)藥品質(zhì)量的評(píng)價(jià)。因而當(dāng)報(bào)告測(cè)量結(jié)果時(shí),必須對(duì)其質(zhì)量給出定量的說(shuō)明,以確定測(cè)量結(jié)果的可信程度。測(cè)量不確定度就是對(duì)測(cè)量結(jié)果質(zhì)量的定量表征，測(cè)量結(jié)果的可用性很大程度上取決于其不確定度的大小。所以，測(cè)量結(jié)果必須附有不確定度說(shuō)明才是完整并有意義的[1]。

本文以乳酸左氧氟沙星(Levofloxacin Lactate)注射液為例，根據(jù)國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局批準(zhǔn)發(fā)布的JJF1059—1999計(jì)量技術(shù)規(guī)范《測(cè)量不確定度評(píng)定與表示》[2]，并參考有關(guān)文獻(xiàn)[3～5]，建立其有關(guān)物質(zhì)測(cè)定的不確定度評(píng)定方法，對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中各影響因素進(jìn)行分析評(píng)估，最終計(jì)算得出測(cè)定結(jié)果不確定度值。

1儀器與試藥

1.1儀器Agilent 1200高效液相色譜儀(檢定證書(shū)給出不確定度0.49%，K=3);BP211D電子天平(d=0.01 mg/0.1 mg)。

1.2供試品乳酸左氧氟沙星注射液(魯抗辰欣制藥有限責(zé)任公司，批號(hào)：09051152011)；乙腈為色譜純，其他試劑為分析純；玻璃器皿均為A級(jí)。

2方法

2.1色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；己烷磺酸鈉溶液[取己烷磺酸鈉0.98 g，加磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀6.8 g，加水1 000 mL，加0.05 mol·L-1磷酸500 mL，使pH值為2.4)1 000 mL]-甲醇(3∶1)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)：293 nm ；進(jìn)樣量：10 μL； 流速： 1.0 mL·min-1；柱溫：40 ℃。

2.2供試品溶液的配制精密量取本品適量，加水稀釋制成0.5 mg·mL-1的溶液。

2.3對(duì)照溶液的配制精密量取供試品溶液5 mL，置500 mL量瓶中，加水溶解稀釋至刻度。

3.1數(shù)學(xué)模型

X：有關(guān)物質(zhì)含量(%);At：供試品雜質(zhì)峰面積;As：對(duì)照峰面積;Vs：對(duì)照溶液稀釋倍數(shù)。

由供試品溶液的制備過(guò)程可知Vs=500 mL/5 mL=100,實(shí)驗(yàn)測(cè)得As=163.61，At=16.75,則靈敏系數(shù)為：

3.2不確定度分量來(lái)源的分析 (因果圖)

圖1　不確定度的來(lái)源分析圖

3.3不確定度的量化分析各不確定度分量的計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表1。

表1　相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度一覽表

3.3.1對(duì)照溶液稀釋過(guò)程中玻璃量器引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(Vs)：玻璃量器引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(V)。

u(Vs) =urel(Vs)×Vs= 0.185

3.3.2對(duì)照峰面積引起的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(As)取對(duì)照溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，計(jì)算不確定度，峰面積結(jié)果見(jiàn)表2。

表2　對(duì)照品溶液測(cè)定結(jié)果

高效液相色譜儀引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：urel(A)=檢定證書(shū)給出的不確定度/K=0.49%/3 =0.001 63(K=3)。

u(As)=urel(As)×As=0.423 75

3.3.3供試品峰面積引起的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(At)取對(duì)照溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，計(jì)算不確定度，峰面積結(jié)果見(jiàn)表3。

表3　供試品溶液側(cè)定結(jié)果

高校液相色譜儀引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：urel(A)=檢定證書(shū)給出的不確定度/K=0.49%/3 =0.001 63 (K=3)。

u(At)=urel(At)×At=0.086 10

3.3.4合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度供試品溶液中雜質(zhì)峰面積、對(duì)照峰面積、對(duì)照溶液稀釋體積等的不確定度相互獨(dú)立，故將上述數(shù)據(jù)合成得合成相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度u(X)為

3.4擴(kuò)展不確定度計(jì)算得鹽酸左氧氟沙星注射液中有關(guān)物質(zhì)的含量的測(cè)定結(jié)果X=0.10%，測(cè)量結(jié)果的合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度u(X)=0.000 61%。按慣例，若取包含因子K=2(95%的置信區(qū)間)，得測(cè)量結(jié)果的擴(kuò)展不確定度：

U=K×u(X)=0.002%

3.5測(cè)量結(jié)果的表示供試品鹽酸左氧氟沙星注射液中有關(guān)物質(zhì)的含量可表示為：X=0.10%±0.002%，K=2(95%的置信區(qū)間)。

4討論

本次檢測(cè)供試品溶液的稀釋體積不參與計(jì)算，所以供試品溶液稀釋過(guò)程對(duì)測(cè)定結(jié)果的不確定度中不會(huì)產(chǎn)生影響，并且由于實(shí)驗(yàn)方法操作過(guò)程簡(jiǎn)單，僅一步稀釋過(guò)程，從而較少了不確定度的影響因素，因此本方法的不確定度評(píng)估值較低。

靈敏系數(shù)反映了該輸入量標(biāo)準(zhǔn)不確定度對(duì)輸出量不確定度貢獻(xiàn)的靈敏程度，而且標(biāo)準(zhǔn)不確定度只有乘以該靈敏系數(shù)才能構(gòu)成一個(gè)不確定度分量，即和輸出量有相同的單位，因此在不確定度評(píng)定過(guò)程中靈敏系數(shù)不能被忽視。

參考文獻(xiàn)：

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