摘要：本文通過抽取倉中的小麥人工制備13.5%、14.0%、15.0%三個(gè)水分梯度的高水分小麥，將人工制備的高水分糧裝入整理箱（每個(gè)不小于100公斤），放入本庫301倉內(nèi)儲(chǔ)存。儲(chǔ)存過程中檢測灰綠曲霉的變化進(jìn)行高水分糧真菌危害預(yù)報(bào)。得出如下結(jié)論：13.5%的小麥11月份入倉在本地區(qū)可以安全度夏；14.0%的小麥在本地區(qū)11月份入倉，氣溫為35.1℃，氣濕為70.4%，倉溫為24.5℃，倉濕為73.4%，糧溫為21.4℃，可安全儲(chǔ)存270天左右；15.0%小麥低溫情況下儲(chǔ)存10天即長菌，不適合在本地區(qū)儲(chǔ)存。

關(guān)鍵詞：檢測 高水分糧 灰綠曲霉 真菌 預(yù)報(bào)

中圖分類號：S379 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-5336（2014）04-0040-02

在糧食儲(chǔ)藏過程中，可對糧食構(gòu)成危害的真菌，主要是曲霉和青霉。最初生長的真菌是灰綠曲霉和局限曲霉，一般不會(huì)對糧食質(zhì)量產(chǎn)生影響，但可作為儲(chǔ)糧真菌危害檢測的警示菌。第二階段是亮白曲霉和黃曲霉，這些真菌的生長可引起糧食發(fā)熱、霉變、結(jié)塊，是儲(chǔ)糧中需要重點(diǎn)控制的微生物。

低水分區(qū)，危害真菌以灰綠曲霉生長為主，高水分區(qū)，以亮白曲霉生長為主，水分16%為兩種真菌生長的拐點(diǎn)，灰綠曲霉生長逐漸由強(qiáng)到弱，亮白曲霉逐漸由弱到強(qiáng)。這一研究結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)，危害真菌的生長，隨著糧食水分的增加，具有明顯的演替規(guī)律，通過檢測糧堆中灰綠曲霉的變化，可進(jìn)行儲(chǔ)糧真菌危害的預(yù)報(bào)。在儲(chǔ)糧過程中危害真菌的生長，會(huì)產(chǎn)生大量的CO2，采用傳感技術(shù)，用便攜式生物危害檢測儀可準(zhǔn)確檢測出CO2的含量，它們含量多少與真菌生長（危害）程度有良好的相關(guān)性，通過檢測糧食中這些物質(zhì)的變化，可進(jìn)行儲(chǔ)糧真菌危害的早期檢測，查找疑似真菌生長點(diǎn)。對疑似真菌生長點(diǎn)進(jìn)行取樣檢測真菌孢子，通過檢測糧堆中儲(chǔ)藏真菌孢子數(shù)的變化，可對儲(chǔ)糧真菌生長（危害）情況進(jìn)行判定。

1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

通過模擬實(shí)倉實(shí)驗(yàn)用真菌孢子計(jì)數(shù)法來探索高水分糧儲(chǔ)存時(shí)間，獲取高水分糧儲(chǔ)存時(shí)間的極限數(shù)據(jù)，為制定高水分糧短期儲(chǔ)存相關(guān)指標(biāo)和管理辦法提供依據(jù)。

