廖林淇
摘 要:高效液相色譜儀檢測(cè)器是基于高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用而制作的,其不僅操作簡(jiǎn)便,同時(shí)檢測(cè)的結(jié)果也更加的精確,檢測(cè)的效率也更高。該文對(duì)高效液相色譜儀檢測(cè)器在藥物分析中的應(yīng)用進(jìn)行了詳細(xì)的分析和研究,希望給后續(xù)相關(guān)方面的學(xué)習(xí)、研究和應(yīng)用提供幫助。
關(guān)鍵詞:高效液相色譜 檢測(cè)器 藥物分析
中圖分類號(hào):O657 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1674-098X(2015)02(c)-0236-01
近些年,隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,我國(guó)在醫(yī)學(xué)藥物分析方面的檢測(cè)技術(shù)和檢測(cè)設(shè)備都得到了快速的發(fā)展[1]。高效液相色譜儀檢測(cè)器作為一種高效的藥物分析儀器,其不僅設(shè)備操作簡(jiǎn)單,其檢測(cè)結(jié)果相對(duì)于傳統(tǒng)的人工檢測(cè)也更加的高效、精確,故其現(xiàn)階段在我國(guó)藥物分析生命科學(xué)領(lǐng)域中被廣泛的應(yīng)用。該文就我國(guó)一些新型的高效液相色譜儀檢測(cè)器,如:質(zhì)譜檢測(cè)器、電化學(xué)檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、蒸發(fā)光檢測(cè)器以及紫外檢測(cè)器等在藥物分析中的具體應(yīng)用進(jìn)行了詳細(xì)的分析和研究。
1 紫外檢測(cè)器(UVD)
紫外檢測(cè)器是應(yīng)用最為普遍的一種高效液相色譜檢測(cè)器,其主要是將待檢測(cè)樣品通過(guò)流通池,然后借助流通池對(duì)于樣品中特定波長(zhǎng)的紫外線進(jìn)行吸收,使透過(guò)流通池的光強(qiáng)發(fā)生變化,從而得到濃度-時(shí)間曲線。該種檢測(cè)器的檢測(cè)精密度、靈敏度及線性范圍均較好,但是其只適用于那些對(duì)紫外線有吸收的樣品組分的檢測(cè)中。在隨后出現(xiàn)的一種二極管陣列檢測(cè)器(DAD),可以同時(shí)獲得待測(cè)樣品組分的色譜圖和每個(gè)色譜圖組分的吸收光譜,光譜圖可以用來(lái)定性,色譜圖則可以用于定量。此外,該種儀器具有良好的重現(xiàn)性和靈敏度,同時(shí)對(duì)于藥物分析的精密度也較好,效率也較高[2]。
2 熒光檢測(cè)器(FD)
目前我國(guó)所使用的熒光檢測(cè)器大都是帶有流通池的熒光分光光度計(jì)。相較于紫外檢測(cè)器而言,熒光檢測(cè)器具有更高的檢測(cè)靈敏度,其檢測(cè)極限可以達(dá)到1×10-10 g/mL,是目前我國(guó)體內(nèi)藥物分析中一個(gè)常用的檢測(cè)儀器,但是該檢測(cè)器僅適用于檢測(cè)那些能自身能發(fā)出熒光或者衍生物可以發(fā)出熒光的物質(zhì)。例如:通過(guò)以百里酚為內(nèi)標(biāo)定量,用環(huán)己烷來(lái)對(duì)全血中的丙泊酚進(jìn)行提取,并用熒光檢測(cè)器對(duì)從全血中提取出的丙泊酚含量進(jìn)行測(cè)定,發(fā)現(xiàn)檢測(cè)的靈敏度比紫外線檢測(cè)器的靈敏度高出100倍,這對(duì)于患者血藥濃度的檢測(cè)具有重要的作用。又如通過(guò)利用羅紅霉素、甲紅霉素和紅霉素分子中的羥基同F(xiàn)MOC-CL(9-芴代甲氧苯酰氯)發(fā)生反應(yīng),結(jié)果生成的熒光酯具有顯著的熒光性,這樣就建立了高效液相色譜-熒光法同時(shí)測(cè)定羅紅霉素、甲紅霉素和紅霉素的方法。
3 電化學(xué)檢測(cè)器(ECD)
