鄭麗萍，蔡仲仁，蔡麗琴

（1.坪山新區(qū)婦幼保健院兒科，廣東 深圳 518122；2.深圳市龍崗區(qū)橫崗人民醫(yī)院檢驗科，廣東 深圳 518033；3.深圳市西麗人民醫(yī)院檢驗科，廣東 深圳 518052）

原發(fā)性腎病綜合征患兒尿白細胞介素-8的檢測及其臨床意義

鄭麗萍1，蔡仲仁2，蔡麗琴3

（1.坪山新區(qū)婦幼保健院兒科，廣東 深圳 518122；2.深圳市龍崗區(qū)橫崗人民醫(yī)院檢驗科，廣東 深圳 518033；3.深圳市西麗人民醫(yī)院檢驗科，廣東 深圳 518052）

目的探討檢測尿白細胞介素-8(IL-8)對原發(fā)性腎病綜合征(PNS)患兒的臨床意義。方法選取40例原發(fā)性腎病綜合征患兒為觀察組，同期于我院行健康體檢的40例兒童為對照組。檢測并比較兩組尿白細胞介素-8水平、尿白細胞介素-6、血漿白蛋白、24 h尿蛋白含量以及T淋巴細胞亞群的變化等。結果(1)觀察組患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、NK比例均顯著低于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。(2)觀察組尿IL-8水平[(5.83±2.15)pg/ml]、IL-6水平[(266.45±54.38)ng/ml]均顯著高于對照組的[(2.56±1.24)pg/ml、(107.23±45.15)ng/ml]，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。(3)尿IL-8與24 h尿蛋白含量間存在正相關性（r=0.715，P＜0.05）。結論原發(fā)性腎病綜合征患者存在細胞及體液免疫功能紊亂，尿IL-6、IL-8水平檢測可作為PNS患兒診斷及療效判斷的參考指標之一。

白細胞介素-8；腎病綜合征；強的松；腎臟

原發(fā)性腎病綜合征(PNS)是一組以大量蛋白尿、低蛋白血癥、高脂血癥及不同程度水腫為表現的臨床癥候群。在小兒腎小球疾病中發(fā)病率僅次于急性腎炎居第二位，是常見的小兒腎臟疾病。關于其發(fā)病機制尚不明確，近年來研究認為其發(fā)病與多種炎癥細胞因子介導的T細胞免疫功能紊亂有關[1-3]。本文旨在探討檢測尿白細胞介素-8在原發(fā)性腎病綜合征患兒中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年1月至2012年1月期間在我院確診為原發(fā)性腎病綜合征并符合以下納入和排除標準的患兒40例作為觀察組，其中男性24例，女性16例，年齡1歲6個月～13歲，平均(6.5±3.2)歲。納入標準：(1)診斷符合中華醫(yī)學會兒科學分會腎臟病學組珠海會議制訂的《小兒腎小球疾病的臨床分類、診斷及治療》[4]；(2)近3個月內無使用激素；(3)無呼吸道、消化道、皮膚等部位感染；(4)臨床資料完整。排除標準：繼發(fā)性腎病綜合征、遺傳性疾病家族史、急性感染性疾病及其他合并癥。選取同期于我院行健康體檢的40例兒童為對照組。其中男性22例，女性18例，年齡1歲3個月～13歲，平均5.1歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，具有可比性。所有入組患者均按照知情、同意、自愿原則，簽署入組知情同意書。

1.2 觀察指標 所有入組患者的尿白細胞介素-8(IL-8)水平、尿白細胞介素-6(IL-6)、血漿白蛋白、24 h尿蛋白含量以及外周血T淋巴細胞亞群變化。

1.3 檢測方法

1.3.1 白細胞介素-8、白細胞介素-6水平的檢測 留取清晨中段尿，以離心機離心，取其上清液，放于-80℃冰箱保存待測白細胞介素-8。檢測方法采用雙抗體夾心ELISA法。

1.3.2 24h尿蛋白及血清白蛋白檢測 24 h尿蛋白定量采用雙縮脲比色法。血清白蛋白檢測采用日立7170全自動生化分析儀，試劑由北京中生生物工程高技術公司提供。

1.3.3 外周血T淋巴細胞亞群和自然殺傷細胞(NKC)活性檢測 采用直接免疫熒光染色法，取100 μl靜脈肝素抗凝血，分別加入20 μl熒光標記的抗單克隆抗體(美國BD公司產品)，混勻后置暗室，在室溫(18℃～20℃)下孵育20 min，加入溶血劑1 ml，充分混勻，待紅細胞完全溶解后置流式細胞儀(由美國BD公司提供)檢測。

1.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件包進行數據分析，計量數據采用均數±標準差()表示，計數資料采用例(%)表示，兩獨立樣本計量資料組間比較采用兩獨立樣本t檢驗，兩樣本計數資料的組間比較采用χ2檢驗；相關性采用直線回歸及相關分析法，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 外周血T淋巴細胞亞群檢測結果 觀察組患者CD3+比例與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；觀察組患者/、NK比例均顯著低于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 外周血T淋巴細胞亞群檢測結果[，%]

表1 外周血T淋巴細胞亞群檢測結果[，%]

觀察組對照組t值P值40 40 54.82±12.31 57.74±10.79 0.75 0.68 26.89±9.08 38.31±6.95 14.64 0.00 32.58±9.04 24.82±5.54 5.73 0.01 0.88±0.35 1.58±0.29 12.03 0.00 9.61±6.45 14.83±4.16 7.41 0.00

2.2 尿IL-8、IL-6水平比較 觀察組尿IL-8水平和IL-6水平顯著高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表2。