2 實(shí)驗(yàn)材料

2.1 實(shí)驗(yàn)倉房情況

實(shí)驗(yàn)倉為本庫301倉，倉型為高大平房倉，倉房尺寸為36m×23m×5.5m。

2.2 實(shí)驗(yàn)倉儲(chǔ)糧情況

301倉儲(chǔ)存小麥，儲(chǔ)糧基本情況見下表1。

2.3 儀器及材料

便攜式生物危害檢測儀；

插入式溫度計(jì)；

濾布：網(wǎng)孔300目，裁剪成10cm×10cm小塊；

血球計(jì)數(shù)板：16中方格規(guī)格或25中方格規(guī)格，V等于0.1mm3；

計(jì)數(shù)器：計(jì)數(shù)范圍為0-9999，轉(zhuǎn)動(dòng)式回零；

電子天平：感量0.1g；

生物顯微鏡：放大倍數(shù)600-800×；

所用水無特別說明為符合國家實(shí)驗(yàn)室一級水標(biāo)準(zhǔn)。

3 實(shí)驗(yàn)方法

3.1 試驗(yàn)樣品的準(zhǔn)備工作

高水分小麥初始信息如表2。

由于難以找到高水分小麥試驗(yàn)倉進(jìn)行局部模擬高水分糧試驗(yàn)，選擇未檢出真菌孢子的小麥用于人工制備高水分糧，人工制備三個(gè)水分梯度的高水分小麥：13.5%、14.0%、15.0%，首先用105℃烘干法測定其水分為12.0%，計(jì)算出調(diào)節(jié)到目標(biāo)水分所需要加的蒸餾水的質(zhì)量，糧食調(diào)節(jié)水分后平衡兩天，混勻后取樣檢測含水量（105℃），檢測結(jié)果與理論值接近，誤差在±0.2%范圍內(nèi)。將人工制備的高水分糧裝入整理箱（每個(gè)不小于100公斤），整理箱規(guī)格為70cm×50cm×70cm，每個(gè)水分梯度監(jiān)測點(diǎn)為5個(gè)，放入正常儲(chǔ)存糧倉中。箱體埋入糧食中，打開箱蓋，使上口與糧面齊平。玉米應(yīng)選擇收獲季節(jié)的天然高水分玉米：15%，15.5%，16.0%，每個(gè)水分梯度5個(gè)監(jiān)測點(diǎn)，放入本庫301倉內(nèi)儲(chǔ)存。

3.2 數(shù)據(jù)采集

在儲(chǔ)糧過程中，真菌的生長、呼吸作用會(huì)產(chǎn)生大量的CO2，采用傳感技術(shù)，用攜式生物危害檢測儀可準(zhǔn)確檢測出CO2的含量，它們含量多少與真菌生長（危害）程度有良好的相關(guān)性，通過檢測糧食中這些物質(zhì)的變化，可進(jìn)行儲(chǔ)糧真菌危害的早期檢測，查找疑似真菌生長點(diǎn)。每隔10天對各監(jiān)測點(diǎn)進(jìn)行一次跟蹤檢測篩查，便攜式生物危害檢測儀可以給出Ⅰ級—安全；Ⅱ級—臨界；Ⅲ級—危害；Ⅳ級—嚴(yán)重危害4級儲(chǔ)糧狀況判定。檢測時(shí)，應(yīng)將儀器氣體采集管插入糧堆0.35-0.5m，同時(shí)采用插入式溫度計(jì)檢測同一位點(diǎn)溫度。每次需詳細(xì)記錄每個(gè)點(diǎn)的儲(chǔ)糧狀況，包括CO2濃度、溫度、濕度等。

3.3 取樣檢驗(yàn)

對疑似真菌生長點(diǎn)，用手動(dòng)取樣器取樣約200g，立即用塑料袋密封，當(dāng)天測定水分（105℃）和真菌孢子數(shù)。剩余樣品放4℃冷藏保存，至下一次樣品檢驗(yàn)結(jié)果出來。

3.3.1 真菌孢子數(shù)測定方法如下

稱取10.0g樣品于試管中，用移液管準(zhǔn)確加入30.0ml水，以120-150/min的頻率用力振搖1min，立刻用300目濾布過濾，用膠頭滴管插入試管底部吹吸3次，清洗滴管，取第四次吸液立即點(diǎn)樣，點(diǎn)樣后的計(jì)數(shù)板靜置10s以上，置于顯微鏡置物臺，顯微觀察孢子不移動(dòng)即可開始計(jì)數(shù)。

