邱 芬，胡安華，田雪梅，古力巴哈提，阿斯木古麗，迪娜爾，文新貞 (.新疆伊犁州奎屯醫(yī)院輸血科，新疆 奎屯800;.新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院輸血科，新疆 烏魯木齊 80054;.新疆伊犁州友誼醫(yī)院輸血科，新疆 伊犁 85000)

新生兒溶血病(hemolytic disease of newborn，HDN)一般特指母嬰血型不合而引起的胎兒或新生兒免疫性溶血性疾病。在我國HDN中ABO血型系統(tǒng)較多，以母親為O型，子女為A型或B型的發(fā)病率為最高，檢測母親血清中有無IgG性質(zhì)的抗A(B)抗體及其效價，即可預測ABO系統(tǒng)HDN發(fā)生的可能性［1］。我們動態(tài)監(jiān)測464對O型孕婦(其丈夫非O型)產(chǎn)前IgG抗A(B)抗體檢測，探討其與HDN發(fā)生率的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料:2010年4月至2012年8月在我院定期產(chǎn)前檢查妊娠20周以上的O型RhD陽性血孕婦464例，年齡為20～43歲，按孕產(chǎn)次1次，多于1次分為兩組，首次妊娠253例(占54.5%)，二次及以上妊娠211例(占45.5%)，病例排除孕婦不規(guī)則抗體檢測陽性。其丈夫血型為A型186例、B型194例、AB型84例。在孕20周開始檢測血清中IgG抗A(B)的效價，以后每4周動態(tài)監(jiān)測一次。對孕婦所生的新生兒檢查ABO、RhD血型，并對有臨床HDN癥狀者檢測血清學3項(直接抗球蛋白試驗、血清游離抗體試驗及抗體釋放試驗)。

1.2 試劑及儀器:0.2 mol/L 2-巰基乙醇(2-M e)、抗-A、抗-B、抗-D、多特異性抗球蛋白試劑、反定型標準紅細胞(A、B、O)、抗體篩選紅細胞均為上海市血液生物醫(yī)藥有限責任公司提供。KA-2000型血庫專用離心機(日本KUBOTA公司)，HHW.21-420型水浴恒溫箱(北京永光明有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 孕婦血型抗體效價檢測:在O型孕婦(其丈夫非O型)妊娠20周開始進行孕婦IgG抗A(B)血型抗體效價、母體不規(guī)則抗體測定，以后每4周復檢一次;①效價檢測采用間接抗球蛋白試管法，將孕婦血清0.1 ml與等量2-Me應用液混合放37℃ 水浴30 min，處理后的血清0.05 ml用生理鹽水倍比稀釋，加入孕婦丈夫3% ～5%紅細胞0.05 ml(丈夫為AB型的，同時做抗A和抗B，加對應的反定型紅細胞)離心檢測其殘存鹽水效價，再放37℃水浴30 min后三洗加多特異性抗球蛋白試劑離心，檢測IgG效價。②不規(guī)則抗體篩查，操作按說明書進行。

1.3.2 新生兒血型血清學檢測:檢測O型血孕婦所分娩的新生兒ABO、RhD血型;新生兒溶血病血清學檢測 (直接抗人球蛋白試驗、游離抗體檢測、抗體釋放試驗)。按文獻［2］方法操作。

1.4 結果判定

1.4.1 IgG抗A(B)血型抗體效價:用肉眼觀察結果，IgG效價≥殘存鹽水效價2管為實驗有效，呈弱凝集反應(±)第一管的最高稀釋倍數(shù)的倒數(shù)即為該抗體的效價。IgG抗A(B)效價＜64者判斷為正常，≥64者為陽性。

1.4.2 ABO-HDN診斷標準［3］:ABO母嬰血型不合，結合臨床表現(xiàn)，HDN三項檢查陽性，或直接抗球蛋白試驗(DAT)和紅細胞抗體釋放試驗其中一項陽性。

1.5 統(tǒng)計學分析:采用SPSS13.0進行統(tǒng)計學分析，組間比較采用t檢驗，率的比較采用χ2檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 不同孕次孕婦IgG抗A(B)效價與妊娠周數(shù)的關系:464例O型孕婦，按不同孕次分組，孕婦IgG抗A(B)效價與妊娠周數(shù)的關系見圖1。由圖1可以看出，隨著孕期的增加，抗體效價也隨著升高，孕1次組孕婦gG抗A(B)效價水平低于孕2次及以上組。在本研究對象中也有24例孕婦的抗體效價隨著孕期的增加而降低。

