王正軍　呂明

[摘 要] 目的：研究復(fù)方甲硝唑凝膠的體外釋放規(guī)律，建立其體外藥物釋放度分析方法。方法：采用體外溶出度試驗(yàn)以甲硝唑?yàn)楹繙y定指標(biāo)，分析復(fù)方甲硝唑凝膠中甲硝唑的累積溶出度。結(jié)果：復(fù)方甲硝唑凝膠30min釋藥累積溶出量為28.7%，其釋放過程符合對數(shù)正態(tài)分布模型。結(jié)論：該方法簡便、科學(xué)合理，可作為凝膠劑體外釋藥規(guī)律研究。

[關(guān)鍵詞] 復(fù)方甲硝唑凝膠；甲硝唑；體外釋放度；高效液相色譜

中圖分類號(hào)：R984 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：2095-5200（2014）03-078-02

[Abstract] Objective：Study in vitro release rate of Compound Metronidazole Gel， establish the method of determination in vitro release rate. Method：With Metronidazole as the standard， the in vitro release test applied to determine the accumulated dissolution rate of Metronidazole in Compound Metronidazole Gel. Result：The accumulated dissolution rate of the Compound Metronidazole Gel was over 28.7% in 30min， Metronidazole could be sustained released over 12 hours. The released rate of Compound Metronidazole Gel was best consistent with log-normal distribution equation. Conclusion：The method is simple， reasonable. It is suitable for determination of Compound Metronidazole Gel in vitro release.

[Key words] Compound Metronidazole Gel；Metronidazole；Release in vitro；HPLC

復(fù)方甲硝唑凝膠（Compound Metronidazole Gel）是我院在復(fù)方甲硝唑栓基礎(chǔ)上根據(jù)患者用藥需求研發(fā)一種制劑[1]。傳統(tǒng)栓劑易受體溫影響且無法持續(xù)恒定釋藥，栓劑融化后基質(zhì)呈液狀流出，造成對患者皮膚和衣物的污染。復(fù)方甲硝唑凝膠是由醋酸氯己定（chlorxidine acetate）、甲硝唑（2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇）、克霉唑（三苯甲咪唑）與卡波姆（丙烯酸鍵合烯丙基蔗糖或季戊四醇丙醚的高分子聚合物）等基質(zhì)輔料經(jīng)凝膠制備工藝制成的白色半透明固體水溶性凝膠，主要用于陰道霉菌感染。臨床用藥證實(shí)該凝膠能使藥物在人體部位的持續(xù)時(shí)間更長，能持續(xù)穩(wěn)定釋放藥物，生物利用度優(yōu)于陰道栓[2]。本研究在前期研究基礎(chǔ)上，采用高效液相色譜法，對本制劑進(jìn)行了藥物體外釋放度的考察，擬進(jìn)一步研究其釋藥規(guī)律。

1 儀器與試藥

U3000高效液相色譜儀（DAD紫外檢測器，自動(dòng)進(jìn)樣器，戴安公司）；DV215CD 型電子分析天平（OHAUS公司）；ZRS-8G型智能藥物溶出儀（天津大學(xué)無線電廠）；SK5200H超聲波清洗器（上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司）；PHS-3C型精密pH計(jì)（上海雷磁）；甲硝唑?qū)φ掌罚ㄖ袊称匪幤窓z定研究院，批號(hào)：0191 9804）；復(fù)方甲硝唑凝膠（自制，規(guī)格：5g/支，標(biāo)示量10.0mg·g-1）；復(fù)方甲硝唑栓（自制，規(guī)格：5g/支，標(biāo)示量10.0mg·g-1）；水為雙蒸水；其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件[3，4]

色譜柱：LUNA C18色譜柱（4.6mm×150mm，5?m）；流動(dòng)相：乙腈-三乙胺-水（70：0.5：30）；流速0.8mL·min-1；柱溫：30℃；檢測波長261nm；進(jìn)樣量10?L。甲硝唑色譜峰理論塔板數(shù)不小于2500，分離度良好。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取經(jīng)減壓干燥至恒重的甲硝唑?qū)φ掌愤m量，用流動(dòng)相稀釋并溶解，制成每1mL含甲硝唑1.86mg的溶液。

2.3 線性關(guān)系考察

精密吸取對照品溶液1、2、4、6、8、10mL，分別置10mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。按2.1色譜條件測定，其色譜圖如圖1所示。以甲硝唑濃度C為橫坐標(biāo)，甲硝唑色譜峰面積A為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：A=60.383C+2.1779，r=0.9998，表明甲硝唑在0.186～1.860mg·mL-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.4 精密度試驗(yàn)