計(jì)數(shù)原則：計(jì)上不計(jì)下，計(jì)左不計(jì)右。

3.3.2 計(jì)算方法

（1）每毫升清洗液中真菌孢子數(shù)計(jì)算公式：

x1=A×5×104=50000×A

x1——25個(gè)中方格規(guī)格計(jì)數(shù)板內(nèi)的真菌孢子總數(shù)，單位為個(gè)每毫升（個(gè)/mL）；

A——計(jì)數(shù)室中5個(gè)中方格內(nèi)真菌孢子總數(shù)，單位為個(gè)（個(gè)）。

（2）樣品中真菌孢子數(shù)計(jì)算公式：

x2=x1×（30/10）

x1——25個(gè)中方格規(guī)格計(jì)數(shù)板內(nèi)的真菌孢子總數(shù)，單位為個(gè)每毫升（個(gè)/mL）；

x2——每克糧食樣品中真菌孢子總數(shù)，單位為個(gè)每克（個(gè)/g）；

根據(jù)大量實(shí)驗(yàn)室和實(shí)倉研究，該方法對儲(chǔ)糧真菌危害檢測的結(jié)果，提出了一個(gè)初步的判定標(biāo)準(zhǔn)，共分四級。

3.4 監(jiān)測結(jié)束時(shí)間

對連續(xù)兩次均檢測有真菌生長的點(diǎn)，即可確認(rèn)此點(diǎn)為微生物生長點(diǎn)，記錄真菌初期生長時(shí)間和糧食水分，監(jiān)測即可結(jié)束。同時(shí)記錄該點(diǎn)的CO2、溫度、濕度等相關(guān)信息。

4 結(jié)果與分析

4.1 倉溫與糧溫變化情況（圖1）

試驗(yàn)期間倉溫與高水分糧糧溫跟蹤情況見圖1。糧溫與倉溫均呈下降后上升趨勢，糧溫最高達(dá)28℃，最低為1.0℃；倉溫最高為27.6℃，最低為-3.6℃。

4.2 實(shí)驗(yàn)起始與結(jié)束時(shí)間

高水分小麥模擬實(shí)倉實(shí)驗(yàn)從2012年11月1號開始，至2013年8月中旬結(jié)束。高水分玉米模擬實(shí)倉實(shí)驗(yàn)從2012年12月20號開始，至2013年8月中旬結(jié)束。

4.3 實(shí)驗(yàn)期間高水分糧真菌初生長時(shí)間（見表3）

4.4 經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

13.5%的小麥11月份入倉在本地區(qū)可以安全度夏；14.0%的小麥在本地區(qū)11月份入倉，氣溫為35.1℃，氣濕為70.4%，倉溫為24.5℃，倉濕為73.4%，糧溫為21.4℃，檢測到真菌生長，可安全儲(chǔ)存270天左右；15.0%小麥低溫情況下儲(chǔ)存10天即長菌，不適合在本地區(qū)儲(chǔ)存。

15.0%和15.5%高水分玉米在本地區(qū)自2012年12月20號入倉，氣溫為35.1℃，氣濕為70.4%，倉溫為24.5℃，倉濕為73.4%，糧溫為21.4℃，檢測到真菌生長，可安全儲(chǔ)存230天左右。16.0%高水分玉米在本地區(qū)自2012年12月20號入倉，氣溫為26.1℃，氣濕為75.1%，倉溫為22.3℃，倉濕為73.4%，糧溫為18.9℃，檢測到真菌生長，可安全儲(chǔ)存200天左右。

參考文獻(xiàn)

[1]崔基方.糧食儲(chǔ)藏技術(shù)[M].上?？茖W(xué)普及出版社，2001：72-84.

[2]程樹峰，唐芳，武松陵.儲(chǔ)糧真菌危害早期檢測方法的研究[J].中國糧油學(xué)報(bào)，2011，26（4）.

[3]路茜玉.糧油儲(chǔ)藏學(xué).中國輕工業(yè)出版社.

[4]季青躍，于兆鋒，李建智等.高水分玉米儲(chǔ)藏試驗(yàn)[J].糧油食品科技，2006.