乳腺癌癌組織中Ezrin蛋白的表達觀察

劉秀艷1，馮文博2

(1邯鄲市婦幼保健院，河北邯鄲056001；2邯鄲市第二醫(yī)院)

摘要：目的觀察乳腺癌癌組織中Ezrin蛋白的表達情況。方法女性乳腺癌患者48例、乳腺良性增生患者48例。手術留取乳腺癌患者的癌組織及癌旁組織、乳腺良性增生患者的增生組織。免疫組化法檢測各種組織標本中的Ezrin蛋白。結(jié)果乳腺癌癌組織中Ezrin蛋白呈陰性、弱陽性、陽性、強陽性表達者分別為13、0、28、7例，陽性表達率為72.92%(35/48)；乳腺癌癌旁組織中Ezrin蛋白呈陰性、弱陽性、陽性、強陽性表達者分別為15、20、13、0例，陽性表達率為27.08%(13/48)；乳腺癌良性增生組織中Ezrin蛋白呈陰性、弱陽性、陽性、強陽性表達者分別為7、39、2、0例，陽性表達率為4.17%(2/48)；乳腺癌組織與乳腺癌旁組織、乳腺良性增生組織中Ezrin蛋白的陽性表達率相比，P均<0.05。Ezrin蛋白在三種組織中的陽性表達部位也不同。Ezrin陽性表達與乳腺癌組織學分級(SBR分級)、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、無病生存期(DFS)相關(P均<0.05)。結(jié)論 乳腺癌癌組織中Ezrin蛋白的陽性表達率高，而且表達增強，其陽性表達與乳腺癌患者SBR分級、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、DFS有關。

關鍵詞：細胞骨架連接蛋白；Ezrin蛋白；乳腺腫瘤；乳腺癌

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.43.027

中圖分類號：R737.9文獻標志碼：B

基金項目：河北省科學技術項目(20122853)。

收稿日期：(2015-08-22)

通信作者：馮文博

隨著現(xiàn)代腫瘤治療技術的不斷進展，乳腺癌患者5年生存率已達80%，但仍然有部分患者預后不佳，出現(xiàn)復發(fā)與轉(zhuǎn)移，而且復發(fā)與轉(zhuǎn)移的機制尚不清楚[1]。Ezrin蛋白是新發(fā)現(xiàn)的細胞骨架連接蛋白，參與細胞的黏附和運動，其與腫瘤細胞的生長和轉(zhuǎn)移有著高度的相關性[2]。Ezrin蛋白在骨肉瘤、胰腺癌、肝癌等惡性程度高且轉(zhuǎn)移速度快的腫瘤中呈高強度表達[3～5]。本研究對Ezrin蛋白在乳腺癌癌組織中的表達情況進行了觀察?，F(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1資料與方法

1.1臨床資料2008年4月～2010年4月邯鄲市婦幼保健院收治的、經(jīng)病理檢查確診的乳腺癌患者48例，均為女性，年齡32～78歲。手術治療中留取癌組織及癌旁正常乳腺組織(距病灶2 cm)。同期住院治療、經(jīng)病理檢查確診的乳腺良性增生患者48例，均為女性，其年齡與乳腺癌患者有可比性(P>0.05)，手術治療中留取乳腺增生組織。

1.2Ezrin蛋白的檢測采用免疫組化SP法[6]。受檢標本切片(厚5 μm)，常規(guī)免疫組化SP法染色，DBA顯色，脫水、透明、封片后鏡檢。PBS代替一抗作陰性對照。Ezrin蛋白陽性為細胞膜或細胞質(zhì)中出現(xiàn)顏色較背景深的染色顆粒。在光學顯微鏡下，根據(jù)染色強度及陽性細胞百分比分別計分。按照染色強度計分：細胞無著色計0分，淡黃色計1分，棕黃色計2分，黃褐色計3分。按照陽性細胞百分比計分：取10個高倍視野，每個視野計數(shù)100個細胞，共1 000個細胞，根據(jù)陽性細胞數(shù)占總細胞數(shù)的百分比計分，陽性細胞數(shù)<10%計0分、10%～25%計1分、26%～50%計2分、>50%計3分。參考Fromowitz分級標準[6]，將上述兩項計分結(jié)果相乘，乘積表示Ezrin蛋白的表達強度，按照乘積大小分為陰性、弱陽性、陽性、強陽性四個層次，乘積0為陰性、1～2為弱陽性、3～4為陽性、>5為強陽性；陽性、強陽性判為陽性，陰性、弱陽性判為陰性。

