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        五行音樂(lè)配合針刺干預(yù)抑郁模型SD大鼠行為學(xué)影響的研究

        2014-11-05 02:08:40北京中醫(yī)藥大學(xué)100029景泉?jiǎng)P蘇靖陳天帷王斐梁田
        首都食品與醫(yī)藥 2014年12期
        關(guān)鍵詞:糖水消耗量造模

        北京中醫(yī)藥大學(xué)(100029)景泉?jiǎng)P 蘇靖 陳天帷 王斐 梁田

        抑郁癥是情感性精神障礙的主要類型,是一種以顯著而持久的心境低落、思維遲鈍、語(yǔ)言行動(dòng)減少為主要特征的綜合征。抑郁癥是危害人類身心健康的常見(jiàn)病、多發(fā)病,是一個(gè)全球性的主要精神問(wèn)題[1],但流行病學(xué)資料顯示,其具有知曉率低、治療率低等特點(diǎn)。

        隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)逐步向生物—心理—社會(huì)醫(yī)學(xué)模式轉(zhuǎn)變,在天人相應(yīng)、整體觀念指導(dǎo)下的中醫(yī)療法的治療優(yōu)勢(shì)正越來(lái)越多的得到重視。抑郁癥是一種典型的生物、心理、社會(huì)等多種因素作用而致的疾病,因此單一作用、靶點(diǎn)明確的藥物治療不可避免的具有某些局限性。本實(shí)驗(yàn)觀察了在多靶點(diǎn)作用下的中醫(yī)五行音樂(lè)療法結(jié)合針刺治療對(duì)大鼠抑郁模型的行為學(xué)影響。

        1 材料與方法

        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 成年雄性SD大鼠,重170~200g,由北京中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供,清潔級(jí),40只。置于安靜、7:00~19:00光照、19:00~7:00黑暗的實(shí)驗(yàn)室中馴養(yǎng)1周,使其適應(yīng)環(huán)境后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

        1.2 分組 隨機(jī)分組,分別為空白對(duì)照組、抑郁模型組、針刺組、音樂(lè)組、針刺結(jié)合音樂(lè)組共5組,每組8只。

        1.3 模型制備 抑郁模型的建立:建立慢性輕度不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激抑郁模型。行為限制2h、4℃冰水游泳5min,禁食24h,禁水24h,夾尾1min,明暗顛倒24h,鼠籠傾斜45°24h,潮濕墊料10h,空瓶放置1h及45℃高溫5min等。將上述10種刺激隨機(jī)安排到21天內(nèi),每日1種刺激,每種刺激平均出現(xiàn)2次。同種刺激不連續(xù)出現(xiàn),以使動(dòng)物不能預(yù)料刺激的發(fā)生。

        1.4 操作方法 抑郁模型組停止刺激也不治療。其他各組進(jìn)行五行音樂(lè)配合針刺干預(yù)。針刺組每日針刺治療1次;音樂(lè)組每日聽(tīng)宮調(diào)式音樂(lè)“春之聲圓舞曲”、“藍(lán)色多瑙河”、“江南絲竹樂(lè)”各一遍;針刺結(jié)合音樂(lè)組,每日針刺與音樂(lè)治療一次。音樂(lè)治療時(shí),保證與其他組小鼠隔音的條件下進(jìn)行。治療階段共21天。

        1.5 穴位選取與針刺方法 參照全國(guó)針灸學(xué)會(huì)實(shí)驗(yàn)針灸研究會(huì)制定的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物針灸穴位圖譜》取穴。針刺取百會(huì)、神庭、內(nèi)關(guān)、三陰交。穴位常規(guī)消毒,選用1寸32號(hào)無(wú)菌一次性針灸針。百會(huì)向尾部斜刺,神庭向尾部斜刺,進(jìn)針深度約為2mm,內(nèi)關(guān)直刺1mm,三陰交直刺5mm,每穴行均勻捻轉(zhuǎn)刺激30s,留針10min。

        1.6 主要儀器 自制敞箱:本實(shí)驗(yàn)所用敞箱為立方形,高40cm,長(zhǎng)寬均為80cm,周壁底面為黑色,底面分成面積相等的25塊,由白線劃分:曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)攝像記錄設(shè)備;自制大鼠針刺固定板。

