邱 芬,胡安華,田雪梅,古力巴哈提,阿斯木古麗,迪娜爾,文新貞 (.新疆伊犁州奎屯醫(yī)院輸血科,新疆 奎屯800;.新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院輸血科,新疆 烏魯木齊 80054;.新疆伊犁州友誼醫(yī)院輸血科,新疆 伊犁 85000)
新生兒溶血病(hemolytic disease of newborn,HDN)一般特指母嬰血型不合而引起的胎兒或新生兒免疫性溶血性疾病。在我國HDN中ABO血型系統(tǒng)較多,以母親為O型,子女為A型或B型的發(fā)病率為最高,檢測母親血清中有無IgG性質(zhì)的抗A(B)抗體及其效價,即可預(yù)測ABO系統(tǒng)HDN發(fā)生的可能性[1]。我們動態(tài)監(jiān)測464對O型孕婦(其丈夫非O型)產(chǎn)前IgG抗A(B)抗體檢測,探討其與HDN發(fā)生率的關(guān)系。
1.1 一般資料:2010年4月至2012年8月在我院定期產(chǎn)前檢查妊娠20周以上的O型RhD陽性血孕婦464例,年齡為20~43歲,按孕產(chǎn)次1次,多于1次分為兩組,首次妊娠253例(占54.5%),二次及以上妊娠211例(占45.5%),病例排除孕婦不規(guī)則抗體檢測陽性。其丈夫血型為A型186例、B型194例、AB型84例。在孕20周開始檢測血清中IgG抗A(B)的效價,以后每4周動態(tài)監(jiān)測一次。對孕婦所生的新生兒檢查ABO、RhD血型,并對有臨床HDN癥狀者檢測血清學3項(直接抗球蛋白試驗、血清游離抗體試驗及抗體釋放試驗)。
1.2 試劑及儀器:0.2 mol/L 2-巰基乙醇(2-M e)、抗-A、抗-B、抗-D、多特異性抗球蛋白試劑、反定型標準紅細胞(A、B、O)、抗體篩選紅細胞均為上海市血液生物醫(yī)藥有限責任公司提供。KA-2000型血庫專用離心機(日本KUBOTA公司),HHW.21-420型水浴恒溫箱(北京永光明有限公司)。
1.3 方法
1.3.1 孕婦血型抗體效價檢測:在O型孕婦(其丈夫非O型)妊娠20周開始進行孕婦IgG抗A(B)血型抗體效價、母體不規(guī)則抗體測定,以后每4周復(fù)檢一次;①效價檢測采用間接抗球蛋白試管法,將孕婦血清0.1 ml與等量2-Me應(yīng)用液混合放37℃ 水浴30 min,處理后的血清0.05 ml用生理鹽水倍比稀釋,加入孕婦丈夫3% ~5%紅細胞0.05 ml(丈夫為AB型的,同時做抗A和抗B,加對應(yīng)的反定型紅細胞)離心檢測其殘存鹽水效價,再放37℃水浴30 min后三洗加多特異性抗球蛋白試劑離心,檢測IgG效價。②不規(guī)則抗體篩查,操作按說明書進行。
1.3.2 新生兒血型血清學檢測:檢測O型血孕婦所分娩的新生兒ABO、RhD血型;新生兒溶血病血清學檢測 (直接抗人球蛋白試驗、游離抗體檢測、抗體釋放試驗)。按文獻[2]方法操作。
1.4 結(jié)果判定
1.4.1 IgG抗A(B)血型抗體效價:用肉眼觀察結(jié)果,IgG效價≥殘存鹽水效價2管為實驗有效,呈弱凝集反應(yīng)(±)第一管的最高稀釋倍數(shù)的倒數(shù)即為該抗體的效價。IgG抗A(B)效價<64者判斷為正常,≥64者為陽性。
1.4.2 ABO-HDN診斷標準[3]:ABO母嬰血型不合,結(jié)合臨床表現(xiàn),HDN三項檢查陽性,或直接抗球蛋白試驗(DAT)和紅細胞抗體釋放試驗其中一項陽性。
1.5 統(tǒng)計學分析:采用SPSS13.0進行統(tǒng)計學分析,組間比較采用t檢驗,率的比較采用χ2檢驗,P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。
2.1 不同孕次孕婦IgG抗A(B)效價與妊娠周數(shù)的關(guān)系:464例O型孕婦,按不同孕次分組,孕婦IgG抗A(B)效價與妊娠周數(shù)的關(guān)系見圖1。由圖1可以看出,隨著孕期的增加,抗體效價也隨著升高,孕1次組孕婦gG抗A(B)效價水平低于孕2次及以上組。在本研究對象中也有24例孕婦的抗體效價隨著孕期的增加而降低。