取對照品溶液，按相同色譜條件連續(xù)測定5次，計(jì)算甲硝唑色譜峰面積RSD為1.62%，表明該方法精密度良好。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取2.6項(xiàng)下的供試品溶液，按同一色譜條件，在0、1、2、4、8、12h進(jìn)樣測定甲硝唑色譜峰面積，結(jié)果其RSD為1.83%，表明12h內(nèi)供試品溶液的穩(wěn)定性良好。

2.6 體外釋放度測定

參考相關(guān)文獻(xiàn)[5-8]，照《中國藥典》2010年版（二部）附錄ⅩC溶出度測定法項(xiàng)下操作[9]，以0.1mol·L-1 HCl 250mL作為介質(zhì)，溫度為37±0.5℃，轉(zhuǎn)速為60r·min-1。取復(fù)方甲硝唑凝膠6支，復(fù)方替硝唑栓6粒，投入不同燒杯，每隔一段時(shí)間吸取溶液5mL，并及時(shí)補(bǔ)充相同的等溫等體積空白介質(zhì)溶液。微孔濾膜濾過后，作為供試品溶液，進(jìn)樣10?L，測定峰面積。計(jì)算復(fù)方甲硝唑凝膠和復(fù)方甲硝唑栓各時(shí)間點(diǎn)甲硝唑累積釋放量，并對時(shí)間作圖，結(jié)果見圖2。endprint

根據(jù)釋放曲線，復(fù)方甲硝唑栓在1h內(nèi)就已全部釋放，而復(fù)方甲硝唑凝膠1h時(shí)藥物累積溶出量約為28.7%，并且12h后仍能釋藥。將復(fù)方硝唑水凝膠體外釋放曲線按Higuchi方程和對數(shù)正態(tài)分布函數(shù)進(jìn)行曲線擬合，結(jié)果見表1。復(fù)方甲硝唑凝膠藥物體外釋放符合對數(shù)正態(tài)分布模型，表明其具有良好的緩釋效果，可持續(xù)釋放藥物，符合臨床用藥需求。

Q：甲硝唑體外累積釋放量；t：甲硝唑體外釋放時(shí)間。

3 討論

3.1 由于臨床需要，復(fù)方甲硝唑凝膠中有其他藥物，在研究質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，已同時(shí)測定該兩種成分。本實(shí)驗(yàn)主要考察制劑的體外釋藥規(guī)律，故只以甲硝唑?yàn)橹笜?biāo)。選用0.1mol·L-1HCl作為溶出介質(zhì)，主要是考慮到女性陰道內(nèi)pH值呈酸性，使模擬體外釋藥環(huán)境更貼近真實(shí)體內(nèi)環(huán)境。

3.2 卡波姆是新型藥用輔料，為聚烷基蔗糖與丙烯交聯(lián)聚合物的共聚物，易溶于水，可形成酸性膠體。在pH 6-10時(shí)卡波姆凝膠粘度最大，對制劑特別是凝膠性能的改良，生物利用度的提高及藥物的緩釋等都有明顯作用。另外，泊洛沙姆（poloxamer，聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物，一種新型的高分子非離子表面活性劑）也為本凝膠的重要基質(zhì)，為溫度收縮型水凝膠的優(yōu)良基質(zhì)，當(dāng)泊洛沙姆與卡波姆比例一定時(shí)，其膠凝溫度控制在37℃ 以內(nèi)，在人體直腸或陰道給藥后很快發(fā)生膠凝，藥物和基質(zhì)不會(huì)從腔道內(nèi)遺漏出來[10]?？ú泛筒绰迳衬窡o致敏性、刺激性，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，廣泛用于口服、外用。復(fù)方甲硝唑水凝膠栓使用后陰道局部濃度高，臨床療效較好。

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 徐黎穎.高效液相色譜法測定甲硝唑片中甲硝唑含量的不確定度評定[J].首都醫(yī)藥，2013，20（12）：60-61.

[2] 盧毅，張彤，陶建生.卡波姆在藥劑學(xué)中的應(yīng)用[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2007，38（6）：457-460.

[3] 徐蓮琴，王玉華，鄭億，等.RP-HPLC法測定復(fù)方甲硝唑涂劑中甲硝唑和醋酸潑尼松的含量[J].中國藥房，2013，24（13）：1218-1219.