        1.7 觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法

        1.7.1 觀察各組大鼠一般狀態(tài) 每只動(dòng)物于造模前5h(時(shí)間A)、造模階段結(jié)束后5h(時(shí)間B)和治療階段結(jié)束后后5h(時(shí)間C)分別稱量體重,記錄進(jìn)食,精神狀況及進(jìn)行行為測(cè)定。

        1.7.2 open-field法測(cè)定行為 室內(nèi)隔音,記錄動(dòng)物行為,以動(dòng)物穿越底面塊數(shù)為水平運(yùn)動(dòng)得分,每塊計(jì)1分;大鼠后腿直立次數(shù),無(wú)論動(dòng)物站立多長(zhǎng)時(shí)間直至動(dòng)物雙足放下為1次活動(dòng),每次計(jì)1分,為垂直運(yùn)動(dòng)得分。每只動(dòng)物測(cè)定3次,每次測(cè)定3min。分別在時(shí)間A、時(shí)間B、時(shí)間C測(cè)定。

        附表1 各組大鼠造模及治療前后比較( ,單位:格,n=8/group)

        附表1 各組大鼠造模及治療前后比較( ,單位:格,n=8/group)

        注:與空白組比較★P<0.05,★★P<0.01;與抑郁組比較▲<0.05,▲▲P<0.01;與同組造模后比較◆P<0.05,◆◆P<0.01。

        項(xiàng)目 組別 時(shí)間A 時(shí)間B 時(shí)間C爬行格數(shù)空白對(duì)照組 48.4±6.34 43.5±3.23 47.7±5.76抑郁模型組 49.2±7.51 15.1±4.82★★◆◆ 17.25±3.96★◆◆音樂(lè)治療組 48.0±11.12 13.7±2.64★★◆◆ 26.1±8.87★◆◆針灸治療組 50.8±8.22 13.7±2.62★★◆◆ 31.3±9.98▲◆◆音樂(lè)針灸治療組 50.6±8.43 14.2±2.05★★◆◆ 50.3±13.1▲▲◆◆直立次數(shù)空白對(duì)照組 13.7±2.2 11.4±1.74 12.3±2.11抑郁模型組 12.1±3.03 3.0±1.85★★◆◆ 5.2±2.96★◆音樂(lè)治療組 11.3±3.1 2.6±1.43★★◆◆ 6.4±3.01★◆◆針灸治療組 14.3±2.6 2.8±1.81★★◆◆ 9.1±2.51▲◆◆音樂(lè)針灸治療組 13.3±2.11 2.9±1.91★★◆◆ 13.4±3.14▲▲◆◆

        附表2 各組大鼠24h糖水消耗量比較( ,單位:ml,n=8/group)

        附表2 各組大鼠24h糖水消耗量比較( ,單位:ml,n=8/group)

        注:與空白對(duì)照組比較★P<0.05,★★P<0.01;與抑郁組比較▲P<0.05,▲▲P<0.01;與同組造模后比較◆P<0.05,◆◆P<0.01。

        組別 時(shí)間A 時(shí)間B 時(shí)間C空白對(duì)照組 43.25±6.22 42.56±7.48 46.57±5.43抑郁模型組 45.70±5.67 13.13±3.46★★◆◆ 13.66±1.91★★◆◆音樂(lè)治療組 50.08±11.17 14.10±3.89★★◆◆ 24.30±3.05◆針灸治療組 49.21±9.23 11.12±1.27★★◆◆ 32.90±3.79▲◆音樂(lè)針灸治療組 41.45±10.76 13.96±2.89★★◆◆ 45.41±3.34▲▲◆◆

        1.7.3 糖水消耗實(shí)驗(yàn) 所有動(dòng)物均單籠飼養(yǎng),每只動(dòng)物提供1%蔗糖溶液130ml,同時(shí)所有動(dòng)物禁食,計(jì)算動(dòng)物24h飲用1%蔗糖溶液的量。分別在造模前、造模后和治療后測(cè)定大鼠糖水消耗量。

        1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)用SPSS20.0軟件統(tǒng)計(jì)包處理,以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間差異采用單因素方差分析,P<0.05為顯著性差異的標(biāo)準(zhǔn)。

