關(guān)鍵詞：口腔感染；白色念珠菌；厚膜孢子；假菌絲

【中圖分類(lèi)號(hào)】R781.5【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1672-8602（2014）06-0324-02

白色念珠菌（Candidaalbicans），又名白假絲酵母。念珠菌是臨床常見(jiàn)的條件致病菌，抗生素的濫用及免疫抑制劑廣泛使用使得念珠菌的感染機(jī)會(huì)逐漸增加[1]。存在于人的口腔、呼吸道、腸道和陰道的粘膜上，念珠菌是健康人口腔中常見(jiàn)共生真菌[2]，一般在正常機(jī)體中數(shù)量少，不引起疾病，在人體免疫力下降時(shí)或正常菌群相互制約作用失調(diào)，就引起白色念珠菌感染，主要引起口腔炎、陰道炎等。

1病例摘要

2013年9月2日，一患者懷疑是口腔白色念珠菌感染前來(lái)進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)鑒定。該患者，男，40歲，農(nóng)民。因口腔潰瘍，自服消炎藥無(wú)效去縣醫(yī)院就診，查體發(fā)現(xiàn)口腔內(nèi)舌下及牙齦內(nèi)側(cè)有白色串珠樣菌膜，質(zhì)硬，不易拭去。據(jù)患者回憶，三天前在家吃西瓜，西瓜有一塊霉斑，只把霉斑切去，把剩余部分吃掉了。做細(xì)菌學(xué)檢查。患者經(jīng)含服制霉菌素后7日痊愈。

2細(xì)菌培養(yǎng)

2.1培養(yǎng)基（1）沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基：1L水中加入10g蛋白胨，混合，微濕溶解，濾過(guò)，加入40g葡萄糖，溶解，分裝，滅菌。（2）沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基：1L水中加入10g蛋白胨，混合，微溫溶解，濾過(guò)，加入18g瓊脂、40g葡萄糖，分裝，滅菌。（3）1%吐溫80玉米瓊脂培養(yǎng)基：取40g玉米粉、80ml吐溫80及500ml蒸餾水，混合，65℃加熱30分鐘，混勻，用紗布濾過(guò)，補(bǔ)足原水量。取15g瓊脂、500ml蒸餾水混合，加熱溶解。將以上兩種溶液混合、搖勻，分裝，滅菌。（4）念珠菌顯色培養(yǎng)基：1L水中加入10.2g蛋白胨、0.5g氯霉素、22.0g色素，混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)PH值至6.3，濾過(guò)，加入15g瓊脂，加熱煮沸，不斷攪拌至瓊脂完全溶解，傾注平皿。

2.2用無(wú)菌棉簽取患者口腔白色菌膜接種于沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基，將培養(yǎng)管置37℃溫箱內(nèi)孵育48小時(shí)后觀察，可見(jiàn)乳白色菌膜生成。（1）取上述增菌液培養(yǎng)物劃線接種于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上，35℃培養(yǎng)24小時(shí)，可見(jiàn)大量乳白色菌落生長(zhǎng)，表面光滑有濃酵母氣味。挑取疑似菌落涂片鏡檢。（2）在沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上挑取2-3個(gè)菌落劃線接種在念珠菌顯色培養(yǎng)基平板，35℃培養(yǎng)24小時(shí)，可見(jiàn)大量藍(lán)綠色菌落生長(zhǎng)。（3）在念珠菌顯色培養(yǎng)基平板上挑取2-3個(gè)菌落劃線接種在于吐溫80-玉米瓊脂培養(yǎng)基平板上，35℃培養(yǎng)24小時(shí)，可見(jiàn)大量灰色菌落生長(zhǎng)，表面光滑有濃酵母氣味。

2.3染色鏡檢：在吐溫80-玉米瓊脂培養(yǎng)基平板上挑取典型菌落涂片，進(jìn)行革蘭氏染色，鏡檢。

2.4芽管試驗(yàn)：在吐溫80-玉米瓊脂培養(yǎng)基平板上挑取典型菌落接種于加有一滴血清的載玻片上，蓋上蓋玻片，置濕潤(rùn)的平皿內(nèi)，置35℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)，2小時(shí)。

2.5糖發(fā)酵試驗(yàn)：采用杭州天河微生物試劑公司微量生化管。在吐溫80-玉米瓊脂培養(yǎng)基平板上挑取典型菌落接種在葡萄糖發(fā)酵管、麥芽糖發(fā)酵管、乳糖發(fā)酵管、尿素和蔗糖發(fā)酵管，35℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)，24小時(shí)。

3實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1染色鏡檢：革蘭氏染色陽(yáng)性菌，圓形、菌體著色不均勻，高倍鏡下觀察，可見(jiàn)豐富假菌絲和芽管生長(zhǎng)，在菌絲頂端及側(cè)緣厚膜孢子生長(zhǎng)。

3.2芽管試驗(yàn)：置顯微鏡下觀察，可見(jiàn)到由孢子長(zhǎng)出短小芽管。

3.3糖發(fā)酵試驗(yàn)分解葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣，分解麥芽糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣，不能分解乳糖，可以分解蔗糖并產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。

4討論

念珠菌顯色培養(yǎng)基根據(jù)酶底物法，白色念珠菌具有β-硝基半乳糖苷酶，可分解NGL使對(duì)-硝基苯酚游離，在堿性條件下顯色。

幾種細(xì)菌在顯色培養(yǎng)基上的顯色對(duì)比：

幾種細(xì)菌生化試驗(yàn)對(duì)比：

根據(jù)在顯色培養(yǎng)基生長(zhǎng)形態(tài)、染色鏡檢、芽管試驗(yàn)和糖發(fā)酵試驗(yàn)的情況，可以確定患者口腔潰瘍是白色念珠菌感染?？梢酝茢啵颊咧俺缘拿棺兾鞴虾写罅康陌咨钪榫?，由于大量白色念珠菌的攝入，打破了人體內(nèi)正常菌群的平衡而導(dǎo)致發(fā)病。隨著臨床抗生素、抗癌藥物及免疫抑制劑的應(yīng)用，白色念珠菌已成為重要的醫(yī)院感染病原體之一[3]。而白色念珠菌仍然是血液感染的主要致病菌，且其感染有逐年增加的趨勢(shì)[4]。隨著抗真菌藥物在臨床上的大量應(yīng)用，真菌耐藥性不斷出現(xiàn)且日趨嚴(yán)重[5]。其中，白色念珠菌的藥物外排能力增強(qiáng)導(dǎo)致胞內(nèi)藥物濃度降低，可能是白色念珠菌最主要的耐藥機(jī)制。隨著真菌感染率的不斷上升，真菌病治療也面臨著嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)，且有關(guān)耐藥菌株的報(bào)道也逐漸增多。要預(yù)防白色念珠菌感染，主要是放棄濫用抗生素，要養(yǎng)成良好的衛(wèi)生飲食習(xí)慣，不吃霉變、變質(zhì)的食物。還要加強(qiáng)體育鍛煉，增強(qiáng)體質(zhì)，維護(hù)正常菌群平衡；保持良好的有規(guī)律的起居習(xí)慣，保持愉快心情，避免負(fù)面情緒。

參考文獻(xiàn)

[1]楊莉莉，范嚴(yán)嚴(yán)，鄧英，等.146株念珠菌的分布及藥敏結(jié)果分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2004，14（6）：703～704