2.2 抗體效價升降與新生兒的關(guān)系:464例O型孕婦按不同孕次,將孕婦孕早期抗體效價與孕晚期的抗體效價作比較,孕1次組和孕2次以上組抗體效價升高2個及以上滴度,HDN發(fā)病率與抗體效價升高1個、相同組比較有顯著性差異(P<0.05)。孕婦抗體效價升降的滴度與HDN的關(guān)系見表1。
圖1 不同孕次孕婦IgG抗A(B)效價與妊娠周數(shù)的關(guān)系
表1 孕晚期較孕早期IgG抗A(B)抗體效價升降滴度與新生兒溶血的關(guān)系[例(%)]
2.3 孕婦抗體效價與HDN的關(guān)系:不同孕次O型孕婦孕晚期抗體效價與HDN的關(guān)系見表2。隨抗體效價的升高,HDN的發(fā)生率也升高,孕2次級以上組HDN的發(fā)生率高于孕1次組(P<0.05)。
表2 孕婦孕晚期IgG抗A(B)血型抗體效價與HDN的關(guān)系
本研究結(jié)果顯示,464例O型孕婦隨著孕期的增加,IgG抗-A(B)效價水平孕晚期較孕早期有所升高。這與文獻[4]報道的結(jié)果一致。有研究認為在孕早期,由于進入母體的胎兒紅細胞相對較少,所以母體產(chǎn)生抗體的量少,抗體效價低。隨著孕期的增加,由于絨毛膜的破裂,進入母體的胎兒紅細胞增加,不斷刺激母體,使母體產(chǎn)生抗體量增加,抗體效價升高[5]。當抗體的效價上升超過機體的保護機制時,導(dǎo)致HDN的發(fā)生。但從本研究中還可看出IgG抗-A(B)效價≥64的190例孕婦,分娩的新生兒發(fā)生 ABO-HDN的39例,占20.5%,多數(shù)抗體效價在較高水平的孕婦分娩的新生兒沒有發(fā)病,一般認為這可能與胎兒A、B抗原的強弱、血型物質(zhì)的含量、胎盤的屏障作用以及IgG亞類不同有關(guān)[6]。
將孕婦孕早期抗體效價與孕晚期的抗體效價作比較,在本研究中,抗體效價升高2滴度的孕婦所分娩的新生兒,HDN發(fā)生率為孕1次組25%和孕2次及以上組為37.5%,明顯高于抗體效價升高1個、相同組??梢姡性缙诘皆型砥贗gG抗A(B)效價升高2個滴度可以作為預(yù)測發(fā)生HDN的一個十分重要的指標。研究提示,隨抗體效價的升高,HDN的發(fā)生率也升高。孕2次及以上組抗體效價升高水平高于孕1次組,HDN發(fā)生率也高于孕1次組。
在本次研究中,也發(fā)現(xiàn)24例孕早期時的IgG效價就偏高,通過對癥治療,隨著孕期的增加,抗體效價逐漸下降。對孕婦所生產(chǎn)的新生兒進行跟蹤,均未發(fā)生HDN。是機體清除了抗體,還是治療控制了效價的升高,具體原因有待于進一步探討。
動態(tài)監(jiān)測孕婦血清IgG抗A(B)效價,結(jié)合孕婦孕次、抗體效價的高低,可以更加準確地預(yù)測HDN的發(fā)生,為臨床及早采取預(yù)防、治療措施,有效地降低HDN的發(fā)病率,提供依據(jù)。
[1] 劉達莊.免疫血液學[M].上海:上海科學技術(shù)出版社,2002:128-144.
[2] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜主編.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學出版社,2006:246-270.
[3] 金漢珍,黃德珉,官希吉,等.實用新生兒學[M].第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2005:531-550.
[4] 李 坤,李 琳.動態(tài)檢測“O”型孕婦血型抗體效價的臨床意義[J].吉林醫(yī)學,2011,32(13):2580.
[5] Mohamed H,Turner JN,Caggana M.Biochip forseparating fetal cells from maternal circulation[J].J Chromatogr A,2007,1162(2):187.
[6] 李 勇,楊貴貞:人類紅細胞血型學實用理論與實驗技術(shù)[M].北京:中國科學技術(shù)出版社,1999:175.