        2 結(jié)果

        2.1 open-field實(shí)驗(yàn)分析(見(jiàn)附表1)

        2.1.1 造模前組間行為學(xué)差異比較 A時(shí)間點(diǎn)時(shí),造模前大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)得出的數(shù)據(jù)顯示各組爬行格數(shù)、直立次數(shù)均無(wú)明顯差異,說(shuō)明各組間大鼠活動(dòng)性及探究性行為表現(xiàn)均衡穩(wěn)定,來(lái)自同一整體,具有可比性。

        2.1.2 同組造模前/造模后行為學(xué)差異比較 B時(shí)間點(diǎn)時(shí),通過(guò)造??梢?jiàn)音樂(lè)治療組、針刺治療組、針刺結(jié)合音樂(lè)治療組小鼠與空白對(duì)照組相比均出現(xiàn)了顯著的水平運(yùn)動(dòng)與垂直運(yùn)動(dòng)下降,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),說(shuō)明造模成功。

        2.1.3 治療后組間行為學(xué)差異比較 C時(shí)間點(diǎn)時(shí),音樂(lè)治療組水平運(yùn)動(dòng)與垂直運(yùn)動(dòng)水平與抑郁組相比差異不明顯,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。針刺組水平運(yùn)動(dòng)與垂直運(yùn)動(dòng)水平與抑郁組相比均有升高,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。針刺結(jié)合音樂(lè)組在水平運(yùn)動(dòng)與垂直運(yùn)動(dòng)各水平上均與抑郁組存在明顯差異,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

        2.1.4 同組造模后/治療后行為學(xué)比較 C時(shí)間點(diǎn)時(shí),空白對(duì)照組情況一直穩(wěn)定,抑郁組水平運(yùn)動(dòng)與垂直運(yùn)動(dòng)水平均與造模后差異不大,音樂(lè)組水平運(yùn)動(dòng)與垂直運(yùn)動(dòng)水平均較造模后上升(P<0.05),數(shù)值高于抑郁組。針刺治療組水平運(yùn)動(dòng)與垂直運(yùn)動(dòng)水平均較造模后上升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。針刺結(jié)合治療組水平運(yùn)動(dòng)與垂直運(yùn)動(dòng)水平均較造模后有顯著回升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

        2.2 大鼠糖水消耗實(shí)驗(yàn)分析(見(jiàn)附表2)

        2.2.1 造模前各組間差異比較 A時(shí)間點(diǎn),造模前各組大鼠24h糖水消耗量無(wú)明顯差異,說(shuō)明來(lái)自同一整體,存在可比性。

        2.2.2 造模后/造模前大鼠24h糖水消耗比較 B時(shí)間點(diǎn),造模后各組大鼠與空白組大鼠比較糖水消耗量明顯下降(P<0.01),有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,說(shuō)明造模成功。

        2.2.3 治療后組間行為學(xué)差異 音樂(lè)治療組糖水消耗量與抑郁組相比有所上升,但差異不明顯。針刺組糖水消耗量與抑郁組相比上升明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。針刺結(jié)合音樂(lè)組糖水消耗量與抑郁組相比上升明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

        2.2.4 同組治療后/造模后差異比較 C時(shí)間點(diǎn),空白組實(shí)驗(yàn)全程糖水消耗量穩(wěn)定。抑郁組糖水消耗量較造模后無(wú)明顯差異(P>0.05),音樂(lè)治療組與造模后相比,糖水消耗上升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),針刺治療組糖水消耗量較造模后上升明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),針刺結(jié)合音樂(lè)治療組糖水消耗量較造模后上升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

        3 討論

        抑郁行為是由不可控制的負(fù)性事件所產(chǎn)生的。目前,抑郁動(dòng)物模型的建立方法主要分為三類:行為絕望、習(xí)得性無(wú)助和慢性溫和的不可預(yù)知性應(yīng)激[2]。慢性溫和應(yīng)激的抑郁動(dòng)物模型主要是將動(dòng)物長(zhǎng)時(shí)間的暴露在多種不可預(yù)知的應(yīng)激源下,由此引起動(dòng)物對(duì)獎(jiǎng)勵(lì)刺激的缺乏(主要是對(duì)可口的甜味溶液的消耗量降低,通常用糖精水)是抑郁的重要表現(xiàn)。慢性溫和應(yīng)激更真實(shí)的模擬了人們?cè)诂F(xiàn)實(shí)生活中遭遇的“困難”,動(dòng)物對(duì)甜溶液的飲用量降低反映了抑郁的核心癥狀,即快感缺乏,可認(rèn)為此應(yīng)激模型是一種有效的抑郁動(dòng)物模型。

