胡寶生
(河北省保定市第一醫(yī)院藥劑科,河北 保定 071000)
蒲公英(Taraxacum)具有清熱、消腫、散結(jié)、利尿通淋等功效,主要用于臨床治療乳瘡腫毒等病癥〔1〕。蒲公英主要成分包括甾醇、棕櫚酸和多糖,且多糖是其較為重要的信息分子,參與多種病理、生理過程,有著多種藥理活性〔2〕。疲勞是目前絕大多數(shù)工作人員較為普遍出現(xiàn)的一種病癥,長(zhǎng)期疲勞往往伴有器質(zhì)性病變,致使身體失衡、協(xié)調(diào)性變差,嚴(yán)重者會(huì)導(dǎo)致腦部血液供應(yīng)不足,出現(xiàn)記憶力下降、注意力不集中、反應(yīng)遲鈍、頭暈頭痛等,精神癥狀如憂郁、焦慮、煩躁、易激動(dòng)等也相繼出現(xiàn),致使入睡困難、睡眠不深、容易驚醒、失眠等。近年來,人們對(duì)蒲公英多糖的免疫、清除自由基等活性進(jìn)行了較多研究〔3,4〕。有文獻(xiàn)報(bào)道〔1〕,0.5 g/mg的蒲公英多糖對(duì)小鼠具有抗疲勞作用。本文分析蒲公英多糖對(duì)小鼠的抗疲勞作用。
1.1材料 昆明種健康小鼠40只,雄性,體質(zhì)量為18~22 g,由實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,動(dòng)物許可證號(hào):SCXK(粵)2008-0002。干品蒲公英購(gòu)于廣州市大藥房。
1.2主要儀器與試劑 分光光度計(jì)(上海美譜達(dá)儀器有限公司);臺(tái)式離心機(jī)(金壇市金南儀器制造有限公司);勻漿機(jī)(江蘇金壇市恒豐儀器制造有限公司);電子分析天平(昆山巨天儀器設(shè)備有限公司)。三氯乙酸、蒽酮、濃硫酸等購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,均為分析純。
1.3蒲公英多糖提取 將新鮮的蒲公英根洗凈約10 g,切成小片,迅速放入0.25%Na2SO3護(hù)色0.5 h。60℃干燥至恒質(zhì)量,粉碎機(jī)磨成粉末,過400目篩備用。取蒲公英粉末用濾紙包好,放入索式提取器,40℃石油醚回流脫脂3 h,并用80%乙醇回流,除去樣品中的單糖、寡糖以及其他小分子物質(zhì)。隨之沸騰水浴濃縮至100 ml,即每毫升溶液含生藥0.1 g,4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
1.4方法 取小鼠40只,1 w適應(yīng)期后按體質(zhì)量隨機(jī)分為四組,分籠飼養(yǎng)(每籠10只)。參照預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,100%與0%的致死量為實(shí)驗(yàn)的上下限劑量(Dmax和Dmin)分別為0和0.5 g/kg,所以選取0.1、0.3、0.5 g/kg作為本研究的低中高劑量。蒲公英多糖低、中、高劑量組給予相應(yīng)劑量的蒲公英多糖,灌胃,對(duì)照組給予等劑量生理鹽水,連續(xù)灌胃3 w,1次/d,每次20 ml/kg體質(zhì)量。于末次灌胃0.5 h后進(jìn)行各項(xiàng)抗疲勞指標(biāo)的測(cè)定。
1.5測(cè)試指標(biāo)與方法 (1)力竭游泳時(shí)間:小鼠尾系一質(zhì)量為小鼠體質(zhì)量5%的鉛塊,將小鼠置于水深30cm的游泳箱中,水溫控制在(30±3)℃。強(qiáng)迫小鼠游泳至力竭,記錄小鼠開始游泳至沉入水底8 s不動(dòng)的間隔時(shí)間。動(dòng)物服藥3 w后進(jìn)行試驗(yàn)。(2)血清尿素氮、乳酸、乳酸脫氫酶的測(cè)定:將小鼠不負(fù)重置于水深30 cm的恒溫游泳箱(廣州廣物實(shí)能機(jī)電設(shè)備有限公司)中,水溫控制在(30±3)℃。游泳1.5 h,休息0.5 h后立刻尾部采血1 ml,不加抗凝劑的情況下置4℃冰箱放置3 h,血凝固后離心取血清液(2 500 r/min離心15 min),參照文獻(xiàn)〔5〕利用分光光度計(jì)〔尼柯(上海)儀器有限公司〕測(cè)定血清尿素氮值、乳酸、乳酸脫氫酶。(3)肝糖原的測(cè)定:動(dòng)物服藥3 w后,于末次灌胃0.5 h后小鼠脫頸處死,取肝臟。參照文獻(xiàn)〔6〕采用分光光度計(jì)〔尼柯(上海)儀器有限公司〕蒽酮-濃硫酸法測(cè)定肝糖原含量。
