董曉敏,蔣巧俐,吳建華
(武漢大學(xué)中南醫(yī)院1.骨科;2.藥學(xué)部,武漢 430071)
董曉敏1,蔣巧俐2,吳建華2
(武漢大學(xué)中南醫(yī)院1.骨科;2.藥學(xué)部,武漢 430071)
目的 評(píng)價(jià)多藥耐藥基因1(MDR1)C3435T多態(tài)性與癲患者耐藥性的關(guān)系。方法 全面檢索關(guān)于MDR1基因C3435T多態(tài)性與癲患者耐藥性的原始研究,將符合入選標(biāo)準(zhǔn)的研究納入,采用Meta分析方法對(duì)所納入的研究進(jìn)行綜合分析。結(jié)果 共納入非隨機(jī)對(duì)照研究15項(xiàng),其中耐藥組1 284例,控制組1 620例。未發(fā)現(xiàn)發(fā)表偏倚,異質(zhì)性檢驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)CC/(CT+TT)、CT/(CC+TT)和TT/(CC+CT)基因型研究中存在異質(zhì)性,故采用校正后的隨機(jī)效應(yīng)模型(D-L法)進(jìn)行數(shù)據(jù)合并。CC/(CT+TT)(OR:1.47,95%CI:0.98~2.22);CT/(CC+TT)(OR:0.84,95%CI:0.66~1.06);TT/(CC+CT)(OR:0.76,95%CI:0.50~1.17)。亞組分析顯示:成人CC/(CT+TT)(OR:1.73,95%CI:1.03~2.91);兒童CC/(CT+TT)(OR:0.91,95%CI:0.67~1.23);成人TT/(CC+CT)(OR:0.69,95%CI:0.40~1.20);兒童TT/(CC+CT)(OR:1.01,95%CI:0.60~1.71);成人CT/(CC+TT)(OR:0.76,95%CI:0.56~1.04);兒童CT/(CC+TT)(OR:1.11,95%CI:0.82~1.49),均P>0.05。結(jié)論 目前尚沒(méi)有充分的證據(jù)表明MDR1基因C3435T的基因型與癲耐藥性有關(guān)。
多藥耐藥基因;多態(tài)性,基因;耐藥;癲;Meta分析
由于這些AEDs有不同的作用機(jī)制,因此這種現(xiàn)象可能由非特異性機(jī)制所介導(dǎo)。多數(shù)AEDs是多藥耐藥基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)及其編碼產(chǎn)物 P-糖蛋白(P- glycoprotein,P-gp)的底物[1],而MDR1/ P-gp在腦組織尤其在血腦屏障的表達(dá)增強(qiáng),可將進(jìn)入腦實(shí)質(zhì)的AEDs泵出,導(dǎo)致進(jìn)入癲病灶部位AEDs的濃度降低,從而導(dǎo)致患者對(duì)AEDs產(chǎn)生耐藥性[2]。因此影響P-gp蛋白表達(dá)的因素可能與癲耐藥性產(chǎn)生有關(guān)。研究表明,MDR1基因單核苷酸多態(tài)性可能影響P-gp的表達(dá)及功能,其中外顯子26的C3435T位點(diǎn)的突變與P-gp的表達(dá)及活性有關(guān),所以MDRI基因C3435T單核苷酸多態(tài)性可能與癲耐藥有關(guān)[3-4]。目前國(guó)內(nèi)外已有多項(xiàng)關(guān)于MDR1基因C3435T多態(tài)性與癲耐藥相關(guān)性的研究,但其結(jié)論并不一致。筆者應(yīng)用Meta分析評(píng)價(jià)MDRI基因C3435T單核苷酸多態(tài)性與癲耐藥性的關(guān)系。
1.1 資料來(lái)源 在中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)(CNKI)、重慶維普數(shù)據(jù)庫(kù)、萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)以及優(yōu)秀碩博論文庫(kù),用“多藥耐藥基因1”“MDR1” “ABCB1” “基因多態(tài)性” “癲”作為題名或關(guān)鍵詞聯(lián)合檢索獲得全部有關(guān)MDR1與癲的中文文獻(xiàn);同時(shí)以“MDR1”“ABCB1”“epilepsy”“polymorphism”,作為關(guān)鍵詞聯(lián)合檢索PubMed和EMbase等數(shù)據(jù)庫(kù),獲得發(fā)表在外文期刊上的研究。并通過(guò)文獻(xiàn)追溯途徑收集關(guān)于MDR1基因多態(tài)性與癲耐藥性的相關(guān)研究。
