趙景，趙小潔，李彥明，耿玉蘭，張杰，魏從真

(河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院，石家莊050031)

某院2010～2012年白色念珠菌感染的耐藥性分析

趙景，趙小潔，李彥明，耿玉蘭，張杰，魏從真

(河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院，石家莊050031)

目的 分析某院2010～2012年白色念珠菌對(duì)抗真菌藥物的耐藥情況。方法 對(duì)河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院2010～2012年臨床分離的610株白色念珠菌行兩性霉素B、伏立康唑、伊曲康唑和氟康唑藥敏檢測(cè)。結(jié)果 2010年分離124株白色念珠菌對(duì)兩性霉素B、伏立康唑、伊曲康唑和氟康唑的耐藥率分別為0.8%、10.5%、11.3%、10.5%，2011年分離192株白色念珠菌的耐藥率分別為1.6%、20.3%、24.5%、22.4%，2012年分離294株白色念珠菌的耐藥率分別為4.8%、43.2%、53.4%、54.1%。結(jié)論 白色念珠菌對(duì)唑類(lèi)抗真菌藥物的耐藥性逐年增加。

白色念珠菌；藥敏試驗(yàn)；耐藥性；醫(yī)院感染

念珠菌是寄居在人類(lèi)多種組織和器官的雙態(tài)菌，抗生素治療和免疫功能低下可導(dǎo)致其在黏膜上過(guò)度生長(zhǎng)[1～3]。研究[4,5]指出，白色念珠菌是血行感染和院內(nèi)感染的常見(jiàn)原因。由于各種抗腫瘤化療藥、免疫抑制劑、糖皮質(zhì)類(lèi)固醇激素和廣譜抗生素在臨床的廣泛應(yīng)用，念珠菌感染的發(fā)病率正逐年增加；同時(shí)，由于供應(yīng)臨床使用的抗真菌藥品有限，長(zhǎng)期使用亦可導(dǎo)致真菌耐藥性上升。本文對(duì)我院2010～2012年白色念珠菌藥物耐藥性進(jìn)行了比較分析。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 菌種來(lái)源 收集河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院培養(yǎng)分離的白色念珠菌610株，其中2010年分離得到124株，標(biāo)本來(lái)自痰110株、尿液7株、咽拭子2株、血液3株、腹水1株、分泌物1株；2011年分離得到192株，標(biāo)本來(lái)自痰162株、尿液13株、血液9株、咽拭子2株、腹水2株、膿液2株及分泌物2株；2012年分離得到294株，標(biāo)本來(lái)自痰液235株、尿液26株、咽拭子18株、血液9株、膿液3株、腹水1株、分泌物2株。

1.2 方法 應(yīng)用真菌藥敏試驗(yàn)試劑盒，測(cè)定白色念珠菌對(duì)4種抗真菌藥物氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑、兩性霉素B的最低抑菌濃度(MIC)。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作，用無(wú)菌0.9%氯化鈉注射液將菌液調(diào)成約等于2 McFarland單位(與標(biāo)準(zhǔn)濁度管對(duì)比調(diào)整)；用加樣槍(滅菌吸嘴)吸取100 μL調(diào)好的菌液，加入培養(yǎng)基中充分混勻；每個(gè)藥敏孔加100 μL，35 ℃孵育24～48 h；取出后加顯色劑，肉眼觀察結(jié)果。耐藥孔無(wú)色，敏感孔紅色，以最后一個(gè)敏感孔為該藥物對(duì)該白色念珠菌的MIC。白色念珠菌藥物敏感試驗(yàn)判讀標(biāo)準(zhǔn)，見(jiàn)表1。

2 結(jié)果

白色念珠菌耐藥情況比較，見(jiàn)表2。

3 討論

白色念珠菌有較強(qiáng)的吸附能力，且表現(xiàn)為在酵母樣和芽管樣互相轉(zhuǎn)變的多態(tài)性能力，菌絲與牙管不易被吞噬細(xì)胞吞噬，從而使其毒性大大增強(qiáng)[6]，當(dāng)機(jī)體免疫力降低、體內(nèi)微生態(tài)失衡或抗生素的應(yīng)用造成菌群失調(diào)時(shí)，白色念珠菌可以引起播散甚至危及患者生命。組織分析顯示，白色念珠菌在抗生素治療期間并不能激發(fā)鼠科動(dòng)物腸道的明顯感染。在長(zhǎng)期頭孢哌酮治療期間細(xì)菌多樣性減弱了，但是在白色念珠菌存在時(shí)細(xì)菌分化增殖可以被恢復(fù)；頭孢哌酮減小了厚壁細(xì)菌的數(shù)量，但是白色念珠菌的存在增加了厚壁菌生成的恢復(fù)；同時(shí)，厚壁細(xì)菌的存在可以增強(qiáng)白色念珠菌感染的能力[7]。在G-細(xì)菌和白色念珠菌共生時(shí)，由細(xì)菌糖蛋白介導(dǎo)的iNKT細(xì)胞生成INF-γ減弱，白色念珠菌表現(xiàn)為酵母樣，中性粒細(xì)胞和吞噬細(xì)胞不能局部聚集，共生細(xì)菌惡化了白色念珠菌感染[8]。有研究發(fā)現(xiàn)，耐藥基因CDR1、CDR2、ERG11、CaMDR1和FLU1可能同時(shí)存在于大部分假絲酵母菌株內(nèi),造成念珠菌耐藥性增強(qiáng)[9]；同時(shí)，分子生物學(xué)也發(fā)現(xiàn)，CX3CR1等位基因CX3CR1-M280功能減弱與人體系統(tǒng)性念珠菌感染增加有關(guān)。功能正常的CX3CR1可以介導(dǎo)吞噬細(xì)胞功能，是機(jī)體早期的正常固有免疫所必需的，在人體抵抗念珠菌感染中起著重要的作用[10]。正是在這些機(jī)制的作用下，真菌中白色念珠菌感染始終處于較高水平。國(guó)外的一項(xiàng)研究[11]指出，白色念珠菌檢出率為6.1%；國(guó)內(nèi)研究[12]報(bào)道，白色念珠菌檢出率為10.5%。

白色念珠菌對(duì)唑類(lèi)藥物的耐藥率呈逐年升高趨勢(shì)，可能與白色念珠菌在臨床上預(yù)防性和經(jīng)驗(yàn)性大量應(yīng)用唑類(lèi)藥物有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，兩性霉素B、伏立康唑、伊曲康唑和氟康唑的3年總體耐藥率分別為4.8%、43.2%、53.4%、54.1%。Pfaller等[14]對(duì)34個(gè)國(guó)家98個(gè)實(shí)驗(yàn)室的2010年和2011年數(shù)據(jù)表明，白色念珠菌對(duì)幾種抗真菌藥物均有耐藥現(xiàn)象；白色念珠菌對(duì)于伏立康唑耐藥性較低為0.4%，對(duì)泊沙康唑(伊曲康唑)的耐藥率為4.4%，對(duì)阿尼芬凈和三唑藥物的耐藥率極低，發(fā)生耐藥的真菌菌株普遍存在fks基因變異。可見(jiàn)我國(guó)的真菌耐藥發(fā)生率較高，是否與fks基因變異有關(guān)尚待進(jìn)一步研究。

總之，白色念珠菌感染在臨床依然呈較高的發(fā)生率，其對(duì)于抗真菌藥物的耐藥性呈持續(xù)升高趨勢(shì)，臨床應(yīng)規(guī)范使用抗生素并密切觀察，減少真菌感染，提升患者生存質(zhì)量。

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耿玉蘭，E-mail: ylgeng123@163.com

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2014-06-24)