石建玲,段　戀,程　波,劉　珊,吳西釗,章方莉,權(quán)蘭菊,孫鎖柱

(中國人民解放軍第二炮兵總醫(yī)院，北京100088)

胃幽門螺桿菌感染與慢性胃炎病理變化的相關(guān)性分析

石建玲,段戀,程波,劉珊,吳西釗,章方莉,權(quán)蘭菊,孫鎖柱*

(中國人民解放軍第二炮兵總醫(yī)院，北京100088)

摘要：目的研究胃幽門螺桿菌感染與慢性胃炎的組織類型、炎癥活動程度、淋巴濾泡形成、腸化等病理變化的關(guān)系。方法對我院2012年至2013年期間行胃鏡檢查的435例患者標(biāo)本制成石蠟切片，顯微鏡下觀察慢性胃炎的組織類型、炎癥活動度、固有層淋巴濾泡形成、腸化等病理變化，同時提取DNA,用實(shí)時熒光定量PCR方法檢測有無HP感染。結(jié)果435例患者標(biāo)本中，HP陽性為137例，陽性率為31.5%；其中慢性萎縮性胃炎HP陽性率為40.5%，明顯高于HP陽性率為19.1%的慢性淺表性胃炎，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；HP陽性率隨炎癥活動度無、輕度、中度、重度依次增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；固有層淋巴濾泡形成時HP陽性率明顯高于無淋巴濾泡形成的標(biāo)本，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；腸上皮化生的有無與HP感染率無明顯相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)論HP的感染與慢性胃炎的組織類型、炎癥活動程度、淋巴濾泡形成等病理變化存在相關(guān)關(guān)系，當(dāng)存在上述病理改變時，應(yīng)高度警惕HP感染，及時進(jìn)行檢測和治療。

關(guān)鍵詞：幽門螺桿菌 慢性胃炎 炎癥活動程度 淋巴濾泡形成 腸化

(ChinJLabDiagn,2015,19:2069)

幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，HP)于1983年被澳大利亞學(xué)者沃倫(Warren)與馬歇爾(Marshal1)首次發(fā)現(xiàn)[1]，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)證明其是慢性胃炎、消化性潰瘍、胃癌的重要致病因子，已被國際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)列為Ⅰ類致癌物之一。本文采用實(shí)時熒光定量PCR方法對我院2012年5月至2013年4月期間435例胃鏡標(biāo)本進(jìn)行HP檢測,并結(jié)合活檢病理報告，對HP感染與慢性胃炎的類型、炎癥活動度、固有層淋巴濾泡形成、腸化等病理變化進(jìn)行回顧性統(tǒng)計分析，以探討HP感染與慢性胃炎的病理形態(tài)結(jié)構(gòu)有無相關(guān)性。

1材料與方法

1.1病例資料

2012年5月至2013年4月期間因上消化道癥狀來我院進(jìn)行胃鏡檢查的435例患者，其中男性247 例，女性 198例，年齡在18-87歲之間，性別、年齡差異無統(tǒng)計學(xué)意義。以上所有病例均未接受抗HP治療，無服用抗炎藥物史，取材以胃竇為主。

1.2病理變化的診斷

對所取的胃黏膜組織進(jìn)行固定、脫水、包埋、切片、染色，制成病理切片，由2名副高及以上職稱的病理診斷醫(yī)生共同在顯微鏡下確定其慢性胃炎的組織類型、炎癥活動度、固有層淋巴濾泡形成、腸化等病理變化。參照2000年5月中華醫(yī)學(xué)會消化分會慢性胃炎研討會制定的《全國慢性胃炎共識意見》，依據(jù)炎癥細(xì)胞的浸潤程度將胃黏膜炎癥活動程度分為無、輕、中、重度4級。

1.3HP感染的診斷

對包埋后的胃黏膜組織進(jìn)行DNA的提取，應(yīng)用實(shí)時熒光定量PCR法檢測HP的感染，以內(nèi)參基因βactin Ct值<30且HP鑒定基因的Ct值≤35并且擴(kuò)增曲線呈 “S”形為HP陽性的判定原則。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計和分析，兩樣本率及多個樣本率比較用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1HP感染與慢性胃炎組織類型的關(guān)系

435例標(biāo)本中有137例為HP陽性，陽性率為31.5%，其中慢性萎縮性胃炎陽性率為40.5%(102/252)，慢性淺表性胃炎陽性率為19.1%(35/183)，前者陽性率明顯高于后者，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=22.4，P<0.05)，表1。

