葛振民 馬樞 賈曉青

噪聲性聽(tīng)力損失(noise-induced hearing loss,NIHL)是指生產(chǎn)、生活以及軍事活動(dòng)中因接觸噪聲刺激所引起的感音神經(jīng)性聽(tīng)力減退，大量的研究發(fā)現(xiàn)氧化應(yīng)激是導(dǎo)致耳蝸毛細(xì)胞凋亡引起噪聲性聽(tīng)力損失發(fā)生的重要機(jī)制[1]，而且動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也已經(jīng)證實(shí)抗氧化劑，如：甲硫氨酸等，對(duì)噪聲性聽(tīng)力損失具有明確的保護(hù)作用[2，3]。本研究旨在探討口服甲硫氨酸片對(duì)健康成人噪聲性聽(tīng)力損失的保護(hù)作用。

1 資料與方法

1.1研究對(duì)象與分組 選擇解放軍某部健康男性軍人203名作為研究對(duì)象，年齡19～35歲，平均21.5±7.2歲，隨機(jī)分為試驗(yàn)組113例和對(duì)照組90例，既往均無(wú)明確噪聲接觸史，無(wú)聽(tīng)力減退、耳部疾病或其它影響聽(tīng)力的疾病(如高血壓、糖尿病、耳毒性藥物使用等)病史。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意，所有受試者于實(shí)驗(yàn)前均簽署了知情同意書。

1.2噪聲暴露及給藥方法 噪聲暴露條件：自動(dòng)武器實(shí)彈射擊訓(xùn)練，噪聲為脈沖噪聲，峰值160～170 dB SPL，連續(xù)暴露1.5小時(shí)。于噪聲接觸前3天，試驗(yàn)組給予甲硫氨酸片(成都利爾藥業(yè)有限公司，0.25 g×36片/盒)口服，750 mg/次，2次/日，對(duì)照組給予等量安慰劑(食用淀粉)口服，均連續(xù)服藥3天。

1.3聽(tīng)力檢測(cè)方法 兩組對(duì)象于噪聲暴露前、暴露后1、7天分別行純音聽(tīng)閾測(cè)試、ABR檢查。

1.3.1純音聽(tīng)閾測(cè)試 由同一名檢查者按GB規(guī)定的測(cè)試方法，對(duì)每位受試者進(jìn)行0.5、1.0、2.0、4.0 kHz頻率的常規(guī)純音聽(tīng)閾測(cè)試。儀器采用丹麥生產(chǎn)的MadsenOB 922型臨床聽(tīng)力計(jì)，測(cè)試在環(huán)境噪聲<25 dB A的隔聲室內(nèi)進(jìn)行。

1.3.2ABR檢測(cè) ABR測(cè)試儀器選用日本光電誘發(fā)電位儀，測(cè)試在隔聲屏蔽室進(jìn)行，記錄電極置于顱頂，參考電極置同側(cè)乳突處，前額發(fā)際接地。短聲刺激，帶通濾波100～3 000 Hz，分析時(shí)間10 ms，疊加1 000次；刺激強(qiáng)度從70 dB nHL開(kāi)始，以10 dB步距遞減，以能引出可重復(fù)波Ⅴ的最小刺激聲強(qiáng)作為ABR波Ⅴ反應(yīng)閾值，記錄ABRⅠ-Ⅴ波間期(Ⅰ-Ⅴ IPL)及波Ⅴ反應(yīng)閾。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有檢測(cè)結(jié)果使用SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。同組試驗(yàn)前后差異比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)分析，組間差異比較采用成組t檢驗(yàn)分析。

2 結(jié)果

兩組受試者噪聲暴露前、暴露后1、7天純音聽(tīng)閾見(jiàn)表1，ABR反應(yīng)閾及I-V波間期見(jiàn)表2。可見(jiàn)，噪聲暴露前兩組的純音聽(tīng)閾、ABR反應(yīng)閾及I-V波間期差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；噪聲暴露后1天(P<0.01)、7天(P<0.05)試驗(yàn)組純音聽(tīng)閾、ABR反應(yīng)閾及I-V波間期均低于對(duì)照組。與噪聲暴露前相比較，噪聲暴露后1天兩組純音聽(tīng)閾、ABR反應(yīng)閾及I-V波間期均升高(P<0.05或P<0.01)，試驗(yàn)組與對(duì)照組差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；噪聲暴露后7天試驗(yàn)組與暴露前無(wú)差異(P>0.05)，而對(duì)照組仍較暴露前升高(P<0.05)；對(duì)照組于噪聲暴露7天后按照噪聲性聾治療方案給予治療，遠(yuǎn)期(1年以上)隨訪，聽(tīng)力基本恢復(fù)正常。

