王 旭

鞍山市中心醫(yī)院檢驗科，遼寧鞍山 114001

根據(jù)《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》[1]的要求，實驗室儀器正式用于檢測患者標(biāo)本前，需要對儀器的分析性能進行驗證，以保證檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確與可靠，只有儀器的分析性能達到可接受的標(biāo)準(zhǔn)后，才能用于檢測標(biāo)本，向臨床發(fā)檢驗報告。該研究對該科2014年1月新購入的Sysmex CS-5100全自動凝血分析儀的精密度、準(zhǔn)確度、線性、檢測限、攜帶污染率5項性能進行驗證，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 儀器

CS-5100全自動凝血分析儀。

1.2 試劑

Dade Behring公司配套血凝試劑，APTT試劑(Actin)、PT試劑(Thromborel)、TT試劑(Test Thrombin)、FIB試劑(Thrombin)、氯化鈣(Calcium Chloride)、緩沖液 (Owren'sVeronal Buffer)、標(biāo)準(zhǔn)血漿(Standard Human Plasma)、纖維蛋白原標(biāo)準(zhǔn)(Fibrinogen Standards)、定值質(zhì)控血漿水平1(Ci-Trol 1)、定值質(zhì)控血漿水平2(Ci-Trol 2)、異常水平質(zhì)控P（Control Plasma P）。

1.3 標(biāo)本

采集2.7 mL靜脈血，用109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝(比例1:9),充分混勻后，3000 rpm離心10 min。

1.4 方法

1.4.1 精密度試驗 根據(jù)美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)中的EP15-A2[2]的相關(guān)要求，在CS-5100血凝儀上測定兩個水平定值質(zhì)控血漿（Ci-Trol 1、Ci-Trol 2），以了解儀器的重復(fù)性。①批內(nèi)精密度：使用同批號的試劑，在盡量短的時間內(nèi)對兩個水平定值質(zhì)控血漿連續(xù)重復(fù)測定20次，然后計算批內(nèi)均值②和變異系數(shù)(CV)，CV值應(yīng)在廠家規(guī)定范圍內(nèi)。③批間精密度：用同一批號試劑每天測定上述兩種定值質(zhì)控血漿，2次/d測，2遍/次測，2次間隔應(yīng)＞2 h，連續(xù)測定5 d，每次都同時測定2個水平的質(zhì)控，計算批間均值()和變異系數(shù)(CV)，CV值應(yīng)在廠家規(guī)定范圍內(nèi)。

1.4.2 準(zhǔn)確度試驗 取2個水平的定值質(zhì)控血漿（Ci-Trol 1、Ci-Trol 2）在CS-5100全自動凝血分析儀進行PT、APTT、TT、FIB測定，驗證上述幾項的準(zhǔn)確度，每個項目重復(fù)測定3次，測定結(jié)果應(yīng)在廠家提供的定值范圍內(nèi)[3]。

1.4.3 線性驗證 取接近預(yù)期上限的高值FIB血漿，分別按如下比例進行稀釋：100%、80%、60%、40%、20%和10%的比例進行稀釋，每個稀釋度重復(fù)測定3次，將測得的均值與理論值進行比較，計算回歸方程Y=aX+b，要求：a值在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975[4]。

1.4.4 檢測限驗證 將FIB用稀釋液稀釋到廠家標(biāo)識的濃度檢測低限值附近，重復(fù)檢測12次，計算CV，要求CV應(yīng)在廠家標(biāo)識的±20%范圍內(nèi)，即此濃度為FIB的檢測下限。

1.4.5 攜帶污染驗證 ①高值樣本對低值樣本的污染：將低值樣本置樣本架1和3位置，高值樣本置于2位置，每個樣本分別測定3次，記錄結(jié)果：N1、N2、N3、A1、A2、A3、N4、N5、N6。計算k1=[N4-Mean（N1，N2，N3）]/Mean（N1，N2，N3）。②低值樣本對高值樣本的污染：將高值樣本置樣本架1和3位置，低值樣本置于2位置，每個樣本分別測定3次，記錄結(jié)果：A1、A2、A3、N1、N2、N3、A4、A5、A6。計算k2=[A4-Mean（A1，A2，A3）]/Mean（A1，A2，A3）。要求各項結(jié)果CV值應(yīng)符合廠家要求(CV≤10%)[5]。