2.2HP感染與慢性胃炎炎癥活動程度的關(guān)系

炎癥非活動、輕度活動、中度活動、重度活動的HP陽性率分別為11.9%(37/312)、78.6%(55/70)、83.3%(25/30)、87%(20/23)，陽性率依次升高，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=197.5，P<0.05)，表1。

2.3HP感染與慢性胃炎固有層淋巴濾泡形成的關(guān)系

有固有層淋巴濾泡形成的樣本的HP陽性率為91.3%(21/23)，無固有層淋巴濾泡形成的樣本的HP陽性率為25.7%(106/412)，前者明顯高于后者，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=45.3，P<0.05)，表1。

2.4HP感染與慢性胃炎腸上皮化生的關(guān)系

有腸上皮化生的樣本的HP陽性率為31.7%(45/142)，無腸上皮化生的樣本的HP陽性率為31.4%(92/293)，兩者相差不大，且差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.004，P>0.05)，表1。

表1　HP感染與慢性胃炎病理變化的比較

3討論

幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，HP)自1983年被澳大利亞學(xué)者沃倫(Warren)與馬歇爾(Marshal1)發(fā)現(xiàn)以來，國內(nèi)外對它的分子生物學(xué)、致病機(jī)制、流行病學(xué)、相關(guān)疾病等方面進(jìn)行了大量的研究[2-5]，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)也已經(jīng)證明，HP可以導(dǎo)致慢性胃炎、十二指腸腸炎、消化性潰瘍、胃癌、粘膜相關(guān)性淋巴瘤(MALT)等疾病的發(fā)生[6，7]。但HP感染患者的胃粘膜的表現(xiàn)卻存在較大差異，大部分表現(xiàn)為慢性胃炎，少數(shù)表現(xiàn)為胃癌和粘膜相關(guān)性淋巴瘤；即使同是慢性胃炎的表現(xiàn)，但他們的病理類型、炎癥活動程度、固有層淋巴濾泡形成、腸化形成等病理變化都具有較大差異。

流行病學(xué)研究表明HP是世界上感染率最高的細(xì)菌之一，其感染呈全球分布。其感染率也具有一定的地區(qū)差異性，相關(guān)調(diào)查資料[8]表明：在世界各地普通人群混合年齡組的檢出率從不到1%-79%不等，多數(shù)地區(qū)在40%左右。本文435例樣本中HP的感染率為31.5%，這與焦春花[9]等對江蘇南京地區(qū)2006年-2011年6年間106780例樣本的29.5%的感染率相差不大；卻明顯低于曹彬[10]等報道安徽銅陵市城區(qū)居民80.55%的HP血清陽性率，這可能與地區(qū)差異有關(guān)，安徽地區(qū)的感染率較高[11]。本研究顯示慢性萎縮性胃炎的HP陽性率(40.5%)明顯高于慢性淺表性胃炎的HP陽性率(19.1%)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。這表明HP感染可以促進(jìn)胃粘膜的萎縮。萎縮性胃炎表現(xiàn)為黏液腺體減少，被認(rèn)為與長期持續(xù)性慢性胃炎有關(guān)。胡品津等[12]認(rèn)為：早期根除HP 感染可預(yù)防萎縮性胃炎的形成。據(jù)國外報道[13]，由于HP毒性產(chǎn)物的表達(dá)和胃酸減少等因素HP感染者每年萎縮性胃炎的發(fā)生率為1%-3%。

HP是一種革蘭氏陰性細(xì)菌，其外膜成分脂多糖(LPS)可誘導(dǎo)單核/巨噬細(xì)胞分泌促炎癥介質(zhì)如TNF-α、IL-1、IL-6等[14]，促進(jìn)炎癥的發(fā)生。HP的鞭毛蛋白也有協(xié)同作用，可刺激單核巨噬細(xì)胞，并誘導(dǎo)細(xì)胞因子分泌[15]。本研究認(rèn)為HP的感染率隨炎癥活動程度的升高而升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。HP感染率與炎癥活動程度之間關(guān)系的文獻(xiàn)報道較少，王吉耀[16]等隨訪調(diào)查發(fā)現(xiàn)HP持續(xù)根除組第一年、第四年的慢性活動性胃炎比例均顯著減少，而HP持續(xù)未根除組第四年隨訪時活動性炎癥比例明顯增加。國外也有文獻(xiàn)報道[17]，根除HP能改善慢性胃炎患者的胃黏膜炎癥程度。HP存在于胃腔黏液內(nèi)，一部分附著在上皮細(xì)胞表面，一部分穿過上皮細(xì)胞進(jìn)入固有層，如果感染持續(xù)存在，則可導(dǎo)致固有層淋巴濾泡的形成。對成年人HP感染與固有層淋巴濾泡形成的關(guān)系報道也較少，我們調(diào)查發(fā)現(xiàn)HP感染率與固有層淋巴濾泡形成的有無也有重要關(guān)系，這與查健忠等[18]和Ba hu Mda G[19]對兒童HP的感染報道一致。