2.2 抗體效價升降與新生兒的關系:464例O型孕婦按不同孕次，將孕婦孕早期抗體效價與孕晚期的抗體效價作比較，孕1次組和孕2次以上組抗體效價升高2個及以上滴度，HDN發(fā)病率與抗體效價升高1個、相同組比較有顯著性差異(P＜0.05)。孕婦抗體效價升降的滴度與HDN的關系見表1。

圖1 不同孕次孕婦IgG抗A(B)效價與妊娠周數(shù)的關系

表1 孕晚期較孕早期IgG抗A(B)抗體效價升降滴度與新生兒溶血的關系［例(%)］

2.3 孕婦抗體效價與HDN的關系:不同孕次O型孕婦孕晚期抗體效價與HDN的關系見表2。隨抗體效價的升高，HDN的發(fā)生率也升高，孕2次級以上組HDN的發(fā)生率高于孕1次組(P＜0.05)。

表2 孕婦孕晚期IgG抗A(B)血型抗體效價與HDN的關系

3 討論

本研究結果顯示，464例O型孕婦隨著孕期的增加，IgG抗-A(B)效價水平孕晚期較孕早期有所升高。這與文獻［4］報道的結果一致。有研究認為在孕早期，由于進入母體的胎兒紅細胞相對較少，所以母體產(chǎn)生抗體的量少，抗體效價低。隨著孕期的增加，由于絨毛膜的破裂，進入母體的胎兒紅細胞增加，不斷刺激母體，使母體產(chǎn)生抗體量增加，抗體效價升高［5］。當抗體的效價上升超過機體的保護機制時，導致HDN的發(fā)生。但從本研究中還可看出IgG抗-A(B)效價≥64的190例孕婦，分娩的新生兒發(fā)生 ABO-HDN的39例，占20.5%，多數(shù)抗體效價在較高水平的孕婦分娩的新生兒沒有發(fā)病，一般認為這可能與胎兒A、B抗原的強弱、血型物質(zhì)的含量、胎盤的屏障作用以及IgG亞類不同有關［6］。

將孕婦孕早期抗體效價與孕晚期的抗體效價作比較，在本研究中，抗體效價升高2滴度的孕婦所分娩的新生兒，HDN發(fā)生率為孕1次組25%和孕2次及以上組為37.5%，明顯高于抗體效價升高1個、相同組?？梢?，孕早期到孕晚期IgG抗A(B)效價升高2個滴度可以作為預測發(fā)生HDN的一個十分重要的指標。研究提示，隨抗體效價的升高，HDN的發(fā)生率也升高。孕2次及以上組抗體效價升高水平高于孕1次組，HDN發(fā)生率也高于孕1次組。

在本次研究中，也發(fā)現(xiàn)24例孕早期時的IgG效價就偏高，通過對癥治療，隨著孕期的增加，抗體效價逐漸下降。對孕婦所生產(chǎn)的新生兒進行跟蹤，均未發(fā)生HDN。是機體清除了抗體，還是治療控制了效價的升高，具體原因有待于進一步探討。

動態(tài)監(jiān)測孕婦血清IgG抗A(B)效價，結合孕婦孕次、抗體效價的高低，可以更加準確地預測HDN的發(fā)生，為臨床及早采取預防、治療措施，有效地降低HDN的發(fā)病率，提供依據(jù)。

［1］ 劉達莊.免疫血液學［M］.上海:上?？茖W技術出版社，2002:128-144.

［2］ 葉應嫵，王毓三，申子瑜主編.全國臨床檢驗操作規(guī)程［M］.第3版.南京:東南大學出版社，2006:246-270.

［3］ 金漢珍，黃德珉，官希吉，等.實用新生兒學［M］.第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2005:531-550.

［4］ 李 坤，李 琳.動態(tài)檢測“O”型孕婦血型抗體效價的臨床意義［J］.吉林醫(yī)學，2011，32(13):2580.

［5］ Mohamed H，Turner JN，Caggana M.Biochip forseparating fetal cells from maternal circulation［J］.J Chromatogr A，2007，1162(2):187.

［6］ 李 勇，楊貴貞:人類紅細胞血型學實用理論與實驗技術［M］.北京:中國科學技術出版社，1999:175.