摘要：目的 觀察即刻種植中應(yīng)用富血小板纖維蛋白（PRF）種植體周圍骨組織的生長(zhǎng)情況。方法 拔除5只beagle犬雙側(cè)下頜第四前磨牙（PM4），立即植入柱形螺紋純鈦種植體。實(shí)驗(yàn)采用自身對(duì)照，實(shí)驗(yàn)組采用PRF填塞種植體頰側(cè)缺損，遠(yuǎn)中間隔缺損和拔牙窩；對(duì)照組種植體頰側(cè)缺損以血凝塊充填，間隔不制備缺損，拔牙窩用明膠海綿填塞。3 個(gè)月后手術(shù)切開(kāi)觀察骨缺損位置新骨形成情況，并測(cè)量記錄。結(jié)果 種植3個(gè)月后，實(shí)驗(yàn)組頰側(cè)骨量增加高度為2.85mm，對(duì)照組為1.69mm，余留缺損面積實(shí)驗(yàn)組為1.81mm2，對(duì)照組為3.53mm2。種植體頰側(cè)和遠(yuǎn)中拔牙窩實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組成骨細(xì)胞多，間隔骨成熟度與正常骨無(wú)明顯差別。結(jié)論 即刻種植即刻負(fù)重種植中使用PRF，有利于種植體周骨缺損區(qū)新骨形成。

關(guān)鍵詞：即刻種植；骨組織；富血小板纖維蛋白

富血小板纖維蛋白（PRF）為第二代的血小板凝集物，是具有粘性的富含高濃度纖維蛋白原及多種生長(zhǎng)因子的血小板凝膠能促進(jìn)頭面部的成骨細(xì)胞生長(zhǎng)，從而促進(jìn)硬組織的愈合。本研究將PRF引入口腔即刻種植即刻負(fù)重中，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的方法描述其修復(fù)骨組織的情況，以指導(dǎo)進(jìn)一步的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究和臨床應(yīng)用。

1 資料與方法

1.1一般資料 種植體：Super line 種植體（3.6mm×8.0mm，SLA，Dentium公司，韓國(guó)）植入材料：Bio-Oss骨粉（直徑0.25～1mm 的松質(zhì)骨顆粒）；Bio-Gide膠原膜（蓋氏制藥有限公司生產(chǎn)）；PRF（無(wú)菌操作要求下，經(jīng)靜脈采血，置于無(wú)任何添加劑的無(wú)菌負(fù)壓采血管中，3000rpm轉(zhuǎn)速下離心15min。可見(jiàn)到血液樣本分為三層，中間層淡黃色的凝膠即為PRF凝膠，用鑷子將其取出，可用組織剪將其剪碎，亦可用無(wú)菌紗布輕輕擠壓制成PRF膜）。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：健康純種雄性beagle犬5只，體重約13～16kg，年齡為24個(gè)月。要求牙體、牙列完整，無(wú)牙體牙周疾病，咬關(guān)系正常。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)1個(gè)月后，再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.2方法

1.2.1動(dòng)物模型制備 以5只成年Beagle犬為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。在30g/L 戊巴比妥鈉溶液靜脈麻醉下，微創(chuàng)拔除犬雙側(cè)下頜第四前磨牙（PM4），徹底搔刮拔牙窩，于遠(yuǎn)中根拔牙窩靠近牙根間隔處預(yù)備種植窩至深度8mm，即刻植入直徑3.6mm，長(zhǎng)度8mm Super Line種植體。

1.2.2缺損制備標(biāo)準(zhǔn) 采用半口自身對(duì)照，隨機(jī)法區(qū)分對(duì)照側(cè)與實(shí)驗(yàn)側(cè)，用骨鑿在種植體頰側(cè)制備約4mm×5mm缺損，暴露種植體上部，制備實(shí)驗(yàn)側(cè)牙槽間隔約3mm×3mm缺損，對(duì)照側(cè)牙槽間隔處不制備缺損。實(shí)驗(yàn)組采用PRF填塞種植體頰側(cè)缺損，遠(yuǎn)中間隔缺損和拔牙窩；對(duì)照組種植體頰側(cè)缺損僅以出血形成的血凝塊充填，間隔不制備缺損，拔牙窩用明膠海綿填塞，可吸收縫線關(guān)閉創(chuàng)口。