1.5 統(tǒng)計方法

采用Excel 2003軟件計算及分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料用%表示。

表1 精密度驗證結(jié)果

2 結(jié)果

2.1 精密度實驗結(jié)果

批內(nèi)精密度、批間精密度的結(jié)果均小于廠家給定的靶值，儀器的精密度性能良好，見表1。

2.2 準(zhǔn)確度實驗結(jié)果

PT、APTT、TT、FIB均在廠家給定的范圍內(nèi)，見表2。

表2 準(zhǔn)確度驗證結(jié)果

2.3 線性驗證結(jié)果

CS-5100檢測FIB的線性回歸方程為Y=1.0074X+0.2185，r=0.9857，r＞0.975，符合要求。

2.4 檢測限試驗結(jié)果

該實驗中FIB的檢測限為0.28 g/L，CV為3.45%，在廠家給定＜20%范圍內(nèi)，說明儀器對低值樣本也有很好的檢測性能。

2.5 攜帶污染驗證結(jié)果

儀器檢測各項指標(biāo)的攜帶污染率均低于10%，符合要求，見表3。

表3 攜帶污染驗證結(jié)果（%）

3 討論

近年來，隨著血栓性疾病發(fā)病率逐年上升，臨床對相關(guān)疾病的檢測需求不斷增加，使得臨床實驗室開展凝血檢測項目逐漸增多，而臨床實驗室提供準(zhǔn)確的檢測結(jié)果對疾病的診斷、治療非常重要。根據(jù)《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》要求，臨床實驗室在儀器正式用來檢測患者樣品和發(fā)檢驗報告前，要對其進行性能評價，這是保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確的一項重要措施，也是參加實驗室認(rèn)可的要求[6]。該研究參考美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)相關(guān)要求，對CS-5100全自動凝血分析儀的精密度、準(zhǔn)確度、線性、檢測限、攜帶污染率5項性能進行驗證。

該試驗研究表明，在CS-5100全自動凝血分析儀上測定PT、APTT、TT和FIB的批內(nèi)及批間變異系數(shù)均小于廠家給定的靶值，可見CS-5100具有良好的重復(fù)性和穩(wěn)定性。準(zhǔn)確性試驗結(jié)果表明，PT、APTT、TT和FIB測定結(jié)果均在廠家給定的范圍內(nèi)，從而保證了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。線性測定的相關(guān)系數(shù)r=0.9857，直線回歸方程Y=1.0074X+0.2185，表明線性良好，CS-5100全自動凝血分析儀具有較寬的檢測限和良好的線性范圍能滿足臨床的檢驗需求，攜帶污染率低降低了對樣本的要求，從另一方面也保證了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度。

綜上所述，Sysmex CS-5100全自動凝血分析儀具有優(yōu)良的分析性能，用于凝血項目檢測可獲得準(zhǔn)確可靠的檢測結(jié)果，可滿足臨床檢測需求。

[1]中國合格評定國家認(rèn)可委員會.醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則[S].北京:中國計量出版社,2006:6.

[2]Clinical and Laboratory Standards Institute.EP15-A2 User verification of performance for precision and trueness;approved guideline-second edition[S].Wayne,PA,USA:CLSI,2005.

[3]馮厚梅,孫德華,鄭磊，等.Sysmex CA7000全自動血凝儀性能評價[J].檢驗醫(yī)學(xué),2011,26(1):58-61.

[4]馬升俊.Stago STA-R全自動血凝儀性能驗證與評價[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(1):91-93.

[5]陳淵博,鄭文婷,尹志軍等.CA7000全自動凝血儀性能驗證[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(2):209-211.

[6]胡麗濤,王治國.血凝分析儀的性能評估方法的研究進展[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(9):975-977.