1.2 文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn) ①2014年3月1日前在國(guó)內(nèi)外公開(kāi)發(fā)表的、并提供原始數(shù)據(jù)的有關(guān)中國(guó)人群MDR1基因C3435T多態(tài)性與癲耐藥性的相關(guān)研究,并且對(duì)照組為癲藥物控制組;② 直接或間接給出統(tǒng)計(jì)指標(biāo)比值比(odds ratio,OR)或率比(rate ratio,RR)及95%置信區(qū)間(confidence interval,CI),以及不同基因型的頻率分布資料;③剔除重復(fù)發(fā)表、重復(fù)收錄或資料雷同的研究;④觀察對(duì)象為中國(guó)漢族人群;⑤ 對(duì)所納入的文獻(xiàn)根據(jù)非隨機(jī)對(duì)照臨床試驗(yàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià),總分為12分,剔除評(píng)分低于4分的文獻(xiàn)。
1.3 數(shù)據(jù)提取與統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 ①由3人分別評(píng)價(jià)文獻(xiàn)的質(zhì)量。采用Stata12.0版統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。觀察指標(biāo)為MDR1基因C3435T 的CC基因型/(CT+TT)基因型、CT基因型/(CC+TT)基因型及TT基因型/(CT+CC)基因型的OR值及其95%CI;②運(yùn)用Begg’s檢驗(yàn)來(lái)評(píng)估發(fā)表偏倚。③根據(jù)各個(gè)研究的異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果,選用相應(yīng)的數(shù)據(jù)合并方法。如各研究結(jié)果間無(wú)異質(zhì)性,則采用Mantel-Haenszel固定效應(yīng)模型進(jìn)行數(shù)據(jù)合并,計(jì)算合并OR值及其95%CI;如研究結(jié)果間存在異質(zhì)性,則采用校正后的隨機(jī)效應(yīng)模型(D-L法)進(jìn)行數(shù)據(jù)合并,計(jì)算合并OR值及其95%CI。
2.1 文獻(xiàn)檢索入選結(jié)果 在本次研究中,共檢索出54篇有關(guān)于中國(guó)漢族人群MDR1多態(tài)性與癲耐藥性關(guān)系的文獻(xiàn)。其中20篇與所研究主題無(wú)關(guān)而剔除,1篇未提供癲藥物控制組的基因分型而剔除,15篇因CNKI和PubMed 重復(fù)收錄或資料雷同而剔除。在對(duì)Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)中發(fā)現(xiàn):有4項(xiàng)研究基因分布不符合Hardy-Weinberg平衡,并且該4項(xiàng)研究樣本量較小,并且未對(duì)此進(jìn)行必要的說(shuō)明及討論,并且文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)均低于4分,剔除。而KWAN等[5]的研究中,筆者發(fā)現(xiàn)其癲控制組基因分布不符合Hardy-Weinberg平衡(表1)。一般情況下在研究候選基因與復(fù)雜疾病的遺傳關(guān)聯(lián)研究當(dāng)中,常要求對(duì)照組符合Hardy-Weinberg平衡,否則會(huì)認(rèn)為其研究的樣本代表性差。KWAN等[5]的研究樣本量較大,且對(duì)控制組納入的人群要超過(guò)耐藥組的人群,而且KWAN等[5]對(duì)其研究對(duì)象采用3種方法檢測(cè)基因分型,因此筆者還是將其納入該次Meta的分析中。最后經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的篩選,共有15篇文獻(xiàn)進(jìn)入數(shù)據(jù)合并分析。15篇研究均為非隨機(jī)對(duì)照研究。共累積耐藥組1 284例,控制組1 620例。15篇研究的基本情況見(jiàn)表1。