[4] 何心，石春偉，張闖，等.復(fù)方甲硝唑緩釋栓的制備及體外釋放度考察[J].中國藥房，2011，22（9）：834-836.

[5] 唐素芳.藥品溶出度測定中的影響因素分析[J].天津藥學(xué)，2009，21（1）：72-74.

[6] 謝沐風(fēng).溶出曲線相似性的評價(jià)方法[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2009，40（4）：308-311.

[7] 柯玲玲，游娟娟，唐直婕，等.阿霉素凝膠體外釋放度的測定[J].光譜實(shí)驗(yàn)室，2013，30（3）：1519-1522.

[8] 顧玲玲，李俊麗，劉小平，等.烏頭堿溫敏凝膠的制備及其體外評價(jià)[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2012，9（34）：115-117.

[9] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（二部部）[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：附錄75

[10] 周巧云，張朝暉，潘俊芳，等.泊洛沙姆為載體的疏水性藥物新劑型研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2011，28（4）：315-319.endprint

根據(jù)釋放曲線，復(fù)方甲硝唑栓在1h內(nèi)就已全部釋放，而復(fù)方甲硝唑凝膠1h時(shí)藥物累積溶出量約為28.7%，并且12h后仍能釋藥。將復(fù)方硝唑水凝膠體外釋放曲線按Higuchi方程和對數(shù)正態(tài)分布函數(shù)進(jìn)行曲線擬合，結(jié)果見表1。復(fù)方甲硝唑凝膠藥物體外釋放符合對數(shù)正態(tài)分布模型，表明其具有良好的緩釋效果，可持續(xù)釋放藥物，符合臨床用藥需求。

Q：甲硝唑體外累積釋放量；t：甲硝唑體外釋放時(shí)間。

3 討論

3.1 由于臨床需要，復(fù)方甲硝唑凝膠中有其他藥物，在研究質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，已同時(shí)測定該兩種成分。本實(shí)驗(yàn)主要考察制劑的體外釋藥規(guī)律，故只以甲硝唑?yàn)橹笜?biāo)。選用0.1mol·L-1HCl作為溶出介質(zhì)，主要是考慮到女性陰道內(nèi)pH值呈酸性，使模擬體外釋藥環(huán)境更貼近真實(shí)體內(nèi)環(huán)境。

3.2 卡波姆是新型藥用輔料，為聚烷基蔗糖與丙烯交聯(lián)聚合物的共聚物，易溶于水，可形成酸性膠體。在pH 6-10時(shí)卡波姆凝膠粘度最大，對制劑特別是凝膠性能的改良，生物利用度的提高及藥物的緩釋等都有明顯作用。另外，泊洛沙姆（poloxamer，聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物，一種新型的高分子非離子表面活性劑）也為本凝膠的重要基質(zhì)，為溫度收縮型水凝膠的優(yōu)良基質(zhì)，當(dāng)泊洛沙姆與卡波姆比例一定時(shí)，其膠凝溫度控制在37℃ 以內(nèi)，在人體直腸或陰道給藥后很快發(fā)生膠凝，藥物和基質(zhì)不會(huì)從腔道內(nèi)遺漏出來[10]?？ú泛筒绰迳衬窡o致敏性、刺激性，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，廣泛用于口服、外用。復(fù)方甲硝唑水凝膠栓使用后陰道局部濃度高，臨床療效較好。

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 徐黎穎.高效液相色譜法測定甲硝唑片中甲硝唑含量的不確定度評定[J].首都醫(yī)藥，2013，20（12）：60-61.

[2] 盧毅，張彤，陶建生.卡波姆在藥劑學(xué)中的應(yīng)用[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2007，38（6）：457-460.

[3] 徐蓮琴，王玉華，鄭億，等.RP-HPLC法測定復(fù)方甲硝唑涂劑中甲硝唑和醋酸潑尼松的含量[J].中國藥房，2013，24（13）：1218-1219.

[4] 何心，石春偉，張闖，等.復(fù)方甲硝唑緩釋栓的制備及體外釋放度考察[J].中國藥房，2011，22（9）：834-836.

[5] 唐素芳.藥品溶出度測定中的影響因素分析[J].天津藥學(xué)，2009，21（1）：72-74.

[6] 謝沐風(fēng).溶出曲線相似性的評價(jià)方法[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2009，40（4）：308-311.

