胡亞遠(yuǎn) 張春秀福建省漳州正興醫(yī)院檢驗(yàn)科，福建漳州 363000

羅氏Cobas e 602電化學(xué)發(fā)光分析儀檢測(cè)CA19-9方法學(xué)評(píng)價(jià)

胡亞遠(yuǎn) 張春秀
福建省漳州正興醫(yī)院檢驗(yàn)科，福建漳州 363000

[摘要]目的 探討糖鏈抗原19-9（CA19-9）采用羅氏Cobas e 602電化學(xué)發(fā)光分析儀檢測(cè)方法學(xué)評(píng)價(jià)。方法 采用羅氏Cobas e 602電化學(xué)發(fā)光分析儀，在分析測(cè)量范圍、準(zhǔn)確度、精密度上對(duì)CA19-9檢測(cè)，實(shí)施方法學(xué)評(píng)價(jià)。 結(jié)果 TM1批內(nèi)精密度監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，與說(shuō)明書(shū)中的變異系數(shù)（CV）＜2.3%較為相似，TM2批內(nèi)精密度監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，與說(shuō)明書(shū)中的CV＜1.8%相似。TM1、TM2對(duì)CA19-9測(cè)定得出的批間精密度均在CA＜2.6%，＜1.9%內(nèi)，表明儀器穩(wěn)定性和精密度居更高水平。檢驗(yàn)中心室間質(zhì)評(píng)物檢測(cè)CA19-9的結(jié)果對(duì)比靶值，偏倚范圍為-9.48%～1.77%，表明儀器檢測(cè)有較高準(zhǔn)確度。從6個(gè)試驗(yàn)樣本檢測(cè)CA19-9和已知樣品檢測(cè)結(jié)果獲取直線方程，R2=0.9988，Y=1.007X-0.493，在規(guī)定b值0.97～1.03，R2≥0.95內(nèi)，二者呈較好的線性相關(guān)。 結(jié)論 在CA19-9檢測(cè)中，應(yīng)用羅氏cobas e 602電化學(xué)發(fā)光分析儀，在分析測(cè)量范圍、準(zhǔn)確度、精密度等方法學(xué)檢測(cè)指標(biāo)上，與評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和驗(yàn)證符合，可為臨床檢測(cè)工作提供準(zhǔn)確的參考依據(jù)。

[關(guān)鍵詞]羅氏Cobas e 602；電化學(xué)發(fā)光分析儀；CA19-9；方法學(xué)評(píng)價(jià)

近年來(lái)，我國(guó)社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展成就卓越，帶動(dòng)了醫(yī)療科技的進(jìn)步，臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)也隨之不斷提高，應(yīng)用羅氏Cobas e 602對(duì)CA1909檢測(cè)，掌握羅氏Cobas e 602分析測(cè)定范圍、準(zhǔn)確度、精密度，可為臨床疾病的診治提供有力參考依據(jù)[1-3]，本次研究就此展開(kāi)探討，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選用電化學(xué)發(fā)光分析儀羅氏Cobas e 602型，包括配套校準(zhǔn)品和試劑，以腫瘤質(zhì)控品（羅氏公司生產(chǎn)）作質(zhì)控品。TM1和TM2由羅氏公司生產(chǎn)，準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)依據(jù)EP15-A2文件所制定標(biāo)準(zhǔn)（Clinical and Laboratory Standards Institute，https://www.ihs.com/ products/clsi-standards.html）；測(cè)量范圍依據(jù)CLSI 的EP-6A文件評(píng)價(jià)。根據(jù)的EP15-A2文件指南進(jìn)行試驗(yàn)操作，選用羅氏公司生產(chǎn)的TM1（低水平，批號(hào)為165880）和TM2（高水平，批號(hào)為165881）2個(gè)水平的質(zhì)控品，每天室內(nèi)質(zhì)控在控后對(duì)TM1和TM2重復(fù)測(cè)定4次，連續(xù)5d。計(jì)算批內(nèi)不精密度和批間精密度，并與廠家聲明的批內(nèi)不精密度和批間精密度比較。