2.2 發(fā)表偏倚評(píng)估 產(chǎn)生發(fā)表偏倚的主要原因是陽(yáng)性結(jié)果的研究易發(fā)表,陰性結(jié)果的研究不易發(fā)表或者研究者本身就放棄做進(jìn)一步研究,這可能導(dǎo)致部分陰性結(jié)果的研究未發(fā)表而最終對(duì)Meta分析的結(jié)果產(chǎn)生影響。為了客觀地評(píng)價(jià)有無(wú)發(fā)表性偏倚。Z=0.05(continuity corrected)、Pr >|Z|=1.000(continuity corrected),1.000>0.05故不能認(rèn)為有顯著性發(fā)表偏倚,因此納入的文獻(xiàn)可以進(jìn)行Meta分析(圖1)。
2.3 異質(zhì)性檢驗(yàn) CC/(CT+TT)研究中的χ2=81.83,P<0.001;成人χ2=65.7,P<0.001;兒童χ2=2.7,P>0.05;TT/(CC+CT)研究中的χ2=52.84,P<0.001,成人χ2=46.96,P<0.001;兒童χ2=4.29,P>0.05;CT/(CC+TT)研究中的χ2=31.75,P<0.001,成人χ2=26.33,P<0.001;兒童χ2=0.45,P>0.05;因此該項(xiàng)研究存在異質(zhì)性尤其來(lái)源于成人的相關(guān)研究。
2.4 數(shù)據(jù)合并 由于該項(xiàng)研究異質(zhì)性明顯,故采用校正后的隨機(jī)效應(yīng)模型(D-L法)進(jìn)行數(shù)據(jù)合并。CC/(CT+TT)基因型OR值為1.47,95%CI為0.98~2.22;TT/(CC+CT)基因型OR值為0.76,95%CI為0.50~1.17;CT/(CC+TT)基因型的OR值為0.84,95%CI為0.66~1.06。這3種基因型合并的OR值及其95%CI包含中線,均P>0.05,說(shuō)明OR值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖2~4)。因此尚不能認(rèn)為中國(guó)人群MDR1 C3435T基因型與癲耐藥性有關(guān)。亞組分析顯示:成人CC/(CT+TT)(OR:1.73,95%CI:1.03~2.91);兒童CC/(CT+TT)(OR:0.91,95%CI:0.67~1.23);成人TT/(CC+CT)(OR:0.69,95%CI:0.40~1.20);兒童TT/(CC+CT)(OR:1.01,95%CI:0.60~1.71);成人CT/(CC+TT)(OR:0.76,95%CI:0.56~1.04);兒童CT/(CC+TT)(OR:1.11,95%CI:0.82~1.49)。均P>0.05。因此MDR1 C3435T基因型與癲耐藥性無(wú)關(guān)(圖2~4)。
表1 入選的15篇研究的基本情況
圖1 兩組患者M(jìn)DR1基因C3435T CC基因型與(CT+TT)基因型比較的Begg漏斗圖
腦組織中過(guò)度表達(dá)有關(guān)。目前,對(duì)于MDR1基因多態(tài)性和P-gp的水平及功能之間的關(guān)系尚缺乏足夠的生物學(xué)證據(jù),多數(shù)研究認(rèn)為,定位在MDR1基因26號(hào)外顯子的C3435T位點(diǎn)的基因多態(tài)性與MDR1基因/P-gp蛋白的表達(dá)及功能有明顯的相關(guān)性[3]。因此推測(cè)該基因位點(diǎn)的多態(tài)性可能與癲耐藥性有關(guān)。但近年來(lái)有關(guān)于MDR1基因C3435T多態(tài)性與癲耐藥性研究結(jié)論迵異。因此筆者利用Meta 分析方法對(duì)中國(guó)漢族人群MDR1基因C3435T多態(tài)性與癲耐藥性做綜合定量評(píng)價(jià)。結(jié)果顯示在中國(guó)漢族人群中MDR1基因C3435T的多態(tài)性與癲耐藥性無(wú)關(guān)。
本研究存在非常明顯的異質(zhì)性。推測(cè)可能與以下幾個(gè)因素有關(guān):①研究對(duì)象差異明顯:有4項(xiàng)研究的對(duì)象為兒童癲患者[8-11],有1項(xiàng)研究的對(duì)象為顳葉性癲患者[12],這種各項(xiàng)研究間研究對(duì)象的差異,加大了各研究間的異質(zhì)性。因此筆者對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行了亞組分析,結(jié)果顯示:在中國(guó)漢族人群中無(wú)論是成人還是兒童MDR1 C3435T基因型與癲耐藥性無(wú)關(guān)。②癲耐藥組、控制組的標(biāo)準(zhǔn)不一:目前,國(guó)際上對(duì)耐藥性癲的定義尚無(wú)統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于耐藥性何時(shí)出現(xiàn),經(jīng)過(guò)多少種AEDs,發(fā)作頻率的界定,需要多長(zhǎng)時(shí)間才能確認(rèn)這種耐藥狀況是持續(xù)存在的過(guò)程等尚有爭(zhēng)議。從而導(dǎo)致納入的研究中受試個(gè)體很難保持同質(zhì)性。這進(jìn)一步加大了各研究間的異質(zhì)性。③MDR1基因分析方法:在納入的15項(xiàng)研究中有較多的研究沒(méi)有進(jìn)行基因分型確證試驗(yàn),因此可能存在基因分型錯(cuò)誤,而影響研究結(jié)果。
