摘要：研究發(fā)現(xiàn)，茶籽粕中各種物質(zhì)含量非常的豐富，比如粗蛋白、粗脂肪、糖類、粗纖維、皂素、灰分、單寧、以及水分和咖啡堿等，同時還富含一定量的有機質(zhì)。目前國內(nèi)外對茶籽粕中抑菌活性物質(zhì)的研究比較少，本文就如何提出茶籽粕中的抑菌活性物質(zhì)進行研究，并在此基礎(chǔ)上就其抑菌效果，談一下自己的觀點和認識，以供參考。

關(guān)鍵詞：油茶粕 抑菌活性物質(zhì) 抑菌效果 研究

中圖分類號：TS229 文獻標識碼：A文章編號：1672-5336（2014）18-0071-02

在實踐中茶籽粕的應用效果不是很理想，通常直接作為清塘劑或者燃料，不僅造成了嚴重的資源浪費，而且還引發(fā)環(huán)境污染。對于茶籽粕而言，從中提取的抑菌活性物質(zhì)抗菌性非常的好，因此本文對其提取及抑菌效果進行研究，以期提高油茶粕的有效利用率。

1 油茶粕抑菌活性物質(zhì)提取

在進行茶籽粕抑菌活性物質(zhì)提取之前，需做好準備工作，尤其是實驗準備，比如油茶粕選料、實驗菌種（大腸桿菌、金黃色葡萄球菌以及黑曲霉和紅曲霉等）；培養(yǎng)基選擇牛肉浸膏蛋白胨；同時，試劑均采用的是分析純、蒸餾水是試驗室自制的，并選用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀以及立式冷凍干燥機和臺式離心機。具體的試驗操作方法是：將事先準備好的茶籽粕用水、不同濃度的乙醇以及石油醚和乙酸乙酯提取，通過濃縮凍干上清液可得茶籽餅粕粗提物，放好備用。

在此過程中，采用瓊脂擴散技術(shù)手段對粗提物抑菌活性進行測定，并且將極性上清提取物配成不同濃度的溶液；吸取濃度為105cfu每毫升供種菌的懸液20μL，然后將其放置在直徑9厘米的培養(yǎng)皿之中；加大約10毫升溶解冷卻到40攝氏度左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中。此時，迅速對其進行振蕩、搖勻，使菌懸液徹底分散開來，待靜止冷凝以后，再有直徑為2.7毫米規(guī)格的打孔設(shè)備進行打孔，并且在每一個孔中加5毫升待測液，通過滅菌培養(yǎng)基對其進行對比，靜置后保持溫度適宜，其中細菌的培養(yǎng)溫度以37攝氏度為宜，霉菌的培養(yǎng)溫度應當控制在30攝氏度左右。

在對不同溫度條件下的抑菌效果進行檢測時，采用瓊脂擴散技術(shù)手段對活性最強的上清液抑菌物質(zhì)在差異性溫度環(huán)境中的抑菌效果進行試驗。在此過程中，將提取物配成每毫升O.05克的溶液，取其中的1毫升放在事先已經(jīng)編好號的玻璃瓶之中，然后將它們分別放在零下19攝氏度、4、60以及80、90、100和120攝氏度的環(huán)境下，保持20分鐘左右。同時，設(shè)常溫對照，并且采用用瓊脂擴散法對其中的抑菌效果進行檢測。對在對不同酸堿度處理之后的抑菌效果進行檢測時，抑菌性物質(zhì)在不同酸堿條件下的效果進行試驗；將抗菌性提取物配成濃度為每毫升O.05克的溶液，然后分別用鹽酸溶液、氯化鈉溶液將提取物的酸堿度調(diào)節(jié)成2、4、6、8以及10和12，取其中的1毫升放在編號玻璃瓶之中，并用普通的酸堿值進行對照，同樣用瓊脂擴散法對抑菌效果進行檢測。

在對于不同光照條件下的抑菌效果進行檢測時，主要是將提取的抑菌性物質(zhì)置于不同的光照條件下，然后對它們的抑菌效果進行對比試驗。在此過程中，首將提取物配成濃度為每毫升O.05克的溶液；分別取上述溶液1毫升，放在事先編好號碼的玻璃瓶之中，然后將其置于日光下1、6、12、24、48以及72和84個小時；同時，接受紫外線處理時間分別是5、10、15、20以及25和30分鐘，并且將沒有做任何處理的樣品作為具體對照。

在測定最低抑菌濃度時，采用的是刃天青法，即把刃天青事先配成濃度為每毫升100μg，并且菌懸液配成每毫升106cfu的濃度；將配制好的溶液取出大約7.5毫升，使之與調(diào)好的5毫升菌懸液混合均勻。準備好無菌孔板，其中將第11列放在每毫升100μg的溶液100μL。自第l列至第10列、第12列，均放在100μL的刃天青、菌懸液。做好上述工作以后，將樣品配制成一定的濃度容易，吸取其中的100μL放在第1列，使其能夠充分的混合；然后從第1列吸大約100μL放在第2列，依次進行操作，直到第10列，稀釋兩倍，至第10列需倒掉100μL；將細菌培養(yǎng)板放在大約37深度的環(huán)境下培養(yǎng)5至6個小時的時間，真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)時間相當長一些，以12至16個小時為宜。通過對比試驗結(jié)果可知，細菌有抑菌活性從原來的紅色變成了現(xiàn)在的藍色；真菌有抑菌活性從原來的藍色變成現(xiàn)在的紅色，其中顏色的轉(zhuǎn)折點是最低抑菌濃度。

2 油茶粕中抑菌活性物質(zhì)的提取試驗結(jié)果及抑菌效果分析

基于以上對油茶粕中的提取物不同極性條件下的抑菌效果結(jié)果試驗分析可知，油茶粕提取物對不同條件下的菌株產(chǎn)生的抑菌效果存在著較大的差異性，而且不同極性下的同濃度條件，對不同的菌種抑菌效果也不盡相同。比如，濃度為80%的乙醇提取物抑菌活性是最強的，尤其對革蘭氏陽性菌、真菌等抑制效果非常的好。

油茶粕提取物經(jīng)過光照以后，其抑菌效果也呈現(xiàn)出一定的差異性。油茶粕提取物在景觀日光、紫外光處理以后，抑菌效果變化并不明顯，這說明油茶粕提取物在光照、紫外線條件下，相對比較穩(wěn)定。在對最低抑菌濃度測定過程中，如上文所示，采用的是刃天青技術(shù)手段對80%的乙醇油茶粕提取物抑菌濃度進行檢測，結(jié)果表明提取物對金黃色葡萄糖球菌、大腸桿菌以及沙門氏菌和蘇云金桿菌等菌種，抑菌效果非常的顯著，具體如表1所示。

3 結(jié)語

本文主要對油茶粕抗菌活性物質(zhì)提取、抑菌效果進行了實驗研究，油茶粕提取物在120攝氏度條件下處理大約20分鐘、或者在不同的光照和在酸性條件進行處理，依然保持一定的穩(wěn)定性，這說明油茶粕中提取的抗菌活性物質(zhì)成分比較穩(wěn)定；經(jīng)最低抑菌濃度測定實驗，油茶粕提取物對革蘭氏陰性菌、真菌的抗菌效果比較好，而且對熱血動物基本上不會產(chǎn)生毒性影響，因此值得應用和推廣。

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