1.2方法

（1）評(píng)價(jià)精密度：依據(jù)EP-5A文件，完成重復(fù)性批內(nèi)、批間試驗(yàn)，應(yīng)用低水平TM1和高水平TM2質(zhì)控品。首先，實(shí)施批內(nèi)精密度檢測(cè)：對(duì)2個(gè)濃度TM1和TM2質(zhì)控品重復(fù)測(cè)定，各20次，對(duì)兩組變異系數(shù)（CV）、均值（x）標(biāo)準(zhǔn)差（s）分別計(jì)算。再次，完成批間精密度試驗(yàn)，每日對(duì)2個(gè)濃度TM1、TM2的質(zhì)控品測(cè)定1次，共20d，對(duì)兩組CV、均值與平均差分別計(jì)算，得出CV值。（2）評(píng)價(jià)準(zhǔn)確度：依據(jù)EP15-A2文件評(píng)價(jià)準(zhǔn)確度，應(yīng)用2013年衛(wèi)生部臨檢中心發(fā)放的第2次室間質(zhì)評(píng)物檢測(cè)，包括腫瘤標(biāo)志物的5個(gè)樣本。將檢測(cè)結(jié)果對(duì)比質(zhì)評(píng)物靶值，對(duì)相對(duì)偏倚（%）計(jì)算，評(píng)估有無(wú)在許可范圍。（3）評(píng)價(jià)測(cè)量范圍（AMR）：對(duì)CA19-9低、高值的血清各留取一份，所獲得血清的樣本濃度與儀器測(cè)量線性范圍相似和接近。將低、高濃度樣本按5：0，4：1，3：2，2：3，1：4，0：5的不同比例混合（n=6），實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。數(shù)據(jù)采用直線回歸統(tǒng)計(jì)處理，均值設(shè)置為Y軸，分析物濃度設(shè)置為X軸，Y=bx+a，若b值在0.97 ～ 1.03，R2≥0.95，則可為真實(shí)的測(cè)量分析范圍，作臨床參考依據(jù)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

實(shí)驗(yàn)中涉及數(shù)據(jù)均在SPSS13.0中輸入，組間計(jì)量數(shù)據(jù)采用（±s）表示，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1TM1批內(nèi)精密度監(jiān)測(cè)

TM1批內(nèi)精密度監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，與說(shuō)明書(shū)中的CV＜2.3%較為相似，TM2批內(nèi)精密度監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，與說(shuō)明書(shū)中的CV＜1.8%相似。TM1、TM2對(duì)CA19-9測(cè)定得出的批間精密度均在1.9%＜CV ＜2.6%，表明儀器穩(wěn)定性和精密度居更高水平。見(jiàn)表1。

表1　本次實(shí)驗(yàn)中批內(nèi)、批間精密度變化（±s，n=6）

表1　本次實(shí)驗(yàn)中批內(nèi)、批間精密度變化（±s，n=6）

CA19-9批間　精密度　批內(nèi)　精密度濃度　（U/mL)CV（%）±s（U/mL)CV（%）TM1　18.3±0.45　2.43±0.03　18.6±0.42　2.18±0.12 TM2　80.8±1.42　1.75±0.04　82.4± 1.28　1.54±0.14 t　102．774　33.313　116.006　8.501 P 0.000　0.000　0.000　0.000

2.2評(píng)價(jià)準(zhǔn)確度

檢驗(yàn)中心室間質(zhì)評(píng)物檢測(cè)CA19-9的結(jié)果對(duì)比靶值，偏倚范圍為-9.48～1.77%，較中心規(guī)定±25%呈較低顯示，與廠家要求＜10%符合，儀器檢測(cè)準(zhǔn)確度居較高水平。見(jiàn)表2。

表2　本次實(shí)驗(yàn)中儀器檢測(cè)準(zhǔn)確度變化

2.3測(cè)量范圍評(píng)價(jià)

檢測(cè)結(jié)果獲取的直線方程中，R2=0.998 8，Y=1.007X-0.493，在規(guī)定b值0.97 ～ 1.03，R2≥0.95內(nèi)，二者呈較好的線性相關(guān)，可作為真實(shí)實(shí)施分析測(cè)量時(shí)的范圍，供臨床參考。

3　討論

依據(jù)ISO 15189對(duì)目前臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量要求，實(shí)驗(yàn)室在新的檢驗(yàn)方法建立前，或?qū)λ袡z驗(yàn)方法使用時(shí)，均需評(píng)價(jià)其基本性能，確保檢驗(yàn)系統(tǒng)可對(duì)臨床應(yīng)用滿意，確?？煽啃?，方法學(xué)評(píng)價(jià)內(nèi)容在操作過(guò)程中通常包括可報(bào)告的針對(duì)性范圍、具體準(zhǔn)確度、精密度，其中準(zhǔn)確度和精密度的測(cè)定為最主要的驗(yàn)證指標(biāo)[4-6]。

在評(píng)價(jià)精密度中，參考EP-5A文件方法實(shí)施重復(fù)性批內(nèi)、批間試驗(yàn)，精密度質(zhì)控品達(dá)廠家要求，而精密度由廠家給定的數(shù)值較CISI性能要求低，精密度經(jīng)質(zhì)控品檢測(cè)，可滿足CISI性能要求[7-10]。因自人體來(lái)源的樣本成分較為復(fù)雜，存在較多干擾因素，臨床工作準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)時(shí)極大程度上影響了檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性[11-13]。故采用EP15-A2方法對(duì)準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)，準(zhǔn)確度符合要求[14-15]。