圖2 兩組患者M(jìn)DR1基因C3435T CC基因型與T等位基因攜帶者(CT+TT)比較的森林圖
圖3 兩組患者M(jìn)DR1基因C3435T TT基因型與C等位基因攜帶者(CC+CT)比較的森林圖
圖4 癲耐藥組和控制組MDR1基因C3435T CT基因型與(CC+TT)基因型比較的森林圖
綜上所述,由于本研究存在明顯的異質(zhì)性,且納入的樣本量較小,因此對(duì)本研究的結(jié)論應(yīng)謹(jǐn)慎對(duì)待。通過(guò)Meta分析發(fā)現(xiàn):①目前尚沒(méi)有充分的證據(jù)表明在中國(guó)人群中MDR1基因C3435T的基因型與癲耐藥性有關(guān)。②建議在該類(lèi)研究中應(yīng)增大樣本量,統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),盡可能消除偏差和混雜因素,同時(shí)進(jìn)一步提高實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的細(xì)致性和科學(xué)性,在此基礎(chǔ)上更新Meta分析才有可能得出較確切的結(jié)論。
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《醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)》對(duì)論文中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物描述的要求
根據(jù)國(guó)家科學(xué)技術(shù)部1988年頒布的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》和衛(wèi)生部1998年頒布的《醫(yī)學(xué)動(dòng)物管理實(shí)施細(xì)則》,《醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)》雜志對(duì)論文中有關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的描述,要求描述以下事項(xiàng):①品種、品系及亞系的確切名稱;②遺傳背景或其來(lái)源;③微生物檢測(cè)狀況;④性別、年齡、體質(zhì)量;⑤質(zhì)量等級(jí)及合格證書(shū)編號(hào);⑥飼養(yǎng)環(huán)境和實(shí)驗(yàn)環(huán)境(包括溫度、相對(duì)濕度、送風(fēng)、光照等條件,飼料、飲水等情況);⑦健康狀況;⑧對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的處理方式。
醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為四級(jí):一級(jí)為普通級(jí);二級(jí)為清潔級(jí);三級(jí)為無(wú)特定病原體(SPF)級(jí);四級(jí)為無(wú)菌級(jí)(包括悉生動(dòng)物)。
《醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)》編輯部
2014-07-04
2014-09-23
董曉敏(1987-),女,遼寧恒仁人,護(hù)師,學(xué)士,主要從事醫(yī)院護(hù)理研究。電話:027-67813116,E-mail:283463059@qq.com。
吳建華(1981-),男,安徽寧國(guó)人,主管藥師,碩士,主要從事臨床藥學(xué)研究。電話:027-67813199,E-mail:wujianhua122012@126.com。
R971.6;R969.3
B
1004-0781(2015)09-1234-05
10.3870/j.issn.1004-0781.2015.09.032