呂丹 劉冠男

摘 要：高效液相色譜法作為藥物分析的常規(guī)方法應(yīng)用廣泛，本文對(duì)其在藥物含量測(cè)定及藥代動(dòng)力學(xué)研究上的應(yīng)用進(jìn)行綜述。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；藥物分析；研究；進(jìn)展

高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatogra

phy，HPLC） 是一項(xiàng)柱色譜分離技術(shù)，因分析速度快、分離效率高、檢測(cè)靈敏度高、檢測(cè)自動(dòng)化、適用范圍廣、組分易回收、樣品處理較簡(jiǎn)單等特點(diǎn)已廣泛應(yīng)用于各種藥物及其制劑的分析測(cè)定。隨著與質(zhì)譜、核磁共振波譜等的聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展，HPLC的應(yīng)用將愈加廣泛[1]。

一、高效液相色譜法作為藥物分析的常規(guī)方法在藥物分析中的應(yīng)用

高效液相色譜法作為藥物分析中的最主要的分析方法，常被作為常規(guī)分析和檢驗(yàn)方法[2]。近年來(lái)這個(gè)方面的研究較多，陳英紅等通過對(duì)人參糖肽注射液中多糖1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化，采用高效液相色譜法進(jìn)行組成糖分析，建立了人參糖肽注射液特征圖譜。該方法操作簡(jiǎn)便，分離度高，重復(fù)性及穩(wěn)定性良好，可有效控制人參糖肽注射液的質(zhì)量，同時(shí)可作為酸性雜多糖的測(cè)定方法。陳金泉等建立抗艾滋病藥物更昔洛韋、阿昔洛韋、噴昔洛韋和伐昔洛韋的HPLC快速檢測(cè)方法。采用同一色譜體系實(shí)現(xiàn)對(duì)四種藥物的分析，該檢測(cè)方法快速、簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確。這些研究充分利用了高效液相色譜操作簡(jiǎn)單，靈敏度高，回收率高的特點(diǎn)。

二、高效液相色譜在藥物分析測(cè)定中的研究進(jìn)展

高效液相色譜法是一種集分離和測(cè)定為一體的分析方法，其作為藥物分析中藥物鑒別、雜質(zhì)檢查及含量測(cè)定的重要方法。

（一）在鑒別中的應(yīng)用。HPLC用于藥物鑒別時(shí)，一般規(guī)定按供試品含量測(cè)定項(xiàng)下的高效液相色譜條件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。要求供試品和對(duì)照品色譜峰的保留時(shí)間一致。在HPLC法中，保留時(shí)間與組分的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)有關(guān)，是定性的參數(shù)。如頭抱拉定、頭孢噻酚鈉等頭孢類藥物以及地西泮注射液、曲安奈德注射液等多種藥物均采用HPLC法進(jìn)行鑒別。

（二）在有關(guān)物質(zhì)檢查中的應(yīng)用。目前藥品的有關(guān)物質(zhì)的檢查方法主要有薄層色譜法（TLC）、高效液相色譜法（HPLC）、氣相色譜法（GC）、紫外分光光度法（UV）及容量分析法等多種。近年來(lái)隨著儀器分析技術(shù)的發(fā)展，HPLC分離效果佳分離速度快的特點(diǎn)使其成為最主要的檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)的方法。

（三）在藥物（含中藥）成分含量測(cè)定上的應(yīng)用。在藥物分析中，高效液相色譜由于其專一性，靈敏度高，快速簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，廣泛的應(yīng)用于藥物分析中的定量分析，尤其在干擾因素較多的時(shí)候表現(xiàn)出更大的優(yōu)越性。中藥材及其制劑組成復(fù)雜，不少有效成分的含量測(cè)定也越來(lái)越多地采用了高效液相色譜法。李翔等建立高效液相色譜法測(cè)定麻杏口服液中鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量。該方法簡(jiǎn)便準(zhǔn)確，快速可靠，能夠用于麻杏口服液的含量測(cè)定和質(zhì)量控制。

（四）在藥物的質(zhì)量控制上的應(yīng)用。在早期各國(guó)的藥典中，藥品質(zhì)量多用化學(xué)分析方法來(lái)控制，該方法難以對(duì)藥品生產(chǎn)、儲(chǔ)存中產(chǎn)生的有關(guān)物質(zhì)、及微量雜質(zhì)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。隨著HPLC方法的發(fā)展，此類問題得到較好的解決。HPLC在止痛藥、抗生素、抗病毒藥、抗高血壓藥、抗抑郁藥、消化系統(tǒng)藥等藥物質(zhì)量控制中有著廣泛的應(yīng)用。如氨基糖苷類抗生素的結(jié)構(gòu)因缺少?gòu)?qiáng)紫外吸收基團(tuán)，故常用柱前或柱后衍生化來(lái)分析測(cè)定，但是這種方法前處理過于繁瑣，衍生過程可能導(dǎo)致樣品的降解，不適用于對(duì)相關(guān)物質(zhì)的控制，但利用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)的HPLC法控制氨基糖苷類抗生素的質(zhì)量可以得到滿意的結(jié)果。

三、高效液相色譜在藥物動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展

體內(nèi)樣品大多具有采樣量少，待測(cè)物濃度低，干擾物多等特點(diǎn)，基于這些特點(diǎn)HPLC特別適用于藥代動(dòng)力學(xué)研究與臨床藥物監(jiān)測(cè)體內(nèi)樣品中大多數(shù)小分子藥物及其特定代謝產(chǎn)物的測(cè)定。付洪瑜等建立了大鼠血漿中卡瓦內(nèi)酯麻醉椒苦素的液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用定量的分析方法，并用于大鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)研究。所建立的HPLC-MS/MS定量分析方法特異、快速、靈敏，可用于麻醉椒苦素臨床前藥物動(dòng)力學(xué)研究。戴青等建立測(cè)定人體血漿中氨磺必利高效液相色譜法，測(cè)定健康志愿者口服氨磺必利片48h內(nèi)血藥濃度，進(jìn)行藥動(dòng)學(xué)研究。本法簡(jiǎn)便、快速、經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確，可用于測(cè)定人血漿中氨磺必利的濃度及藥動(dòng)學(xué)研究。

四、展望

HPLC的出現(xiàn)為藥物分析的發(fā)展創(chuàng)造了新的契機(jī)，經(jīng)過近四十多年的發(fā)展，HPLC已經(jīng)成為一種廣泛應(yīng)用于藥物分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品檢驗(yàn)和法學(xué)檢驗(yàn)等領(lǐng)域的一種比較成熟而且具有巨大潛力的分析技術(shù)。隨著HPLC-MS聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用更加廣泛，無(wú)疑將進(jìn)一步促進(jìn)生命科學(xué)和藥學(xué)的研究和發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

[1] 李發(fā)美主編，分析化學(xué)[M].人民衛(wèi)生出版社，2007：385.

[2] 孫毓慶主編，現(xiàn)代色譜法及其在藥物分析中的應(yīng)用[M].科學(xué)出版社，2005.

[3] 陳英紅，羅浩銘，王穎，姜瑞芝.HPLC法建立人參糖肽注射液特征圖譜的研究[J].藥物分析雜志，2014，34（2）：360-363