2.3 血漿白蛋白、24 h尿蛋白含量及尿IL-8的變化 觀察組患者血漿白蛋白水平顯著低于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；觀察組患者24 h尿蛋白含量顯著高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表3。

表2 兩組患兒尿IL-8、IL-6水平比較()，ng/ml)

表2 兩組患兒尿IL-8、IL-6水平比較()，ng/ml)

觀察組對照組t值P值40 40 5.83±2.15 2.56±0.24 38.91 0.00 266.45±54.38 107.23±45.15 36.11 0.00

表3 血漿白蛋白、24 h尿蛋白含量的比較（x±s）

2.4 尿IL-8與24 h尿蛋白含量相關性的比較 兩者之間存在正相關性(r=0.715，P＜0.05)。

3 討 論

原發(fā)性腎病綜合征是臨床上常見的疾病之一，其發(fā)病機制尚不明確。目前有研究認為T和(或)B細胞介導的免疫功能紊亂可能與其發(fā)病有關，其中T細胞亞群功能紊亂尤其是Th1/Th2比例失調是目前公認的發(fā)病原因之一。Th1細胞主要參與細胞免疫反應，Th2細胞主要參與體液免疫反應。研究發(fā)現，PNS患者存在體液免疫及細胞免疫功能的紊亂，如體液免疫指標的改變、T細胞數量的改變及T細胞亞群間的比例失調[5]。Begga等[6]研究發(fā)現NS患兒腎組織中Th2和Thl表達水平升高，且分泌不同程度的細胞因子；研究認為Thl、Th2參與腎小球疾病的發(fā)病。是輔助T淋巴細胞的標志，具有增強免疫反應的作用；是抑制殺傷性T淋巴細胞的標志，具有免疫抑制作用；比值是反映免疫調節(jié)狀態(tài)的重要標志。當T淋巴細胞亞數量和功能發(fā)生異常時能導致免疫紊亂并產生病變。本研究中，觀察組患者CD4+、、/、NK比例均顯著低于對照組，提示觀察組患者免疫系統(tǒng)存在功能紊亂。

細胞因子作為淋巴細胞分泌的具有重要免疫活性的物質，其功能是多方面的。越來越多的研究發(fā)現細胞因子在腎臟疾病的發(fā)生發(fā)展中起了重要作用，如IL-1、IL-6、IL-8、IL-18、IL-10、TNF-α等[7-9]。另有研究發(fā)現IL-8可促進Thl反應，引起Th1/Th2失衡，誘發(fā)免疫應答。IL-8、IL-6主要由單核-巨噬細胞產生，能夠誘導白細胞進行趨化運動。IL-6是炎癥反應中的重要細胞因子，是急性期合成的重要介質，被譽為細胞因子家族中的核心成員，在細胞免疫和體液免疫中具有重要作用。研究證實腎小球細胞表達IL-6 mRNA，IL-6對人腎小球系膜細胞的增殖呈量效關系，IL-6能促使人腎小球系膜細胞的增殖。研究發(fā)現，糖尿病腎病患者IL-6水平顯著升高[10]。本文研究顯示觀察組患者存在體液及細胞免疫功能紊亂，且尿IL-8水平、IL-6水平顯著高于正常對照組；對尿IL-8、IL-6水平與24 h尿蛋白含量相關性進行分析發(fā)現，兩者之間可能存在正相關性，這與相關研究結果一致[11-12]。這可能與IL-6、IL-8對多種炎癥細胞具有趨化作用，介導炎癥細胞浸潤，使炎癥反應進一步擴大，加速腎臟損傷有關。

綜上所述，IL-8、IL-6可能參與了PNS的發(fā)病機制，檢測尿IL-6、IL-8對原發(fā)性腎病綜合征患兒具有積極的臨床意義。對IL-6、IL-8來源及作用機制的進一步研究可能對于研究PNS發(fā)病機制具有重要的作用。

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Clinical value of urine interleukin-8 detection in children with primary nephrotic syndrome.

ZHENG Li-ping1,CAI Zhong-ren,CAI Li-qin.
1.Department of Pediatrics,Pingshan New District of Maternal and Child Health Hospital,Shenzhen 518122,Guangdong,CHINA;2.Department of Laboratory,Henggang People's Hospital of Longgang District,Shenzhen 518033,Guangdong,CHINA;3.Department of Laboratory,Xili People's Hospital,Shenzhen 518052, Guangdong,CHINA23

ObjectiveTo explore the clinical value of urine interleukin-8 detection in children with primary nephrotic syndrome.Methods40 patients with nephrotic syndrome were chosen as observation group and 40 healthy children were chosen as the control group.Urine interleukin-8 and interleukin-6,serum albumin,24h urine protein content and the change of peripheral blood T lymphocyte subsets in each group were detected and compared.Results(1)CD4+,CD8+,CD4+/CD8+,NK ratio of observation group were significantly lower than that of control group.(2)In observation group,urine IL-8 level[(5.83±2.15)pg/ml)and IL-6 level(266.45±54.38)ng/ml]were significantly higher than that of control group[(2.56±1.24)pg/ml,(107.23±45.15)ng/ml].(3)Urine IL-8 and 24h urine protein content had positive correlation(r=0.715,P＜0.05).Conclusion There were cellular and humoral immune dysfunction in patients with primary nephrotic syndrome.Urine IL-8 and IL-6 levels in children with PNS might be used as reference and one of the indicators to determine the diagnosis and treatment.

Interleukin-8;Nephrotic syndrome;Prednisone;Kidney

R692

A

1003—6350（2013）09—1315—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.09.0507

2013-10-20)

鄭麗萍。E-mail：2602172446@qq.com