摘要：目的：優(yōu)選出痔寧膠囊的最佳提取工藝。方法：采用正交設(shè)計(jì)的試驗(yàn)方法，以干浸膏得率、黃芩苷含量為考核指標(biāo)，優(yōu)選出最佳的醇提和水提工藝。結(jié)果：醇提的最佳工藝為：70%乙醇，加6倍量，回流2次，第一次2小時(shí)，第二次1小時(shí)；水提的最佳工藝為：加8倍水，煎煮2次，每次2小時(shí)。結(jié)論：該提取工藝穩(wěn)定可行。

關(guān)鍵詞：痔寧膠囊；黃芩苷；提取工藝；正交試驗(yàn)

【中圖分類號(hào)】R943【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1672-8602（2014）06-0247-02

痔寧膠囊是由槐角（炒）、地榆（炭）、黃芩等八味藥組成的方劑。組方中的有效成分主要為甙類、黃酮等[1]。試驗(yàn)選用乙醇回流提??；再用傳統(tǒng)的水煎煮提取。以黃芩苷的含量和干膏量為指標(biāo)，采用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選最佳試驗(yàn)參數(shù)。

1.儀器和材料

HP一1100高效液相色譜儀（Agilent）、Agilent色譜工作站、CQ一250超聲波處理器（中國(guó)上海船舶電子設(shè)備研究所）、CS-501超級(jí)恒溫器（重慶實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠）、氧氣瓶（航天醫(yī)學(xué)工程研究所）；黃芩苷（中國(guó)藥品生物制品檢定所），所用試劑中除流動(dòng)相為色譜純級(jí)，其余均為分析純級(jí)，水為重蒸水；所用藥材購自湖北省藥材公司，經(jīng)檢驗(yàn)均符合2005年版中國(guó)藥典一部規(guī)定。

2方法與結(jié)果

2.1醇提工藝條件的選擇：

2.1.1醇提次數(shù)的選擇

根據(jù)預(yù)試驗(yàn)情況，從乙醇濃度、加醇量、提取次數(shù)、提取時(shí)間幾方面進(jìn)行考查。首先采用單因素試驗(yàn)法確定提取的次數(shù)，方法如下：

取處方量的藥材，加6倍量60%乙醇，分別回流提取1、2、3次，每次2小時(shí)，過濾，濾液減壓濃縮并干燥至恒重，稱取干膏重量，采用高效液相色譜法測(cè)黃芩苷含量[2]，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-磷酸（47：53：0.2）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm。理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。

由以上實(shí)驗(yàn)可以看出，當(dāng)提取3次時(shí)，出膏率最大，但與提取2次的差別不大，且黃芩甘的含量與提取2次的結(jié)果相當(dāng)，為了節(jié)省能源，縮短工時(shí)，選擇提取2次較好。

2.1.2醇提工藝正交試驗(yàn)

在此基礎(chǔ)上，采用正交試驗(yàn)的方法繼續(xù)對(duì)回流的乙醇濃度、加醇量、提取時(shí)間三個(gè)因素進(jìn)行優(yōu)選，并在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上確定以下因素水平表：

試驗(yàn)方法是：分別取1倍處方量的藥材，按正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表中設(shè)定的方案進(jìn)行提取，濾過，濾液減壓濃縮并干燥至恒重，稱取干膏重量，并按上法測(cè)黃芩苷含量，試驗(yàn)結(jié)果3：

以黃芩苷含量為考核指標(biāo)，應(yīng)選A3B2C3；以干膏量為考核指標(biāo)，應(yīng)選A1B3C3。但仔細(xì)觀察C2、C3，無論以黃芩苷含量還是以干膏量為考核指標(biāo)，差距都不大，但從提高效率的角度講，選擇C2較好；以干膏量為考核指標(biāo)，B2與B3的差異也不大，但選擇B2可以提高黃芩苷的含量，因此選擇B2較好；由于黃芩苷的含量是關(guān)鍵考核指標(biāo)，干膏量的多少對(duì)提取效果的判斷沒有明確的意義，因此在確定因素A時(shí)著重考慮黃芩苷含量，選擇A3較好。

最終將乙醇回流的工藝條件定為A3B2C2，即以6倍量的70%乙醇回流2次，第一次2小時(shí)，第二次1小時(shí)。

2.1.3醇提工藝驗(yàn)證

取處方量的藥材，按優(yōu)選的最佳工藝進(jìn)行提取、濃縮、干燥，計(jì)算浸膏得率及檢測(cè)黃芩苷的含量，結(jié)果4：

2.2水提工藝條件的選擇：

2.2.1水提工藝正交試驗(yàn)

根據(jù)生產(chǎn)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，影響提取效果的因素有以下三個(gè)方面：加水量、提取次數(shù)、提取時(shí)間，故我們?cè)陬A(yù)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，設(shè)立了以下4個(gè)因素3個(gè)水平，按照L9（34）正交表安排試驗(yàn)，5：

分別取1倍處方量的藥材，首先按醇提部分優(yōu)選的最佳方案進(jìn)行提取后，藥渣按設(shè)定的方案進(jìn)行提取，濾過，濾液合并，濃縮成稠膏，干燥，稱重。由于黃芩苷在水提浸膏中的含量也比較高，因此仍以黃芩苷含量作為水提部分的主要考核指標(biāo)。測(cè)黃芩苷含量，試驗(yàn)結(jié)果6：

以黃芩苷含量為考核指標(biāo)，應(yīng)選A2B2C2；以干膏量為考核指標(biāo)，應(yīng)選擇A3B3C3，但仔細(xì)分析，A2與A3、B2與B3、C2與C3對(duì)干膏量的影響不大，從縮短工時(shí)，節(jié)省能源考慮，同時(shí)為提高黃芩苷的含量，選擇A2、B2、C2較好。最終我們確定的工藝為A2B2C2，即加8倍水，煎煮2次，每次2小時(shí)。

2.2.2水提工藝驗(yàn)證

取處方量的藥材，按照優(yōu)選的最佳工藝條件，進(jìn)行三次重復(fù)試驗(yàn)，計(jì)算干膏量及檢測(cè)黃芩苷含量，結(jié)果7：

從以上的驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果來看，表明三次試驗(yàn)的結(jié)果無明顯差異，說明該工藝穩(wěn)定、可行。

3討論

方中的當(dāng)歸、防風(fēng)、陳皮含有揮發(fā)油，揮發(fā)油中主要含有烯萜類及其它鏈狀脂肪族化合物等酯溶性成分，這些成分多數(shù)有活血止痛、潤(rùn)腸通便、抗炎抑菌的功能[3]。試驗(yàn)采用較高濃度的乙醇提取方中的甙類、黃酮等成分，同時(shí)也能最大限度地提取揮發(fā)油中的酯溶性成分。藥效學(xué)試驗(yàn)表明，制劑具有很好的抗炎、鎮(zhèn)痛、止血、抑菌等作用，表明該方法對(duì)有效成分的提取比較充分，效果較好。

參考文獻(xiàn)

[1]王麗華，段玉峰，丁紅軍，等.槐角丸的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2007，7（5）：793-794

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[3]王本祥.現(xiàn)代中藥藥理與臨床[M].天津.天津科技翻譯出版公司，2004：582-583.