李文權，唐 云，梅光泉

(宜春學院 江西省高校應用化學與化學生物學重點實驗室，江西 宜春 336000)

棱角絲瓜 (Luffa acutangula(L.)Roxb)是葫蘆科絲瓜屬植物棱角絲瓜的果實，又名八棱絲瓜、廣東絲瓜。果嫩時作菜蔬，成熟后網(wǎng)狀纖維即絲瓜絡。絲瓜絡可作藥用，具有通經(jīng)活絡，解毒消腫等功效。［1］絲瓜絡在我國應用歷史悠久，古籍記載頗多。目前，國內(nèi)外學者對其化學成分也有一定的研究，先后從中分離得到甾醇、三萜及其皂苷類化合物等，其中皂苷類化合物含量較大。［2］

絲瓜皂苷具有滋補壯陽、增強記憶、鎮(zhèn)咳、利尿、抗氧化及防止與治療因使用波尼松等類固醇藥物所產(chǎn)生的副作用，還有滋潤皮膚和治療燙傷的作用，其最主要的生物活性是抗應急作用、增強免疫作用和防止激素副作用，［3－6］因此，絲瓜皂苷的分離和藥理作用受到國內(nèi)外學者的關注。本文通過對不同產(chǎn)地棱角絲瓜中總皂苷的含量比較，為完善棱角絲瓜的研究提供理論依據(jù)。

1 儀器、試劑和材料

1.1 儀器

RE－52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 (上海亞榮生化儀器廠)，KQ－300E型超聲波清洗器 (昆山市超聲儀器有限公司)，UV－2000紫外可見分光光度計 (尤尼柯儀器有限公司)，XMTD－2MA型電熱恒溫水浴箱 (龍口市先科儀器公司)，WZNHW－II型電熱套 (鞏義予華儀器有限責任公司)，YP2001電子天平 (上海良平儀器有限公司)，AR224CN電子天平(奧豪斯儀器有限公司)。

1.2 試劑

齊墩果酸對照品(純度≥98%，自制)，70%乙醇(自配)，高氯酸(分析純，武漢鴻?？翟噭┯邢薰?，甲醇(分析純，天津永大化學試劑有限公司)，香草醛(分析純，天津大茂化學試劑廠)，冰醋酸(分析純，天津永大化學試劑有限公司)，正丁醇(分析純，上?；瘜W試劑有限公司)。

1.3 藥材

棱角絲瓜藥材購于當?shù)厮幏炕蛎耖g收集，藥材來源見表1。

表1 樣品來源及編號

2 實驗和結(jié)果

2.1 對照品溶液的制備

精密稱取齊墩果酸對照品5.0mg，置于50mL量瓶中，加甲醇溶解并定容，備用。

2.2 供試品溶液的制備

稱取20.0g棱角絲瓜，70%乙醇作為提取劑，提取時間為2h，固液比為1:25，提取兩次，提取液濃縮至無醇味，用水飽和的正丁醇萃取3次，每次20mL，合并正丁醇相，濃縮，用甲醇溶解轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中，定容，再取1mL用甲醇定容至25mL容量瓶中，得樣品溶液，備用。

2.3 最佳測定波長的選擇

取對照品溶液和供試品溶液 (江西)各0.5mL，于具塞試管中水浴揮干溶劑，精密加入臨時配置的0.2mL 5%香草醛－冰醋酸溶液和1mL高氯酸，搖勻，于60℃水浴下加熱25min，立即取出，冰浴10min，加入冰醋酸5mL，搖勻。以相應試劑作空白，在400～700nm波長范圍內(nèi)測定其吸收光譜，確定測定波長為540nm。

2.4 標準曲線的繪制

精密量取對照品溶液0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9mL分別置于具塞試管中，置水浴中揮盡溶劑，精密加入臨時配置的0.2mL 5%香草醛—冰醋酸溶液和1mL高氯酸，搖勻，于60℃水浴中加熱25min，立即取出，冰浴10min，加入冰醋酸5mL，搖勻，以相應試劑作空白，在540nm處測定其吸光度，得質(zhì)量與吸光度的回歸方程為:Y=0.0099X+0.0263，r=0.9994，線性范圍為30～90ug。

2.5 精密度試驗

精密吸取對照溶液0.3mL和供試品溶液 (江西)0.5mL，顯色后連續(xù)測定吸光度6次，結(jié)果吸光度的RSD分別為0.20%和0.39%。

2.6 重復性試驗

取同一產(chǎn)地棱角絲瓜藥材 (江西)5份，按“2.2”項下方法制備供試品溶液，顯色后測吸光度，結(jié)果吸光度的RSD為1.44%，表明方法重復性良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗

精密吸取供試品溶液 (江西)0.5mL于具塞試管中，顯色后每隔5min測定一次吸光度，試驗結(jié)果表明，供試液在25min內(nèi)吸光度值變化幅度較小，RSD為1.68%，穩(wěn)定性較好。但當時間大于25min后，吸光度的 RSD大于2.0%，所以測定應該在25min內(nèi)完成。

2.8 加樣回收率試驗

稱取已知總皂苷含量的棱角絲瓜 (河北)5份，準確加入等量對照品，按“2.2”項下方法制備供試品溶液，在540nm處測定吸光度，結(jié)果平均回收率為99.8%，RSD為3.03%。

2.9 不同產(chǎn)地棱角絲瓜總皂苷含量測定

表2 不同產(chǎn)地棱角絲瓜中總皂苷含量

按“2.2”項下方法制備不同產(chǎn)地棱角絲瓜的供試品溶液各3份，在540nm處測定吸光度，取平均值，將其帶入標準曲線，計算各地角瓜總皂苷含量 (見表2)。

3 討論

本文采用比色法，以齊墩果酸為對照品，測定不同產(chǎn)地棱角絲瓜中總皂苷的含量，結(jié)果顯示不同產(chǎn)地棱角絲瓜中總皂苷的量差異較大，沒有明顯的地域規(guī)律，廣東和河北產(chǎn)棱角絲瓜中總皂苷含量較高，分別為8.24mg/g生藥和7.62mg/g生藥，河北、福建、山東、廣西產(chǎn)棱角絲瓜中總皂苷含量依次降低，其中江西產(chǎn)棱角絲瓜中總皂苷含量最低，為2.25mg/g生藥，可能和土壤、氣候等因素有關，具體原因仍有待進一步研究。

《中國藥典》中收錄的絲瓜絡沒有含量測定這一項。［7］本研究建立的方法操作簡便，測定結(jié)果準確，可用于棱角絲瓜藥材中總皂苷的含量測定，為絲瓜絡質(zhì)量標準的完善提供依據(jù)。

［1］中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志［M］.北京:科學出版社，1986:196.

［2］梁龍，魯靈恩，蔡元聰.絲瓜屬植物化學成分研究概況［J］. 華西藥學雜志，1995，10(1):32 －38.

［3］齊尚斌，何光星，劉云.絲瓜皂苷的藥理和毒理研究［C］.全國抗衰老藥物學術年會資料匯編，1990:137－137.

［4］張鈞田.近年來國內(nèi)關于學習與記憶藥理學研究概況［J］. 藥學學報，1986，21(8):78 －82.

［5］何光星，劉云齊，尚斌.絲瓜皂苷的部分藥效學研究［J］.華西藥學雜志，1997，12(2):76 －78.

［6］李利民，聶梅，周永祿，等.絲瓜葉成分L－6a對BALB/C鼠產(chǎn)生IL－1、TNFα及 IL－2的影響［J］.華西藥學雜志，2001，16(5):334 －336.

［7］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［M］.二部.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:113.