1.2.3 取材 3個(gè)月后手術(shù)切開(kāi)觀察骨缺損位置新骨形成情況，并測(cè)量記錄，同時(shí)在雙側(cè)種植體頰側(cè)缺損修復(fù)區(qū)、間隔和拔牙窩骨質(zhì)處取材，對(duì)骨組織中成骨細(xì)胞多少和骨基質(zhì)的礦化程度做出基本判斷。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本實(shí)驗(yàn)使用SPSS19.0軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s） 表示，各組間的比較采用配對(duì)資料的t 檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

實(shí)驗(yàn)組頰側(cè)新生骨高度平均為2.85mm，對(duì)照組為1.69mm，P<0.05（見(jiàn)表1）；實(shí)驗(yàn)組頰側(cè)余留骨缺損面積平均為1.81mm2，對(duì)照組3.53mm2，P<0.05（見(jiàn)表2）。兩組數(shù)據(jù)差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？梢哉J(rèn)為，實(shí)驗(yàn)組骨組織增加的高度多于對(duì)照組，余留缺損面積小于對(duì)照組，即PRF有利于骨組織的生成。

3 討論

PRF主要是早期促進(jìn)成骨作用，作用時(shí)間為7～11d，長(zhǎng)于第一代血小板凝集物富血小板血漿（PRP）的3～5d，且作用穩(wěn)定，即在成骨的早期，持續(xù)釋放大量細(xì)胞因子，如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF-β1）、血小板源性生長(zhǎng)因子（PDGFs）、胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF-1）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）等[1，2]，增加了實(shí)驗(yàn)組成纖維細(xì)胞和成骨細(xì)胞的數(shù)量和活性，促進(jìn)血管的生成等。在這些因子中 TGF-β作為趨化因子可以在種植床周圍吸附大量骨母細(xì)胞，刺激成骨細(xì)胞的增殖，增加骨細(xì)胞的數(shù)量，抑制破骨細(xì)胞的形成；促進(jìn)成骨細(xì)胞基質(zhì)的沉積和成纖維細(xì)胞基質(zhì)的形成。PDGF不僅可刺激骨髓基質(zhì)細(xì)胞的有絲分裂以增加骨細(xì)胞的數(shù)量，還可刺激內(nèi)皮細(xì)胞的有絲分裂，促進(jìn)種植區(qū)毛細(xì)血管的生長(zhǎng)，使成骨細(xì)胞趨化增殖并增加膠原蛋白合成的能力。本研究發(fā)現(xiàn)，種植3個(gè)月后實(shí)驗(yàn)組新生骨的生成能力、改建和重塑能力強(qiáng)于對(duì)照組。

生長(zhǎng)因子在PRF 的生物學(xué)上發(fā)揮了重要的作用，而纖維蛋白基質(zhì) 起到?jīng)Q定性的作用，PRF中的纖維蛋白網(wǎng)的存在減緩了細(xì)胞因子在PRF 的降解過(guò)程中釋放速度，并為修復(fù)相關(guān)的細(xì)胞提供了增殖分化的場(chǎng)所，在組織修復(fù)過(guò)程中發(fā)揮了細(xì)胞支架的作用，而且纖維蛋白基質(zhì)是促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞移植最適合的基質(zhì)載體。纖維蛋白也可以促進(jìn)新生血管形成，促進(jìn)血液里未分化的間充質(zhì)細(xì)胞向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)變，形成骨組織。

PRF 的應(yīng)用能夠有效恢復(fù)種植體頰側(cè)的骨缺損，表明PRF 可以單獨(dú)作為骨充填材料修復(fù)種植體周圍骨缺損；在拔牙窩處加入PRF 或明膠海綿[3]，均可促進(jìn)拔牙創(chuàng)軟硬組織的愈合，但PRF 促進(jìn)骨形成效果更佳。

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編輯/成森