摘要：在乳制品當中，尤其是酸奶當中，有機酸是其風味物質(zhì)的重要來源，有機酸的使用能夠抑制有害菌的滋生，提升和改善酸奶的治療和口感，因此在產(chǎn)品的質(zhì)量管理中有機酸的檢測是必不可少的。

關(guān)鍵詞：乳品檢測 有機酸 酸奶 高效液相色譜法

中圖分類號：TS207文獻標識碼：A 文章編號：1672-5336（2014）18-0026-01

離子色譜法、氣相色譜法和高效液相色譜法是目前常用三種有機酸檢測辦法，其中高效液相色譜法因其操作簡單、準確度高等優(yōu)點運用最為廣泛。高效液相色譜法能同時檢測食品中9種有機酸，對于乳品中有機酸的檢測非常方便，具有實用價值，本文談?wù)劯咝б合嗌V法的研究情況。

1 材料與方法

（1）儀器與器材。高效液相色譜儀（PE-200型）超聲波振蕩儀（KQ-250型）可見分光光度計（UV-260）離心機。（2）試劑。乳酸、乙酸、檸檬酸、草酸、酒石酸、丁二酸、丙酸，濃度分別為：10.0mg/ml，抗壞血酸20.0mg/ml，蘋果酸40.0mg/ml，于冰箱保存作為貯備液，抗壞血酸標準溶液臨用新配。（3）實驗方法：①色譜條件。色譜柱為C18柱（5μm，250×4.6mm）；柱溫：25℃；流動相：甲醇：0.01mol/L（NH4）2HPO4緩沖溶液pH2.8；流速：0.7ml/min；可見光-紫外檢測器，檢測波長215nm。②酸奶樣品處理及測定。稱取攪勻的酸奶樣品2g于10ml比色管中，用超純水稀釋至10.0ml，混勻后超聲脫氣，取400μL稀釋酸奶于Eppendof管中，加入100μL超純水、3.5mol/L高氯酸25μL，混勻，離心（12000r/m，6min）使蛋白充分沉淀，取上清液過0.45μm濾膜作為樣液。樣液、混合標準應(yīng)用液均取10μL進樣，以保留時間定性，峰高增量法確認，標準曲線法定量。

2 結(jié)果與討論

高效液相色譜法（HPLC）分析是1970年代迅速發(fā)展一種高效分離技術(shù)，小說和快速分析。由于不同的分離機制，可以分為以下幾種類型：液固色譜法、液相色譜法、離子交換色譜、離子色譜、色譜法應(yīng)該使用更多，占70% - 80%的高效液相色譜法（HPLC）。高效液相色譜法（HPLC）具有以下突出優(yōu)點和特點：

高效液相色譜法（HPLC），高電壓，高效液相色譜法（HPLC）液體，液體作為流動相，稱為載體。由于加載流體流經(jīng)色譜柱時，壓力比較大，為了使液體迅速通過色譜柱，必須攜帶流體壓力，壓力一般150～350x 105pa。高速度：高效液相色譜法（HPLC）與高壓、攜帶液速度快，因此分析所需的時間遠低于經(jīng)典液相色譜，超過十分鐘至數(shù)十分鐘才能完成。效率高：高效液相色譜柱效率非常高，可以達到超過30000板/m。靈敏度高：由于檢測器的靈敏度高，自動操作，分析精度高、所需樣本量較少。高分辨率，可以選擇固定相，流動相以達到最佳的分離效果。高適用范圍：百分之七十以上的有機化合物用高效液相色譜法（HPLC）分析，特別是高沸點、大分子化合物，極性強、熱穩(wěn)定性差的分離和分析，顯示了優(yōu)勢。

高效液相色譜的缺點。需要高壓力：一般可以達到150～350x105pa.2。柱效應(yīng)：在注入器和檢測器之間，除了任何死亡空間，其他職位如取樣器，柱接頭、連接管和細胞，如果流動相的流型的變化，分離物質(zhì)的任何擴散和保留會造成色譜峰顯著擴大，柱效率較低。

高效液相色譜（HPLC）的分類根據(jù)不同的分離機制，高效液相色譜（HPLC）法可分為：（1）分配色譜固定相是液體，使用液體固定相對于組件的樣品溶解能力不同，樣品的各種組件在液相固定相分配系數(shù)的差異，并實現(xiàn)樣品的設(shè)置點色譜分離。根據(jù)不同的相對極性固定相和液相，可分為正相分配色譜和反相色譜法。（2）分配色譜法或逆轉(zhuǎn)階段。吸附色譜法，使用固體吸收劑作為固定相，用不同極性溶劑作為流動相，基于每個組件的樣本實現(xiàn)分離。（3）吸附劑吸附性能的差異。離子交換色譜法，離子交換劑為固定相。

成分的高效液相色譜（HPLC）（1）高壓泵、高效液相色譜法（HPLC）使用色譜柱是很?。?～6毫米），使用的固定相粒徑非常?。◣孜⒚椎綆孜⒚祝粤鲃酉嘣谥械牧鲃幼枇艽?，在一般情況下，流動相流速非常慢，效率低，耗費時間。為了實現(xiàn)快速、高效分離，將流動相的壓力很大，加速流動的列。因此，必須使用高壓高壓輸液泵。（2）梯度洗脫裝置：梯度洗脫是攜帶流體包含兩個（或更多）不同極性的溶劑劑，按照一定程序分離的過程中不斷變化的負載電壓和極性溶劑的液體，通過攜帶液體改變極性變化分離組件分離的因素，為了提高分離效率。（3）色譜柱：是最重要的組件的色譜儀。通常使用后壁玻璃管或不銹鋼管的內(nèi)表面拋光，腐蝕的一些樣品，需要高壓電阻、銅管、鋁管或聚（四氟乙烯管。發(fā)展趨勢是減少包裝大小和柱直徑為了提高柱效率。（4）樣本設(shè)備：注射器灌裝設(shè)備跟蹤樣本注射器和抽樣方法時，氣相色譜方法。注射壓力小于150x105pa，當注射壓力大于150x105pa，停止流入必須使用樣本。（5）檢測設(shè)備：主要用于監(jiān)控組件的色譜柱分離后的濃度的變化，并記錄儀器繪制光譜進行定性和定量分析。（6）數(shù)據(jù)處理設(shè)備：高效液相色譜法（HPLC）分析的結(jié)果除了可用光譜數(shù)據(jù)記錄器地圖，微處理器和色譜數(shù)據(jù)工作站也可以用來記錄和色譜分析數(shù)據(jù)處理。合成和天然高分子化合物等，涉及石油化工產(chǎn)品、食品、藥物合成和生物化工產(chǎn)品和環(huán)境污染等，約占80%的有機化合物，其余20%的有機化合物，包括永久氣體、揮發(fā)性低沸點和中分子量化合物只能氣相色譜分析。

3 結(jié)語

采用乙酸鋅-亞鐵氰化鉀、硫酸鋅-亞鐵氰化鉀、硫酸銅-氫氧化鈉等來沉淀奶制品中的蛋白質(zhì)，此類方法在國內(nèi)外較為常用，但是它操作步驟多，耗費時間長。然而本文通過用3.5mol/L高氯酸來沉淀奶制品中的蛋白質(zhì)，操作簡便，不影響待測組分的測定。綜上所述，高效液相色譜法在乳品檢測中應(yīng)用廣泛，它可對食品質(zhì)量的監(jiān)管與食品加工工藝的研究提供技術(shù)支持，具有使用價值。

參考文獻

[1]郭燕，梁俊，等.高效液相色譜法測定蘋果果實中的有機酸[J].食品科學，2012（02）.