表1 噪聲暴露前、后兩組受試者各頻率純音聽(tīng)閾比較

注：與對(duì)照組同頻率比較，*P<0.05，**P<0.01；與同組暴露前比較，△P<0.05，△△P<0.01

表2 噪聲暴露前、后兩組受試者ABR反應(yīng)閾和I-V波間期(ms)比較

注：與試驗(yàn)組同時(shí)間點(diǎn)比較，★P<0.05，▲P<0.01；與同組暴露前比較，※P<0.05，◆P<0.01

3 討論

噪聲暴露后多種機(jī)制參與噪聲性聽(tīng)力損失的發(fā)生，包括耳蝸血流減少、谷氨酸的興奮毒性、鈣離子平衡改變及氧化應(yīng)激等[4]，其主要表現(xiàn)為聽(tīng)敏度下降和聽(tīng)閾改變。噪聲暴露可引起耳蝸血流的劇烈變化和高代謝活動(dòng)，產(chǎn)生過(guò)多的活性氧和活性氮等自由基，超過(guò)了細(xì)胞抗氧化系統(tǒng)的清除能力，蓄積的活性氧和活性氮等自由基損害DNA、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)，從而引起耳蝸細(xì)胞的壞死或凋亡[5]。同時(shí)，許多研究已經(jīng)證實(shí)使用抗氧化劑能夠調(diào)節(jié)耳蝸抗氧化狀態(tài)，減輕噪聲性聽(tīng)力損失和耳蝸毛細(xì)胞損傷，具有保護(hù)聽(tīng)力的作用[4，6～8]，故本研究探討口服甲硫氨酸片對(duì)噪聲性聽(tīng)力損失的預(yù)防作用。

甲硫氨酸為氨基酸類藥，是體內(nèi)膽堿生物合成的甲基供體，其釋放出活性甲基，阻斷自由基的連鎖反應(yīng)，保護(hù)抗氧化酶的活性，同時(shí)還能夠增加還原型谷胱甘肽的活性，增加機(jī)體抗氧化能力，通過(guò)抗氧化機(jī)制可發(fā)揮預(yù)防噪聲性聾的作用[2]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)甲硫氨酸對(duì)噪聲、順鉑和氨基糖苷類藥物引起的聽(tīng)力減退具有保護(hù)作用，Kopke等[9]利用沙鼠研究發(fā)現(xiàn)噪聲暴露前、后或暴露后7小時(shí)靜脈使用甲硫氨酸可減輕永久性閾移和耳蝸外毛細(xì)胞死亡；許多研究者將其應(yīng)用于小鼠、豚鼠噪聲性聽(tīng)力損失的研究也得到了相同的結(jié)果[ 10]。從本研究結(jié)果看，噪聲暴露前3天給予甲硫氨酸片口服，能有效減輕噪聲暴露對(duì)聽(tīng)力的損傷，且噪聲暴露后7天，試驗(yàn)組的純音聽(tīng)閾及ABR反應(yīng)閾仍低于對(duì)照組(P<0.05或P<0.01)，提示甲硫氨酸對(duì)聽(tīng)力的保護(hù)作用在停止用藥后仍可持續(xù)一段時(shí)間，與Alexander等[11]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。推測(cè)甲硫氨酸可能通過(guò)直接清除自由基，保持過(guò)氧化氫酶、谷胱甘肽還原酶、超氧化物歧化酶的水平，阻止耳蝸細(xì)胞凋亡，從而預(yù)防噪聲性聽(tīng)力損失的發(fā)生。

前期研究證實(shí)N-乙酰半胱氨酸作為還原型谷胱甘肽補(bǔ)充物前體能夠減輕噪聲對(duì)聽(tīng)力的損傷[7]，驗(yàn)證了還原型谷胱甘肽參與噪聲性暫時(shí)性閾移主要的細(xì)胞內(nèi)抗氧化途徑；Yamasoba等[12]研究發(fā)現(xiàn)噪聲暴露能夠改變耳蝸還原型和氧化型谷胱甘肽的比例，氧化型谷胱甘肽增加，還原型谷胱甘肽減少，而前者參與活性氧引起的耳蝸細(xì)胞損傷；Campbell[13]、Grondin[14]等研究證實(shí)甲硫氨酸能減輕順鉑引起的谷胱甘肽還原酶活性降低，預(yù)防順鉑對(duì)聽(tīng)力的損傷；本研究發(fā)現(xiàn)預(yù)服甲硫氨酸片在噪聲暴露后7天其仍具有聽(tīng)力保護(hù)作用，推測(cè)甲硫氨酸也可能通過(guò)后期修飾，硫化為半胱氨酸的中間物腺苷甲硫氨酸，增加還原型谷胱甘肽水平而發(fā)揮抗氧化作用，從而減輕噪聲對(duì)聽(tīng)力的損傷。

目前，已經(jīng)開(kāi)始了幾種抗氧化劑預(yù)防噪聲性聾的臨床試驗(yàn)，包括甲硫氨酸、維生素A、C、E和鎂劑，N-乙酰半胱氨酸以及依布硒[10]，本研究證實(shí)噪聲暴露前口服甲硫氨酸片可一定程度地減輕噪聲性聽(tīng)力損失的發(fā)生，但噪聲暴露前口服甲硫氨酸的最佳使用時(shí)機(jī)還需要進(jìn)一步探討。

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