[7] 柯玲玲，游娟娟，唐直婕，等.阿霉素凝膠體外釋放度的測定[J].光譜實(shí)驗(yàn)室，2013，30（3）：1519-1522.

[8] 顧玲玲，李俊麗，劉小平，等.烏頭堿溫敏凝膠的制備及其體外評價(jià)[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2012，9（34）：115-117.

[9] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（二部部）[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：附錄75

[10] 周巧云，張朝暉，潘俊芳，等.泊洛沙姆為載體的疏水性藥物新劑型研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2011，28（4）：315-319.endprint

根據(jù)釋放曲線，復(fù)方甲硝唑栓在1h內(nèi)就已全部釋放，而復(fù)方甲硝唑凝膠1h時(shí)藥物累積溶出量約為28.7%，并且12h后仍能釋藥。將復(fù)方硝唑水凝膠體外釋放曲線按Higuchi方程和對數(shù)正態(tài)分布函數(shù)進(jìn)行曲線擬合，結(jié)果見表1。復(fù)方甲硝唑凝膠藥物體外釋放符合對數(shù)正態(tài)分布模型，表明其具有良好的緩釋效果，可持續(xù)釋放藥物，符合臨床用藥需求。

Q：甲硝唑體外累積釋放量；t：甲硝唑體外釋放時(shí)間。

3 討論

3.1 由于臨床需要，復(fù)方甲硝唑凝膠中有其他藥物，在研究質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，已同時(shí)測定該兩種成分。本實(shí)驗(yàn)主要考察制劑的體外釋藥規(guī)律，故只以甲硝唑?yàn)橹笜?biāo)。選用0.1mol·L-1HCl作為溶出介質(zhì)，主要是考慮到女性陰道內(nèi)pH值呈酸性，使模擬體外釋藥環(huán)境更貼近真實(shí)體內(nèi)環(huán)境。

3.2 卡波姆是新型藥用輔料，為聚烷基蔗糖與丙烯交聯(lián)聚合物的共聚物，易溶于水，可形成酸性膠體。在pH 6-10時(shí)卡波姆凝膠粘度最大，對制劑特別是凝膠性能的改良，生物利用度的提高及藥物的緩釋等都有明顯作用。另外，泊洛沙姆（poloxamer，聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物，一種新型的高分子非離子表面活性劑）也為本凝膠的重要基質(zhì)，為溫度收縮型水凝膠的優(yōu)良基質(zhì)，當(dāng)泊洛沙姆與卡波姆比例一定時(shí)，其膠凝溫度控制在37℃ 以內(nèi)，在人體直腸或陰道給藥后很快發(fā)生膠凝，藥物和基質(zhì)不會(huì)從腔道內(nèi)遺漏出來[10]?？ú泛筒绰迳衬窡o致敏性、刺激性，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，廣泛用于口服、外用。復(fù)方甲硝唑水凝膠栓使用后陰道局部濃度高，臨床療效較好。

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 徐黎穎.高效液相色譜法測定甲硝唑片中甲硝唑含量的不確定度評定[J].首都醫(yī)藥，2013，20（12）：60-61.

[2] 盧毅，張彤，陶建生.卡波姆在藥劑學(xué)中的應(yīng)用[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2007，38（6）：457-460.

[3] 徐蓮琴，王玉華，鄭億，等.RP-HPLC法測定復(fù)方甲硝唑涂劑中甲硝唑和醋酸潑尼松的含量[J].中國藥房，2013，24（13）：1218-1219.

[4] 何心，石春偉，張闖，等.復(fù)方甲硝唑緩釋栓的制備及體外釋放度考察[J].中國藥房，2011，22（9）：834-836.

[5] 唐素芳.藥品溶出度測定中的影響因素分析[J].天津藥學(xué)，2009，21（1）：72-74.

[6] 謝沐風(fēng).溶出曲線相似性的評價(jià)方法[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2009，40（4）：308-311.

[7] 柯玲玲，游娟娟，唐直婕，等.阿霉素凝膠體外釋放度的測定[J].光譜實(shí)驗(yàn)室，2013，30（3）：1519-1522.

[8] 顧玲玲，李俊麗，劉小平，等.烏頭堿溫敏凝膠的制備及其體外評價(jià)[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2012，9（34）：115-117.

[9] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（二部部）[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：附錄75

[10] 周巧云，張朝暉，潘俊芳，等.泊洛沙姆為載體的疏水性藥物新劑型研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2011，28（4）：315-319.endprint