胃上皮發(fā)生類似腸上皮的改變即為腸化，腸化是一種很常見的胃粘膜病理類型，并可認(rèn)為是胃癌的“癌前病變”。HP感染與胃黏膜腸化的關(guān)系各家報道不一致。本次研究中，在有腸化和無腸化病理改變的兩組樣本的HP感染率相差不大，且差異無統(tǒng)計學(xué)意義，因此不能認(rèn)為HP的感染與腸化的有無是否存在相關(guān)性。胡曉立等[20]認(rèn)為HP感染與胃黏膜腸化呈正相關(guān)；陳曉宇等[21]認(rèn)為HP感染性胃炎的病理變化中腸化的發(fā)生率存在地理性差異，腸化的發(fā)生除受HP的感染影響外，可能還受種族、氣候、生活習(xí)慣等影響。

此外，本實(shí)驗(yàn)與以往研究的不同之處是采用了直接檢測HP核酸的實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)，該方法靈敏度高、特異性好、操作簡單，進(jìn)一步提高了結(jié)果的準(zhǔn)確性。該方法已廣泛應(yīng)用于多種微生物感染的檢測[22],國內(nèi)外亦有用該方法檢測HP的報道[23]。目前，臨床實(shí)驗(yàn)室檢測HP的方法有多種，主要包括侵襲性方法和非侵襲性方法。但每種方法都有一定的局限性。如W-S銀染法的敏感性有一定的限制，而且該方法受診斷醫(yī)生主觀因素的影響較大；快速尿素酶試驗(yàn)(RUT)法是臨床應(yīng)用最廣泛的幽門螺桿菌檢測方法之一，具有操作方便、檢測快速、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，但其檢測結(jié)果可能受多種因素影響，如患者的用藥史、胃鏡下取材部位、實(shí)驗(yàn)條件等均可能影響其檢測結(jié)果，其中影響最大的是用藥史；13C尿素呼氣試驗(yàn)(UBT)是一種非侵襲性的方法，詹德法等[24]研究發(fā)現(xiàn)UBT值難以判斷中度以上感染程度，能用UBT值預(yù)測胃炎程度僅為40%-50%，說明UBT值僅能反映尿素酶的活性。

總之，HP的感染與胃黏膜的病理變化存在密切關(guān)系，當(dāng)出現(xiàn)萎縮性改變、慢性胃炎活動性改變、固有層淋巴濾泡形成等病理改變時要高度警惕HP的感染，必要時進(jìn)行HP的檢測，防止病情進(jìn)一步發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

[1]張發(fā)云,楊真威,李國明，等.幽門螺桿菌與2005年諾貝爾醫(yī)學(xué)獎[J].生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展，2005,32(11).

[2]胡伏蓮．幽門螺桿菌研究從“認(rèn)識”到“再認(rèn)識”[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2006,86(38):2665.

[3]黃世桐,陳哲.幽門螺桿菌相關(guān)疾病的研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)信息,2011,24(11).

[4]中華醫(yī)學(xué)消化病學(xué)分會.幽門螺桿菌若干問題的共識意見[J].中華消化雜志,2000,20:117．

[5]趙亞軍,于學(xué)文.幽門螺桿茵與慢性胃炎相關(guān)性的研究明[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2009，47(18)：236.

[6]Axon AT.Helicobacter pylori infection[J].J Antimicrob Chemother,1993,32(Suppl A):61．

[7]Brooks DJ.The early diagnosis of Parkinson’S disease[J].Ann Neural,1998,44(3 Suppl 1):S10．

[8]胡伏蓮.幽門螺桿菌感染的流行病學(xué)[J].中國醫(yī)刊,2007,42(2):17．

[9]焦春花,林琳,陳曉星，等.有上消化道癥狀患者幽門螺桿菌感染情況分析及其與胃癌前病變的關(guān)系[J].江蘇醫(yī)藥,2012,38(24):2952.

[10]曹彬,楊文霞,朱琴芳,等.銅陵市城區(qū)人幽門螺桿菌感染流行病學(xué)調(diào)查[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2000,35(1):40.