1.3統(tǒng)計學方法采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料比較用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1三種乳腺組織中Ezrin蛋白的表達比較乳腺癌癌組織中Ezrin蛋白呈陰性、弱陽性、中度陽性、強陽性表達者分別為13、0、28、7例，陽性表達率為72.92%(35/48)；Ezrin蛋白表達在乳腺癌細胞膜及細胞質(zhì)中，呈彌漫性分布的棕黃色顆粒，以弱陽性、陽性、強陽性表達于細胞膜者13例，以弱陽性、陽性、強陽性表達于細胞質(zhì)者22例。乳腺癌癌旁組織中Ezrin蛋白呈陰性、弱陽性、陽性、強陽性表達者分別為15、20、13、0例，陽性表達率為27.08%(13/48)；Ezrin蛋白表達在乳腺癌旁組織的腺導管上皮細胞及腺泡上皮細胞膜，呈黃色顆粒，以弱陽性、陽性表達于腺導管上皮細膜者8例，以弱陽性、陽性表達于腺泡上皮細胞膜者25例。乳腺癌良性增生組織中Ezrin蛋白呈陰性、弱陽性、陽性、強陽性表達者分別為7、39、2、0例，陽性表達率為4.17%(2/48)；Ezrin蛋白表達在乳腺癌良性增生組織的上皮腔緣頂膜及細胞膜，呈淡黃色顆粒，弱陽性表達，上皮腔緣頂膜表達者41例、細胞膜表達者7例。乳腺癌組織與乳腺癌旁組織中Ezrin蛋白的陽性表達率相比，P<0.05。乳腺癌組織與良性乳腺增生組織中Ezrin蛋白的陽性表達率相比，P<0.05。乳腺癌旁組織與良性乳腺增生組織中Ezrin蛋白的陽性表達率相比，P<0.05。Ezrin蛋白在三種組織中的表達部位相比，P均<0.05。

2.2癌組織中Ezrin蛋白表達與乳腺癌臨床病理參數(shù)的關系48例乳腺癌患者中Ezrin蛋白呈陽性、強陽性表達者分別28、7例，即陽性表達共35例。Ezrin陽性表達與乳腺癌患者年齡、腫瘤直徑無關(P>0.05)，與組織學分級(SBR分級)、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、患者無病生存期(DFS)有關(P均<0.05)。詳見表1。

表1　 癌組織中Ezrin蛋白表達與乳腺癌臨床

3討論

Ezrin蛋白為膜細胞骨架連接蛋白。Ezrin基因的N端有一個FERM結(jié)構(gòu)區(qū)域，該區(qū)域能與跨膜蛋白細胞內(nèi)的C端相連，而C端末端有一個F-肌動蛋白連接區(qū)域[2]。在生理狀態(tài)下Ezrin蛋白能夠參與細胞運動，維持細胞極性，維持細胞間以及細胞與細胞外基質(zhì)的黏附，能夠調(diào)節(jié)細胞免疫功能，與細胞衰老及凋亡有關[8,9]。Ezrin蛋白可以通過改變腫瘤細胞極性以及腫瘤細胞運動而影響腫瘤細胞的浸潤和轉(zhuǎn)移[10]。

本研究結(jié)果顯示，Ezrin蛋白在乳腺癌組織中呈陽性及強陽性表達，在癌旁組織中呈弱陽性、陽性表達，在乳腺良性增生組織中基本均為弱陽性表達。乳腺癌組織Ezrin蛋白的陽性表達率明顯高于乳腺癌旁組織及乳腺良性增生組織，乳腺癌癌旁組織Ezrin蛋白的陽性表達率也高于乳腺良性增生組織；Ezrin蛋白的表達強度為乳腺癌癌組織>乳腺癌癌旁組織>乳腺良性增生組織。在三種乳腺組織中Ezrin蛋白的陽性表達部位也不同，在乳腺癌癌組織中Ezrin蛋白主要表達于乳腺癌細胞的胞質(zhì)及胞膜上，而在癌旁組織及乳腺良性增生組織中Ezrin蛋白主要在乳腺導管上皮細胞、腺泡上皮細胞的細胞膜以及上皮腔緣頂膜表達。Ezrin蛋白在乳腺癌癌組織中的高表達及其主要表達于細胞膜和細胞質(zhì)，可能促進了乳腺癌細胞的浸潤和轉(zhuǎn)移。

另外，本研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌癌組織中Ezrin蛋白的表達與乳腺癌SBR分級、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、DFS有關。觀察癌組織中Ezrin蛋白的表達情況，有助于乳腺癌病理分級、分期、淋巴轉(zhuǎn)移及預后的判斷。

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