摘要:大腸桿菌的控制是我國控制食品安全的主要指標(biāo)之一。食物中O157:H7大腸桿菌超標(biāo)將會導(dǎo)致食用者身體出現(xiàn)異常,嚴(yán)重危害身體健康。本文通過對大腸桿菌O157:H7的危害進(jìn)行分析,并對食物中的大腸桿菌O157:H7檢測方法進(jìn)行分析,以供參考。
關(guān)鍵詞:O157 H7 食品 安全 大腸桿菌 檢測 危害
中圖分類號:TS207.4 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:1672-5336(2014)12-0043-01
1 大腸桿菌O157:H7來源與危害
德國在2011年爆發(fā)的大腸桿菌感染病例累計達(dá)到3901例,甚至已經(jīng)造成47人死亡。那么大腸桿菌的來源渠道主要有哪些呢?在邁阿密第八季05中有一個女孩因為受到大腸桿菌中毒導(dǎo)致死亡,經(jīng)過調(diào)查發(fā)現(xiàn)大腸桿菌是來源于養(yǎng)牛場的糞便,糞便對周圍的水源造成了污染,而死者食用的蔬菜就是通過這些污染了的水來進(jìn)行灌溉的,在未完全清除蔬菜表面的大腸桿菌污染物前,就進(jìn)行食用,才造成了嚴(yán)重的后果。[1]
對于大腸桿菌O157:H7的病菌來源則一般認(rèn)為是感染這種病菌的人或動物糞便對食品造成污染,而這些食物進(jìn)入到飲食鏈中,有可能會導(dǎo)致相關(guān)食品制品或相關(guān)飲品都有可能會載有這種病菌。病人在感染后將會出現(xiàn)血樣糞便、腹瀉癥狀,容易引起出血性結(jié)腸炎,甚至引起并發(fā)溶血性尿素癥,死亡率約在30%左右。1996年日本大阪地區(qū)暴發(fā)O157:H7感染,造成感染者數(shù)萬,最終造成死亡12人,引起世界關(guān)注。2000年我國河南省發(fā)生O157:H7感染,四個月間共有35例患者,其中死亡28人,腎衰病死率87%。
2 大腸桿菌檢測方法
目前國家在相關(guān)的大腸桿菌檢測中使用的國家標(biāo)準(zhǔn),其主要步驟有三個實驗。首先是乳糖發(fā)酵試驗,第二是分享培養(yǎng)試驗,第三是證實試驗。在乳糖發(fā)酵試驗中,選擇三個稀釋樣品濃度,特定條件下觀察是否會產(chǎn)生氣體。分享培養(yǎng)主要是指把產(chǎn)生氣體的發(fā)酵管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到伊紅藍(lán)瓊指平板之上,再在36度的環(huán)境中培養(yǎng)近24小時,對菌體的形態(tài)進(jìn)行觀察。最后的證實試驗,在平板上挑選可疑的菌落,進(jìn)行梁色觀察,同時對發(fā)酵管進(jìn)行觀察,根據(jù)確定的管數(shù),對MPN值進(jìn)行查詢。[2]免疫磁珠分離法是把特異性抗體吸附在可以被吸附磁性珠子上,通過抗體反應(yīng)把樣品中的大腸桿菌進(jìn)行集合。
3 食品之中大腸桿菌O157:H7檢測方法
3.1 細(xì)菌分離法
目前使用頻率較多的是山梨醇麥康凱瓊脂培養(yǎng)其來對菌株實行分離與篩選,大腸桿菌O157:H7在一般正常的條件是不能發(fā)酵山梨醇的,在瓊脂上只能呈現(xiàn)出灰色菌落,但其他的菌則會出現(xiàn)紅色。根據(jù)頭孢克肟抑制變形菌,60%的山梨醇陰性的和大腸桿菌O157:H7發(fā)酵鼠李糖特性制備了新的培養(yǎng)基,從而提高了分離敏感性。[3]
3.2 血清學(xué)檢測法
通過分離培養(yǎng)之后,大腸桿菌O157:H7需要進(jìn)一步進(jìn)行血清學(xué)的實驗與鑒定,目前有玻片凝集試驗與乳膠凝集試驗等。通過來講,玻片凝集試驗會出現(xiàn)假陰性效果,對真實性造成一定的干擾。另外實驗室則是多采用ELISA法來進(jìn)行血清學(xué)檢測,充分利用全菌體、脂多糖/滋養(yǎng)層交叉反應(yīng)抗原等檢測血清中的抗體水平。一般而言,人或動物通過食品進(jìn)行大腸桿菌O157:H7感染后,會誘發(fā)搞LPS抗體,所以通過LPS的抗體進(jìn)行檢測能夠直接反應(yīng)出大腸桿菌O157:H7的感染程度。
3.3 免疫學(xué)檢測法
在免疫學(xué)檢測方法中主要包括三種具體的試驗檢測法。首先是直接免疫熒光法。把熒光素標(biāo)記到抗體上,通過與抗原反應(yīng)來進(jìn)行檢測。目前已經(jīng)證實可以通過此種方法檢測出O157:H7,如果想要效果更加明顯,可以通過預(yù)先使用漂白劑處理離心,通過此種免疫學(xué)檢測法用時較短,一般為兩個小時左右。第二種是酶聯(lián)免疫吸附試驗,以下稱為ELISA試驗。ELISA是一種新的免疫酶技術(shù),可以對需要檢測的抗體、抗原進(jìn)行定性檢測與定量檢測,而且用時也相對較短,準(zhǔn)確性更高一些。目前這些技術(shù)已經(jīng)開始應(yīng)用于O157:H7的一般檢測中。通過ELISA檢測的試驗結(jié)果基本不需要再使用方法進(jìn)行驗證。第三種是免疫磁性分離法。在標(biāo)本中含有不同種屬的細(xì)菌時,在進(jìn)行SMAC培養(yǎng)后,加入被O157:H7包圍的磁珠,可以把其他的細(xì)菌進(jìn)行隔離,從而極大提高了敏感性。
4 結(jié)語
本文通過對食品中的大腸桿菌來源與傳播途徑進(jìn)行分析,對于大腸桿菌的檢測方法從宏觀上與微觀上進(jìn)行分析,根據(jù)傳播途徑制定了詳細(xì)的防治措施,通過對入口食品的防范,不斷提高對食品的安全意識,同時加強(qiáng)體育鍛煉,提高免疫力,抵抗大腸桿菌感染病毒入侵。隨著生物醫(yī)學(xué)水平的不斷提高,將會對食品中病毒安全問題進(jìn)行深入研究,促進(jìn)我國食品行業(yè)安全。
參考文獻(xiàn)
[1]史秋梅,張艷英,高桂生,高光平,程淑琴,裴玉欣.河北省部分地區(qū)肉、蛋食品大腸桿菌污染狀況的檢測[J].河北科技師范學(xué)院學(xué)報,2012,04:7-11.
[2]張艷英,高桂生,史秋梅,高光平,劉申.動物性食品源大腸桿菌O血清型鑒定及其K88菌毛基因檢測[J].中國畜牧獸醫(yī),2013,03:185-188.
[3]張輝,楊振泉,趙雋,王冉.食源性大腸桿菌在即食食品中的生長預(yù)測模型[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報,2011,05: 1122-1127.