乳腺浸潤性導管癌原發(fā)灶、腋窩淋巴結轉移灶組織中SATB1和BRMS1的表達變化

姚亞峰1，龔燁2，李炳軍2

(1太原市婦幼保健院，太原030012；2新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院)

摘要：目的觀察乳腺浸潤性導管癌原發(fā)灶、腋窩淋巴結轉移灶組織中核基質結合區(qū)結合蛋白1(SATB1)和乳腺癌轉移抑制基因1(BRMS1)的表達變化。方法乳腺浸潤導管癌患者78例，均接受手術治療，全部留取原發(fā)灶組織標本，其中52例同時留取腋窩淋巴結轉移灶組織標本、63例同時留取癌旁組織標本。采用免疫組化法和熒光實時定量PCR法檢測三種組織標本中的SATB1、BRMS1蛋白及mRNA。結果原發(fā)灶、淋巴結轉移灶組織中SATB1蛋白陽性表達率分別為75.6%、82.7%，與癌旁組織的28.6%相比，P均<0.05。原發(fā)灶、淋巴結轉移灶組織中BRMS1蛋白陽性表達率分為25.6%、23.1%，與癌旁組織的87.3%相比，P均<0.05。原發(fā)灶、淋巴結轉移灶組織SATB1 mRNA的相對表達量分別為7.93±1.42、7.27±0.42，與癌旁組織的9.88±1.28相比，P均<0.05。原發(fā)灶、淋巴結轉移灶組織BRMS1 mRNA的相對表達量分別為10.21±1.82、10.23±1.28，與癌旁組織的8.69±1.03相比，P均<0.05。原發(fā)灶組織SATB1表達與乳腺浸潤性導管癌轉移淋巴結數(shù)及臨床分期有關(P均<0.05)。原發(fā)灶SATB1蛋白和BRMS1蛋白表達無相關關系(r=-0.523，P>0.05)，SATB1 mRNA和BRMS1 mRNA表達量無相關關系(r=-0.093，P>0.05)。結論 乳腺浸潤性導管癌原發(fā)灶、腋窩淋巴結轉移灶組織中SATB1蛋白及mRNA呈高表達，BRMS1蛋白及mRNA呈低表達， SATB1蛋白及mRNA表達與乳腺浸潤癌性導管癌的淋巴結轉移和臨床分期有關。

關鍵詞：乳腺腫瘤；乳腺癌；乳腺導管癌；乳腺浸潤性導管癌；核基質結合區(qū)結合蛋白1；乳腺癌轉移抑制基因1

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.43.029

中圖分類號：R737.9文獻標志碼：B

收稿日期：(2015-06-09)

乳腺浸潤性導管癌約占乳腺癌的70%[1]，較容易出現(xiàn)淋巴結轉移。核基質結合區(qū)結合蛋白1(SATB1)是一種核基質區(qū)結合蛋白，其高表達時患者預后較差，而乳腺癌轉移抑制基因1(BRMS1)高表達時患者的預后較好。本研究觀察了乳腺浸潤性導管癌原發(fā)灶、腋窩淋巴結轉移灶組織中SATB1和BRMS1的表達變化，并探討其意義。現(xiàn)將結果報告如下。

1資料與方法

1.1臨床資料 2013年3～2015年1月太原市婦幼保健院收治的乳腺浸潤導管癌患者78例，均為女性，年齡31～82歲，均接受手術治療，全部留取原發(fā)灶組織標本，其中52例同時留取腋窩淋巴結轉移灶組織標本、63例同時留取癌旁組織標本。所有標本均于離體5 min內(nèi)取材完畢，各種標本分別取兩份。癌旁組織距腫瘤邊緣至少2 cm，且均經(jīng)病理檢查證實為未發(fā)生癌變的正常乳腺組織。

1.2SATB1蛋白及BRMS1蛋白檢測方法采用免疫組化SP法檢測各組織中的SATB1、BRMS1蛋白，用已知陽性切片作陽性對照，用PBS代替一抗作陰性對照。受檢組織切片染色后光鏡下觀察，于100倍視野下選取5個細胞，然后在400倍鏡下隨機觀察每個視野的100個細胞，計算陽性細胞百分比，取5個視野的均值：無陽性細胞計0分，陽性細胞≤10%計1分、11%～50%計2分、51%～75%計3分、>75%計4分；同時根據(jù)細胞著色強度計分：不著色計0分，淺黃色計1分，棕黃色計2分，深棕色計3分。上述兩分的乘積≥3判為陽性。

1.3SATB1 mRNA及BRMS1 mRNA檢測方法采用實時熒光定量PCR法檢測各組織中的SATB1、BRMS1 mRNA。取受檢組織約50 mg，用TRIzol試劑提取RNA，紫外分光光度計測定RNA純度，電泳法檢測RNA的完整性。將RNA逆轉錄成cDNA，然后進行PCR擴增:95 ℃ 30 s、95 ℃5 s，60 ℃ 20 s，共40個循環(huán)。以ΔΔCt值表示目的基因的相對表達量。

