江金華 嚴(yán)汀華 馬宗明 蘭啟防

乳腺導(dǎo)管內(nèi)癌(DCIS)為乳腺導(dǎo)管上皮組織的惡性增生，且局限于導(dǎo)管的基底膜內(nèi)，未侵犯間質(zhì)，屬于原位癌的范疇。乳腺導(dǎo)管內(nèi)癌占乳腺癌病例的20%～30%［1］，10 年生存率約 88%［2］。DICS 具有發(fā)展成浸潤(rùn)性乳腺癌的趨勢(shì)，但不是必然的轉(zhuǎn)歸［3］。不同類型DCIS的生物學(xué)行為明顯不同，有的可長(zhǎng)期保持“原位”，有的則可發(fā)展為浸潤(rùn)性癌［4］，這是否與DCIS分子分型相關(guān)還不清楚。Ki-67是1種能識(shí)別存在于增殖細(xì)胞核基質(zhì)內(nèi)的核蛋白，定位于第10號(hào)染色體上。它的功能和細(xì)胞有絲分裂有關(guān)，與腫瘤細(xì)胞的周期性變化以及腫瘤的預(yù)后密切相關(guān)［5-7］。本研究回顧性分析了57例DCIS患者臨床、病理資料，探討DCIS的分子分型及其與組織學(xué)分級(jí)、Ki-67指數(shù)的相關(guān)性?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集我院2011年1月至2014年6月收治的女性乳腺癌患者，所有病例均經(jīng)術(shù)后病理檢查確診，對(duì)腫瘤＞2 cm者均經(jīng)多次(8～10次)病理取材送病檢確診。乳腺導(dǎo)管內(nèi)癌組57例，年齡25～87歲，平均50.3歲，腫瘤直徑0.2～6 cm，平均直徑2.4 cm。浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組160例，年齡28～78歲，平均年齡50.5歲。

1.2 試劑

雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)、人表皮生長(zhǎng)因子受體2(human epidermal growth factor receptor 2，HER-2)和Ki-67抗體、免疫組化試劑盒購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 免疫組化檢測(cè)及結(jié)果判定 腫瘤標(biāo)本采用10%中性甲醛溶液固定，石蠟包埋連續(xù)切片4 μm厚，HE染色確定組織學(xué)進(jìn)行分級(jí)，采用免疫組化SP法檢測(cè)乳腺癌ER、PR、HER-2、Ki-67。Ki-67陽(yáng)性染色定位于細(xì)胞核，按視野中陽(yáng)性細(xì)胞所占的比例進(jìn)行計(jì)數(shù)，以任意5個(gè)高倍鏡視野中陽(yáng)性細(xì)胞所占比例的平均值定義為陽(yáng)性細(xì)胞百分比并作為評(píng)定依據(jù)。ER和PR陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn):腫瘤細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核棕黃染色或＜1%的細(xì)胞核較弱棕黃染色為陰性，＞1%的細(xì)胞核棕黃染色則為陽(yáng)性。HER-2陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn):細(xì)胞膜棕黃染色為陽(yáng)性。無(wú)細(xì)胞染色或＜10%的細(xì)胞膜弱染色為(－);＞10%的細(xì)胞膜部分弱染色為(+);＞10%的細(xì)胞膜完全弱到中等染色為(++);＞10%的細(xì)胞膜完全強(qiáng)染色為(+++)。HER-2(++)的病例進(jìn)一步進(jìn)行FISH檢測(cè)，HER-2(+++)者定義為陽(yáng)性。

1.3.2 組織學(xué)分級(jí) 以瘤細(xì)胞的核級(jí)別為基礎(chǔ)，參考瘤細(xì)胞的壞死和極化現(xiàn)象，將DCIS分為低、中、高級(jí)別三級(jí)［8］。低級(jí)別:核形態(tài)單形性、大小一致及分布規(guī)律，核仁及核分裂像罕見(jiàn)，無(wú)瘤細(xì)胞壞死，常有細(xì)胞極化現(xiàn)象;中級(jí)別:核有輕到中度多形性，大小略有差異，核仁及核分裂像可見(jiàn)，可有瘤細(xì)胞壞死，偶見(jiàn)細(xì)胞核極化現(xiàn)象;高級(jí)別:核呈明顯多形性，常見(jiàn)瘤細(xì)胞壞死，無(wú)細(xì)胞極化現(xiàn)象。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，計(jì)數(shù)資料以%表示，采用χ2檢驗(yàn);計(jì)量資料采用s表示，組間對(duì)比采用配對(duì)t檢驗(yàn)，非正態(tài)分布資料或方差不齊，采用秩和檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 DCIS分子分型分布情況

根據(jù)2013年St Gallen共識(shí)乳腺癌分子分型判定標(biāo)準(zhǔn)，57例 DCIS分為 Luminal A、Luminal B、Her-2過(guò)表達(dá)、三陰性型四型，其中Luminal A型26例，所占比例最高 45.61%;其次為 Luminal B型 17例，占29.82%，Luminal型共占75.43%;HER-2 過(guò)表達(dá)型 11例(19.30%);三陰性型最少占5.27%。浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中Luminal A型、Luminal B型、HER-2過(guò)表達(dá)型及三陰性型分別占 26.25%、36.88%、21.24% 和15.63%。DCIS組Luminal A型所占比例最高，與浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中Luminal A相比差異非常顯著(P=0.003)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;三陰性型所占比例最小，與浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中三陰性型相比差異顯著(P=0.019);而Luminal B型、HER-2過(guò)表達(dá)型所占比例相當(dāng)，沒(méi)有差異，見(jiàn)表1。