2.1蒲公英多糖對(duì)小鼠力竭游泳時(shí)間的影響 蒲公英多糖低、中、高劑量組〔(83.03±11.20)、(93.44±10.75)、(94.97±10.92)min〕與對(duì)照組〔(70.20±10.23)min〕比較,均能顯著延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間,且中、高劑量組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
2.2蒲公英多糖對(duì)小鼠乳酸、乳酸脫氫酶的影響 蒲公英多糖低、中、高劑量組與對(duì)照組比較,均能顯著降低小鼠血清乳酸含量,升高乳酸脫氫酶活性,且中、高劑量組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。
表1 蒲公英多糖對(duì)小鼠乳酸及乳酸脫氫酶含量的影響±s,n=10)
2.3蒲公英多糖對(duì)小鼠血清尿素氮、肝糖原含量的影響 蒲公英多糖低、中、高劑量組與對(duì)照組比較,均能顯著降低血清尿素氮濃度,升高小鼠肝糖原含量,且中、高劑量組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。
表2 蒲公英多糖對(duì)小鼠血清尿素氮、肝糖原含量的影響±s,n=10)
疲勞是機(jī)體在一定環(huán)境條件下,長(zhǎng)時(shí)間或過于負(fù)重、緊張等所導(dǎo)致的工作效率暫時(shí)降低的一種生理心理癥狀〔7~9〕。疲勞的最直接和客觀的表現(xiàn)是運(yùn)動(dòng)耐力下降,而游泳屬全身消耗性運(yùn)動(dòng),游泳可在一定程度上消耗大量的能量和氧氣,同時(shí)在體內(nèi)可堆積大量的乳酸,力竭游泳時(shí)間可作為反映運(yùn)動(dòng)耐力的重要指標(biāo)而被應(yīng)用于各方面的檢驗(yàn)〔10〕。有報(bào)道顯示,乳酸、乳酸脫氫酶、肝糖原水平均可反映肌體的有氧代謝能力,可作為疲勞程度檢測(cè)的重要指標(biāo)。而抑制疲勞可通過機(jī)體更節(jié)省地利用糖原和三磷酸腺苷,而達(dá)到為肌肉活動(dòng)提供更充分的能量的目的。本研究提示中劑量蒲公英多糖可促進(jìn)機(jī)體對(duì)乳酸能力的清除,促進(jìn)肝糖原儲(chǔ)備,通過增加能量物質(zhì)的儲(chǔ)備,為機(jī)體提供更多的能量來增強(qiáng)小鼠抗疲勞的能力,效果與高劑量相當(dāng)。尿素氮是體內(nèi)氨基酸分解代謝的最終產(chǎn)物之一,血中尿素氮主要來源于肝臟,通過腎臟隨尿液排出〔11,12〕。有研究表明〔13,14〕,機(jī)體血清尿素氮含量會(huì)隨運(yùn)動(dòng)時(shí)間的延長(zhǎng)而有所增加,即血清尿素氮產(chǎn)生越多,身體抗疲勞性越差,血清尿酸氮的水平可反映機(jī)體抗疲勞的能力,本研究結(jié)果與上述報(bào)道一致。
綜上所述,蒲公英多糖可促進(jìn)機(jī)體對(duì)乳酸能力的清除,促進(jìn)肝糖原儲(chǔ)備,通過增加能量物質(zhì)的儲(chǔ)備,增強(qiáng)小鼠抗疲勞的能力。但其具體的作用機(jī)制尚無定論,劑量0.3 g/kg是否可作為最佳劑量來對(duì)抗疲勞,仍需要進(jìn)一步深入的研究。
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