摘要：本文研究了以枇杷葉、桔梗與羅漢果為主要原料的水提濃縮液的提取工藝。方法采用正交試驗法進行優(yōu)選，以總皂甙含量作為評價指標。結(jié)果最佳提取工藝為：水提2次，每次加12倍水量，水提時間30分鐘。結(jié)論優(yōu)選得到的工藝穩(wěn)定可靠。

關鍵詞：枇杷葉水提濃縮液提取工藝正交

中圖分類號：O629文獻標識碼：A 文章編號：1672-5336（2014）12-0022-02

枇杷葉為薔薇科植物枇杷的干燥葉。桔梗為桔?？贫嗄晟荼局参锝酃５母?。羅漢果是中國傳統(tǒng)的藥食同源植物，有清熱潤肺、滑腸通便、促進腸胃的功效。三種藥材均含有不同種類的皂甙成分，在我國傳統(tǒng)食品如糖果、龜苓膏、涼茶中常常組合使用。

枇杷葉、桔梗與羅漢果是本次研究硬質(zhì)糖果水提濃縮液的主要組成成分，現(xiàn)對枇杷葉桔梗羅漢果水提濃縮液的提取工藝分析和探討。學習和借鑒優(yōu)秀的經(jīng)驗和成果，通過正交試驗法，為硬質(zhì)糖果的生產(chǎn)提供科學依據(jù)。

1儀器和試藥

1.1 儀器

天平HA-180M；島津UV-2450紫外可見分光光度計；比色計；層析柱。

1.2 試藥

正丁醇（分析純）；乙醇（分析純）；中性氧化鋁（分析純，100-200目）；Amberlite-XAD-2大孔樹脂（Sigma化學公司、USA）；人參皂甙Re（購自中國藥品生物制品檢定所）；香草醛溶液（稱取5g香草醛，加冰乙酸溶解并定容至100ml）；高氯酸（分析純）；冰乙酸（分析純）；人參皂甙Re標準溶液（精確稱取人參皂甙Re標準品0.020g，用甲醇溶解并定容至10.0ml，即每毫升含人參皂甙Re2.0mg）。

2 方法與結(jié)果

2.1 枇杷葉桔梗羅漢果水提濃縮液制備方法

本浸膏采用傳統(tǒng)水提法。本實驗采用3因素3水平正交實驗設計，因素A加水量分別為8倍、10倍、12倍；因素B提取時間分別為30分鐘、45分鐘、60分鐘；因素C提取次數(shù)分別為1次、2次、3次。取同批枇杷葉桔梗羅漢果藥材9份，每份200g，按表1設計進行試驗，水提液合并，過濾，濃縮至115ml，測定總皂甙，實驗安排見表2。

2.2 總皂甙含量測定方法

2.2.1 試樣處理

吸取1.0mL試樣，加水定容到25mL。

2.2.2 柱層析

層析管選擇10mL注射器，里面含有3cmAmberlite-XAD-2大孔樹脂以及1cm中性氧化鋁。開始選擇25mL70%乙醇，然后選擇25mL水進行洗柱，均不保留洗脫液，結(jié)束后精密加入上述方法取得的試樣溶液1.0mL，再通過25mL水洗柱，棄去洗脫液后加25mL70%乙醇洗脫人參皂甙，用蒸發(fā)皿采集所得洗脫液，并通過60℃水浴揮干。

2.2.3 顯色

取上一步揮干后的蒸發(fā)皿，精密添加0.2mL5%香草醛冰乙酸溶液并轉(zhuǎn)動蒸發(fā)皿促進溶解，之后添加0.8mL高氯酸并充分混合，再置入5mL帶塞刻度離心管中，60℃水浴上加熱10min后取出，進行冰浴冷卻，精密添加 5.0mL冰乙酸，充分混合后，以1cm比色池于560nm波長處與標準管一起進行比色測定。

2.2.4 標準管

吸取人參皂甙Re標準溶液（2.0mg/mL）100μl放蒸發(fā)皿中，放在水浴揮干（60℃以下），或熱風吹干（切忌溫度過高），以下操作從“2.2.2”起，與試樣相同，測定吸光度。

2.2.5 計算

式中X：試樣中總皂甙量（人參皂甙Re計），g/100g；A1：被測液的吸光度值，A2：標準液的吸光度值；C：標準管人參皂甙Re的量，μg；V：試樣稀釋體積，mL；m：試樣質(zhì)量，g；計算結(jié)果保留二位有效數(shù)字，結(jié)果見表2。

由上述結(jié)果可見，煎煮次數(shù)R值最大，為主要因素，水提最佳工藝條件為A3B1C3。分析結(jié)果表明，煎煮次數(shù)對浸膏的總皂甙含量有顯著影響，但是藥材在加水提取時會軟化，結(jié)果會產(chǎn)生藥渣而造成管道堵塞，妨礙了提取液經(jīng)由管道流出。而且作者試驗提取3次比提取2次的總皂甙量只增加了一點點，從生產(chǎn)成本及能耗角度來說，本次選定的水提次數(shù)為2次較合理。因此，最佳工藝條件為A3B1C2。

2.3 最佳工藝驗證

按照上述優(yōu)化工藝，平行提取3份，測定總皂甙的含量，分別為0.612g/100g、0.620g/100g、0.618g/100g，平均含量為0.617g/100g。結(jié)果表明，篩選出來的工藝穩(wěn)定可行。