在試驗(yàn)中，依據(jù)EP-6A文件完成AMR評(píng)價(jià)，將高值和低值CA19-9樣本按5∶0比例；4∶1比例；3∶2比例；1∶4比例；0∶5比例予以混合，對(duì)線性試驗(yàn)樣獲取，共6個(gè)，計(jì)算平均值，數(shù)據(jù)應(yīng)用直線回歸統(tǒng)計(jì)方法處理。從6個(gè)試驗(yàn)樣本檢測(cè)CA19-9和已知樣品檢測(cè)結(jié)果獲取直線方程，R2=0.998 8，Y=1.007X-0.493，在規(guī)定b值0.97 ～ 1.03，R2≥0.95內(nèi)，二者呈較好的線性相關(guān)，可作為真實(shí)實(shí)施分析測(cè)量時(shí)的范圍，供臨床參考。CA19-9由Koprowski在1979年首先從大腸癌組織分離中檢出，是臨床上目前應(yīng)用最多、最有價(jià)值的腫瘤相關(guān)抗原之一，正常支氣管上皮細(xì)胞、腺泡中心細(xì)胞、胰腺導(dǎo)管及子宮內(nèi)膜均可有CA19-9分布和表達(dá)，但血清濃度多在37KU/L。在消化道惡性腫瘤發(fā)生時(shí)，尤其是胰腺癌，檢測(cè)血清CA19-9，可呈顯著升高表現(xiàn)，為最具價(jià)值的診斷胰腺癌的腫瘤標(biāo)志物。近年來(lái)，隨著對(duì)CA19-9研究的深入，進(jìn)一步認(rèn)識(shí)了其臨床價(jià)值，可用于指導(dǎo)治療。Nishida等統(tǒng)計(jì)血清CA19-9呈2倍升高的所需時(shí)間，與胰腺癌患者腫瘤體積和生存期變化聯(lián)系分析，結(jié)果示所需時(shí)間與患者臨床生存期有較大相關(guān)性，此時(shí)期越短，越有較短的生存期，血清CA19-9升高2倍時(shí)間需患者腫瘤體積增長(zhǎng)2倍時(shí)間呈正相關(guān)，即腫瘤體積在CA19-9上升越快時(shí)，增長(zhǎng)越高。對(duì)CA19-9研究，可用于胰腺癌患者療效和預(yù)后評(píng)估，有理想的監(jiān)測(cè)血清CA19-9價(jià)值。

綜上，在CA19-9檢測(cè)中，應(yīng)用羅氏cobas e 602電化學(xué)發(fā)光分析儀，在分析測(cè)量范圍、準(zhǔn)確度、精密度等方法學(xué)檢測(cè)指標(biāo)上，與評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和驗(yàn)證符合，可為臨床檢測(cè)工作提供準(zhǔn)確的參考依據(jù)。

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[中圖分類號(hào)]R197.39

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B

[文章編號(hào)]2095-0616（2015）23-132-03

收稿日期：（2015-08-20）

Methodology evaluation of roche cobas e 602 ECL analyzer detected CA19-9

HU Yayuan ZHANG Chunxiu
Department of Laboratory,Zhengxing Hospital,Zhangzhou 363000,China

[Abstract]Objective To investigate methodology evaluation of Roche Cobas e 602 ECL analyzer detected by Carbohydrate antigen 19-9 (CA19-9). Methods The study implement methodology evaluation by using ECL Roche Cobas e 602 analyzer to measure range,accuracy,precision on CA19-9 tested. Results The results show that the variation coefficient (CV) of the＜2.3% is similar to that of the instruction manual (TM1).TM2 batch precision monitoring results show that the CV＜1.8% is similar to the instruction manual(TM2).Inter-assay precision TM1,TM2 of CA19-9 were measured in the specification CA＜2.6%,＜1.9%.The results suggest that the instrument has high stability and precision.Contrast target value(bias range) of inspection Center EQA in CA19-9 test was -9.48%-1.77%. The results suggest detection equipment have high Accuracy.From the six test samples tested CA19-9 to obtain a linear equation: R2=0.998 8,Y=1.007X-0.493,b at a predetermined value 0.97-1.03,within R2≥0.95,all data have good linear correlation. Conclusion In CA19-9 detection by using Roche cobas e 602 application ECL analyzer,the analytical measurement range,accuracy,precision,and so on methodological detection index,and verify compliance with the evaluation criteria,can be provided for clinical testing work accurate reference. [Key words] Roche Cobas e 602;ECL analyzer;CA19-9;Methodology evaluation