表1 DCIS與浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌的分子分型分布情況(例，%)

2.2 DCIS分子分型與組織學(xué)分級(jí)的關(guān)系

57例DCIS中Her-2過(guò)表達(dá)型及三陰性型乳腺癌全部為高級(jí)別(100.00%);DCIS中Luminal B型所占比例低、中級(jí)別6例，高級(jí)別11例(64.71%);DCIS中Luminal A型所占比例低、中級(jí)別19例，高級(jí)別7例(26.92%)，見(jiàn)表2。高級(jí)別在Luminal A型DCIS中所占比例較低，與Luminal B型、Her-2過(guò)表達(dá)型及三陰性型相比差異顯著(P＜0.001)。

表2 DCIS分子分型與組織學(xué)分級(jí)的關(guān)系

2.3 DCIS分子分型與Ki-67指數(shù)的關(guān)系

Luminal A型、Luminal B型DCIS的Ki-67指數(shù)低于HER-2過(guò)表達(dá)型與三陰性型DCIS的Ki-67指數(shù)。其中Luminal B型、HER-2過(guò)表達(dá)型和三陰性型Ki-67指數(shù)均顯著高于Luminal A型(P＜0.001)，而Luminal B型、HER-2過(guò)表達(dá)型和三陰性型乳腺癌三者間的Ki-67指數(shù)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見(jiàn)表3。

表3 DCIS分子分型與Ki-67指數(shù)的關(guān)系(s)

表3 DCIS分子分型與Ki-67指數(shù)的關(guān)系(s)

其他型Ki-67指數(shù)與Luminal A型比較，＊＊為P＜0.01。

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3 討論

腫瘤存在異質(zhì)性即，同一組織學(xué)類型、分化程度相同的腫瘤對(duì)同一藥物的敏感性不同。DCIS是一類非全身性的導(dǎo)管局部病變，為浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌的前驅(qū)病變，不同類型的DCIS的生物學(xué)行為明顯不同，臨床上需要反映其局部復(fù)發(fā)或進(jìn)展為浸潤(rùn)性癌的危險(xiǎn)性的生物學(xué)指標(biāo)。DCIS的分子分型與DCIS的疾病轉(zhuǎn)歸、患者預(yù)后和治療反應(yīng)密切相關(guān)，已成為DCIS領(lǐng)域的熱點(diǎn)。

不同的研究對(duì)乳腺癌各分子亞型所占比例的報(bào)道不一，浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中50% ～67%的病例表現(xiàn)為L(zhǎng)uminal型［9］。袁中玉等［10］對(duì) 1 280 例乳腺癌進(jìn)行分析，Luminal型、HER-2過(guò)表達(dá)型及基底細(xì)胞樣型分別占55.9%、20.9%、23.2%。本研究 160例浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中Luminal型、HER-2過(guò)表達(dá)型及三陰性型分別占63.13%、21.24%、15.63%。而 DCIS 中 Luminal型、Her-2過(guò)表達(dá)和三陰性型分別占75.43%，19.30%和5.27%。尤其是Luminal A和三陰性型差異極顯著。

Ki-67是1種與增殖細(xì)胞相關(guān)的核抗原，存在于增殖細(xì)胞的G1、S、G2和M期中，而在G0期不表達(dá)，主要用于判斷細(xì)胞增殖活性，其表達(dá)與多種惡性腫瘤的分化程度、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)［11］。Ki-67的高表達(dá)往往預(yù)示腫瘤患者的不良預(yù)后［12］。本研究發(fā)現(xiàn)，Ki-67在不同分子分型DCIS間的表達(dá)存在差異，其中LuminalA型DCIS中Ki-67表達(dá)最低，預(yù)后效果較好，而Luminal B型，Her-2過(guò)表達(dá)型和三陰性DCIS中Ki-67指數(shù)相對(duì)較高，預(yù)后較差。

乳腺癌病理組織學(xué)分類中按細(xì)胞核形態(tài)將DCIS分為低、中、高三個(gè)級(jí)別，不同級(jí)別的DCIS可能具有不同的遺傳學(xué)起源和發(fā)生背景，DCIS具有進(jìn)展為浸潤(rùn)性癌的趨勢(shì)。Prasad等［13］研究提示高核分級(jí)和粉刺型的DCIS侵襲能力強(qiáng)，易向間質(zhì)浸潤(rùn)，也易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。本研究57例DCIS低、中級(jí)別在Luminal型尤其是Luminal A型中所占比例較高，Her-2過(guò)表達(dá)型及三陰性乳腺癌全部為高級(jí)別，提示Her-2過(guò)表達(dá)型及三陰性DCIS惡性程度相對(duì)較高，預(yù)后較差。另外，高級(jí)別DCIS與浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌的分子分型具有一致性，可能是浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌的前驅(qū)病變之一。

因此，本研究表明大部分DCIS患者為L(zhǎng)uminal型，Luminal型(Luminal A型)為低級(jí)別DCIS，且Ki-67指數(shù)較低，結(jié)果表明Luminal型(Luminal A型)預(yù)后較好，而HER-2過(guò)表達(dá)型及三陰性型全部為高級(jí)別乳腺導(dǎo)管內(nèi)癌，與浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌的分子分型具有一致性，Ki-67指數(shù)較高，預(yù)示其發(fā)展為浸潤(rùn)癌的風(fēng)險(xiǎn)較高。

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