        造模采用慢性應(yīng)激方法,造成動(dòng)物的抑郁狀態(tài),建立慢性輕度不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激抑郁模型。實(shí)驗(yàn)觀察到,在造模過(guò)程中,模型大鼠處于明顯的抑郁狀態(tài),可見(jiàn)精神萎靡、毛色晦滯、各種活動(dòng)減少,在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)水平活動(dòng)和垂直活動(dòng)次數(shù)明顯減少,糖水消耗量降低。

        在造模結(jié)束(造模21d)時(shí),各組大鼠的行為學(xué)表現(xiàn),規(guī)定時(shí)間內(nèi)的水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)得分明顯降低,體重增加減輕,糖水消耗量降低。與造模前相比,差異有非常顯著性意義(P<0.01),標(biāo)志模型復(fù)制成功。各治療組大鼠的體重、水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)、糖水消耗與對(duì)照組大鼠間的差異無(wú)顯著性意義(P>0.05),符合實(shí)驗(yàn)進(jìn)入治療階段的分組要求。

        研究表明,特定的針對(duì)個(gè)體需求的針對(duì)性音樂(lè)療法可達(dá)到較好的治療效果[3]。五行音樂(lè)療法恰恰具備這樣的特點(diǎn)。五聲音階與臟腑相應(yīng)是中國(guó)傳統(tǒng)音樂(lè)療法理論的核心思想?!饵S帝內(nèi)經(jīng)》中把五聲音階(宮、商、角、徵、羽)與人體的五臟(脾、肺、肝、心、腎)和五志(思、憂、怒、喜、恐)運(yùn)用陰陽(yáng)五行學(xué)說(shuō)有機(jī)地結(jié)合起來(lái)。用現(xiàn)代科學(xué)的語(yǔ)言來(lái)描述,就是說(shuō)五臟均具有一定的振動(dòng)頻率,而且這些頻率相應(yīng)于五聲音階的頻率[4]。 抑郁多與壓抑、挫折有關(guān),在五行中應(yīng)屬“土”[5]。宮調(diào)式樂(lè)曲悠揚(yáng)沉靜,能抒發(fā)情感,可使其從抑郁中解脫。

        針刺治療抑郁癥存在一定優(yōu)勢(shì)。相關(guān)研究表明,針刺穴位選取百會(huì)、神庭與四肢部腧穴內(nèi)關(guān)、三陰交結(jié)合,在改善抑郁癥行為學(xué)方面存在一定優(yōu)勢(shì),尤其是在治療的早中期[6]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,針刺組、音樂(lè)組、針刺結(jié)合音樂(lè)組在治療后抑郁狀態(tài)均有改善。針刺結(jié)合音樂(lè)組治療后基本恢復(fù)到造模前的狀態(tài),抑郁狀態(tài)改善明顯。曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)治療后針刺結(jié)合音樂(lè)治療組水平運(yùn)動(dòng)與垂直運(yùn)動(dòng)水平均較造模后有顯著回升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)且數(shù)值高于針刺組。針刺組、音樂(lè)組治療后與造模后存在差異(P<0.05)。表明音樂(lè)、針刺均對(duì)小鼠抑郁有療效,且針刺音樂(lè)雙靶點(diǎn)刺激療效優(yōu)于針刺或音樂(lè)單靶點(diǎn)刺激療效。針刺結(jié)合音樂(lè)治療組糖水消耗量較造模后上升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。表明治療對(duì)抑郁的核心癥狀改善有良好的效果。

        本研究結(jié)果顯示,五行音樂(lè)配合針刺對(duì)早期抑郁癥的治療有顯著效果,明顯優(yōu)于單一的針刺治療,有良好的應(yīng)用前景。

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