1.4統(tǒng)計學方法采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料比較用χ2檢驗，計量資料比較用方差分析、t檢驗，相關性分析用Pesrson直線相關分析法和Spearman等級相關分析法。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1原發(fā)灶、淋巴結轉移灶、癌旁組織中SATB1蛋白和BRMS1蛋白的表達比較原發(fā)灶、淋巴結轉移灶中SATB1蛋白陽性表達率分別為75.6%(59/78)、82.7%(43/52)，與癌旁組織的28.6%(18/63)相比，P均<0.05；前兩者相比，P>0.05。原發(fā)灶、淋巴結轉移灶中BRMS1蛋白陽性表達率分別為25.6%(20/78)、23.1%(12/52)，與癌旁組織的87.3%(55/63)相比，P均<0.05；前兩者相比，P>0.05。

2.2原發(fā)灶、淋巴結轉移灶、癌旁組織中SATB1 mRNA和BRMS1 mRNA的表達比較原發(fā)灶、淋巴結轉移灶及癌旁組織SATB1 mRNA的相對表達量分別為7.93±1.42、7.27±0.42和9.88±1.28，原發(fā)灶、淋巴結轉移灶是癌旁組織的3.79和6.12倍，二者與癌旁組織相比，P均<0.05。原發(fā)灶、淋巴結轉移灶及癌旁組織BRMS1 mRNA的相對表達量分別為10.21±1.82、10.23±1.28和8.69±1.03，原發(fā)灶、淋巴結轉移灶是癌旁組織的0.37和0.35倍，二者與癌旁組織相比，P均<0.05。

2.3原發(fā)灶SATB1表達與乳腺浸潤癌性導管癌臨床病理參數(shù)的關系原發(fā)灶SATB1蛋白及mRNA表達與乳腺浸潤癌性導管癌轉移淋巴結數(shù)和臨床分期有關(P均<0.05)，與患者年齡、腫瘤直徑、是否絕經(jīng)無關(P均>0.05)，詳見表1。

表1　 原發(fā)灶SATB1表達與乳腺浸潤癌性

2.4原發(fā)灶SATB1與BRMS1表達的相關性原發(fā)灶SATB1蛋白和BRMS1蛋白表達無相關關系(r=-0.523，P>0.05)，SATB1 mRNA和BRMS1 mRNA表達量無相關關系(r=-0.093，P>0.05)。

3討論

SATB1是屬于核基質結合區(qū)的結合蛋白。SATB1在普通上皮細胞中會呈現(xiàn)低表達甚至不表達，而在具有高度侵襲性的乳腺癌組織中會呈現(xiàn)高表達。SATB1高表達會改變?nèi)橄侔┘毎那忠u表型，進而使乳腺癌細胞出現(xiàn)轉移。將高侵襲性乳腺癌細胞注射至小鼠體內(nèi)，9周后在小鼠肺部發(fā)現(xiàn)轉移結節(jié)，且肺組織中SATB1高表達[2]。BRMS1是最新發(fā)現(xiàn)的具有抑制腫瘤轉移作用的基因，該基因存在多個磷酸化位點，BRMS1的表達和乳腺癌預后是否存在關系研究較少，且不同學者持有不同意見[3]。有研究[4]發(fā)現(xiàn)，BRMS1不能改變?nèi)橄侔┰l(fā)灶的生長，但是能有效抑制腫瘤發(fā)生轉移，促進轉移灶腫瘤細胞的凋亡。

本研究發(fā)現(xiàn)，乳腺浸潤性導管癌原發(fā)灶、腋窩淋巴結轉移灶組織SATB1蛋白陽性表達率均顯著高于癌旁組織，而BRMS1蛋白陽性表達率顯著低于旁組織，癌原發(fā)灶、腋窩淋巴結轉移灶組織SATB1 mRNA的表達量是癌旁組織的3.79和6.12倍，與文獻[5]報道相符。本研究還發(fā)現(xiàn)，原發(fā)灶SATB1蛋白及mRNA表達與乳腺浸潤癌性導管癌轉移淋巴結數(shù)以及臨床分期有關，提示SATB1表達增強與乳腺浸潤性導管癌淋巴結轉移存在較大關系，可以作為評估乳腺浸潤性導管癌是否出現(xiàn)轉移的指標之一。另外，本研究發(fā)現(xiàn)，乳腺浸潤性導管癌原發(fā)灶組組織中SATB1和BRMS1表達無相關關系，也與文獻[6,7]報道相符，提示SATB1和BRMS1之間可能無調節(jié)關系。

參考文獻：

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