電化學(xué)檢測(cè)器是基于電化學(xué)原理與高效液相色譜法而建立的一種高靈敏度的檢測(cè)器(靈敏度可以達(dá)到pg水平),色譜柱流出物的響應(yīng)值可以隨著電化學(xué)檢測(cè)器電位的變化而變化。此外,該檢測(cè)器可以在一定的電位條件下得到不同保留時(shí)間內(nèi)所形成的色譜圖。例如:可以通過(guò)采用電化學(xué)檢測(cè)器來(lái)對(duì)金蕎麥中的表兒茶素含量進(jìn)行測(cè)定,這樣就可以為金蕎麥飲片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供參考依據(jù)。如,通過(guò)電化學(xué)檢測(cè)器對(duì)大鼠血液中的代謝產(chǎn)物和腦組織進(jìn)行測(cè)定,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)5-羥色胺、高香草酸、多巴胺、3,4-二羥基苯乙酸、腎上腺素和甲腎上腺素等物質(zhì)的同時(shí)測(cè)定,并能夠?qū)?nèi)標(biāo)3,4-二羥卞胺進(jìn)行良好的分離。
4 蒸發(fā)光散檢測(cè)器(ELSD)
蒸發(fā)光散檢測(cè)器最先由澳大利亞研究室開(kāi)發(fā)出來(lái),是90年代的通用藥物檢測(cè)器。該檢測(cè)器主要是在流動(dòng)相揮發(fā)除去的基礎(chǔ)上,利用流動(dòng)相與其被檢測(cè)物質(zhì)之間蒸汽壓的相對(duì)差異,通過(guò)不揮發(fā)性組分粒子使激光發(fā)生散射,然后借助硅光二極管來(lái)對(duì)發(fā)生散射的關(guān)心好進(jìn)行記錄,并將其輸出,從而得到有關(guān)的色譜及數(shù)據(jù)。該儀器主要的運(yùn)行過(guò)程可以分為霧化、蒸發(fā)和檢測(cè)這三個(gè)過(guò)程。該檢測(cè)器的最大特性就是其可以對(duì)那些揮發(fā)性小于流動(dòng)相,且不含發(fā)色團(tuán)的化合物都可以進(jìn)行檢測(cè),這樣將大大地拓寬其在藥物分析中的應(yīng)用范圍,如,對(duì)于甘油三酯、氨基酸、維生素、磷脂、高級(jí)脂肪酸、高分子化合物以及糖類等的分析與檢測(cè)。
5 質(zhì)譜檢測(cè)器(MSD)
質(zhì)譜檢測(cè)器在通用性、選擇性、靈敏度及化合物的結(jié)構(gòu)信息和分子量的提供等方面具有突出的特性。近些年,隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)已經(jīng)逐漸的成為一種常規(guī)化、自動(dòng)化的分析手段,并在許多領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用于普及。LC-MC常用的接口技術(shù)有動(dòng)態(tài)快原子轟擊、大氣壓化學(xué)電離、電噴霧電離、粒子束、等離子體噴霧及特噴霧等。隨著軟離子化技術(shù)的飛速發(fā)展,LC-MS在中藥研究中的地位與日俱增,并逐漸成為了其他技術(shù)所不能替代的藥物分析技術(shù)。如通過(guò)借助LC-MS來(lái)對(duì)體內(nèi)局部麻醉劑羅哌卡因、丙胺卡因、甲哌卡因、布比卡因進(jìn)行同時(shí)的測(cè)定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果精確度高,方法簡(jiǎn)便、快捷,非常適合藥代動(dòng)力學(xué)的研究。
綜上所述,高效液相色譜儀檢測(cè)器在藥物分析中具有重要的作用,其不僅可以提高檢測(cè)的效率和檢測(cè)結(jié)果的精確度,同時(shí)隨著儀器自動(dòng)化程度的提升,也可以極大地降低檢測(cè)者的勞動(dòng)強(qiáng)度[3]。因此,在藥物分析的過(guò)程中,有關(guān)方面的工作者要善于運(yùn)用這些先進(jìn)的檢測(cè)儀器,并要對(duì)現(xiàn)有的檢測(cè)手段和技術(shù)進(jìn)行不斷地完善和創(chuàng)新。只有這樣,高效液相色譜儀檢測(cè)器才能在藥物分析中發(fā)揮出日趨重要的作用。
參考文獻(xiàn)
[1] 李紅星,王金平,陳建英.高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用概述[J].重慶中草藥研究,2010,15(2):38-39.
[2] 楊杰.高效液相色譜儀檢測(cè)器進(jìn)展及其在藥物分析中的應(yīng)用[J].實(shí)用藥物與臨床,2007,10(3):187-188.
[3] 張良曉.高效液相色譜在藥物分析中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].內(nèi)蒙古石油化工,2005,18(7):3-5.