[11]張萬岱,胡伏蓮,蕭樹東,等.中國自然人群幽門螺桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查[J].現(xiàn)代消化及介入診療,2010,l5(5):265．

[12]胡品津,王莉莉.幽門螺桿菌的根除與萎縮性胃炎形成和逆轉(zhuǎn)的動物實(shí)驗(yàn)研究[J].中華消化雜志,2000,20(3):155．

[13]Kuipers EJ,Klinkenberg·Knol E C,Vanden.broucke·Grauls CM,et al.Role of Helicobacter PYlorf in the pathogenesis of atrophic gastritis[J].Scand J Gastro.enterol Suppl,1997,223:28．

[14]Gobert AP,Bambou jc,Werts C,et al.Helicobacter pylori heat shock protein 60 mediates interleukin-6 production by macrophages via a toll-like receptor (TLR)-2,TLR-4and myeloid diferentiation factor 88-independent mechanism[J].J Biol Chem,2004,279(1):245.

[15]Pena JA，Versalovic J.Lactobacillus rhamnosus GG decreases TNF-α production in lipopolysaccharide-activated murine macrophages by a contact independent mechanism[J].Cell Microbiol,003,5(4):277.

[16]王吉耀,王瑞娟,徐永正,等.幽門螺桿菌感染對胃黏膜病理變化的影響[J].胃腸病學(xué),2003,8(1):25.

[17]Asaka M,Kato M,Kud0 M,et al.Relationship between Helicobacter pylori infection,atrophic gastritis and gastric carcinoma in a Japanese population[J].Eur J Crastroenterol Hepatol,1995,7(Suppl 1):S7．

[18]查健忠,戴星,李冰冰.兒童幽門螺桿菌感染與胃黏膜病理變化的關(guān)系[J].臨床兒科雜志,2010,28(1):54.

[19]Bahu Mda G,da Silveira TR,Maguilnick I,et al.Endoscopic nodular gastritis：an endoscopic indicat or of high—grade bacterial colonization and severe gastritis in children with Helicobacter pylori[J].J Pediatr Gastroenterol Nutr,2003,36(2):217.

[20]胡曉立,劉連沫,袁豐亮.老年人HP感染與胃黏膜腸上皮化生的相關(guān)性[J].黑龍江醫(yī)學(xué),2000,4:22.

[21]陳曉宇,施堯,彭延申,等.上海與阿姆斯特丹幽門螺桿菌感染性胃炎萎縮與腸化的對比研究[J].胃腸病學(xué),2000,5(1):42.

[22]羅煒,王慧,劉利冬,等.百日咳鮑特菌BP283基因的實(shí)時熒光定量PCR檢測方法的建立[J].山東醫(yī)藥雜志,2012,52(3):5.

[23]石建玲,程波,劉珊,等.基于TaqMan探針的幽門螺桿菌實(shí)時熒光定量PCR檢測方法的建立[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2013,17(6):986.

[24]詹德法,徐克成．C一尿素呼氣試驗(yàn)的臨床應(yīng)用價值及其影響因素[J]．世界華人消化雜志，2000，8(5).

The correlation analysis of helicobacter infection with chronic gastritisSHIJian-ling,DUANLian，CHENGBo,etal.(GeneralHospitaloftheSecondArtiuery,Beijing100088,China)

Abstract:ObjectiveTo research the relationship of stomach HP infection with gastritis type,inflammation activity,lymphoid follicle formation and intestinal metaplasia.Methodsobserve 435 cases gastroscope biopsy from 2012 to 2013 by microscope.Determin gastritis type,inflammation activity,lymphoid follicle formation and intestinal metaplasia.Extract DNA and detect HP with the real-time fluorescent quantitation PCR.ResultsIn 435 cases,137 cases were HP infection positive ,the positive ratio was 31.5%;Among the total ,the HP positive ratio of Chronic atrophic gastritis cases was 40.5%,of chronic superficial gastritis was 19.1%.The former is significantly higher than the latter(P<0.05);With the aggravation of inflammation the HP positive ratio become higher and higher significantly(P<0.05);HP positive ratio of lymphoid follicle formation cases are significantly higher than none lymphoid follicle formation ones(P<0.05).Intestinal metaplasia has no significant correlation with HP infection(P>0.05).ConclusionHP infection has significant correlation with Chronic gastritis type,inflammation activity and lymphoid follicle formation.If there are above-mentioned pathology change,we should be care the HP infection extraordinarily ,carry out detection and treatment.

Key words:Helicobacter pylori Chronic gastritis inflammation activity lymphoid follicle formation intestinal metaplasia

(收稿日期：2015-01-12)

作者簡介：石建玲，女，29歲，主管技師，研究方向：腫瘤分子病理。

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

中圖分類號：R573.2

文章編號：1007-4287(2015)12-2069-04

*通訊作者