摘要：目的：建立測定米粉中甲醛次硫酸氫鈉（吊白塊）含量的高效液相色譜法。方法：依據(jù)在酸性環(huán)境下中，樣品中的甲醛次硫酸氫鈉分解釋放出的甲醛溶解到水中，提取后的甲醛與2，4-二硝基苯肼發(fā)生加成反應，生成黃色的2，4-二硝基苯腙，用正己烷萃取后，經(jīng)高效液相色譜儀分離測定。結(jié)果：經(jīng)優(yōu)化試驗確定樣品振蕩時間為20min，最佳衍生時間為30min，正己烷萃取時間為20min，利用高效液相色譜分離測定，試驗條件確定為乙腈：水（60：40），流速為0.3mL/min，分離效果最好，利用標準甲醛衍生物保留時間對照定性，標準曲線定量測定次硫酸氫鈉甲醛含量，該方法檢出限為0.2mg/kg，回收率為94.6%～96.2%。結(jié)論：所建方法可用于米粉中的甲醛次硫酸氫鈉的高效檢測。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法 甲醛次硫酸氫鈉 米粉

中圖分類號：TS210 文獻標識碼：A 文章編號：1672-5336（2014）18-0021-03

吊白塊，又稱雕白塊、雕白粉，化學式：NaHSO2·CH2O·2H2O，易溶于水，水溶液在60 ℃以上分解出甲醛、二氧化硫、硫化氫等有害物質(zhì)[1]。吊白塊有漂白、增色、改善食品口感及防腐的作用，對米粉漂白的同時也破壞了大量維生素。在酶的作用下生成兩個分子的維生素A，β—胡蘿卜素的轉(zhuǎn)變率為100%，α型為53%，γ型為28%[2]。甲醛又稱蟻醛，具有強烈的刺激性氣味，對人體的呼吸、免疫、神經(jīng)及心血管系統(tǒng)均會產(chǎn)生損害，甚至致癌。少數(shù)個體加工者無視法律法規(guī)規(guī)定和消費者人身安全，擅自在米粉制作過程中添加甲醛次硫酸氫鈉即吊白塊以達到漂白、改善口感、防腐等作用。食品中甲醛進入人體后對腸道黏膜有刺激作用， 可引起肺水腫，肝、腎充血及血管周圍水腫，甚至可能致癌。甲醛還能降低人體內(nèi)超氧化物歧化酶（SOD）水平，使機體產(chǎn)生應激狀態(tài)和脂質(zhì)過氧化，從而引起組織細胞損傷和免疫功能下降，同時對記憶力、注意力、感知速度等神經(jīng)行為功能也有一定程度的影響。國家明令禁止在食品中使用甲醛次硫酸氫鈉 （吊白塊），還針對生產(chǎn)、銷售的米粉、粉絲、腐竹等食品是否含有吊白塊，組織開展了全國性質(zhì)量監(jiān)督專項執(zhí)法檢查。因此，檢測米粉中的甲醛次硫酸氫鈉是控制米粉食品安全的重要手段。本實驗參照GB/T21126-2007并做了相關(guān)改進。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Ultimate 3000高效液相色譜儀（賽默飛世爾）：配在線脫氣系統(tǒng)、自動進樣器、柱恒溫箱，四元梯度泵，紫外可變波長檢測器、變色龍色譜工作站；PL203分析天平（梅特勒）；6202型樣品粉碎機（新鎮(zhèn)）；SHZ-B型水浴恒溫振蕩器（上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）；STRATOS臺式高速離心機（賽默飛世爾）。正己烷（色譜純，美國天地公司），鹽酸、氯化鈉、高錳酸鉀、磷酸氫二鈉、2，4—二硝基苯肼均為分析純（成都市科龍化學試劑廠）；實驗用水均為一級水。

甲醛標準溶液（中國計量研究院，10.0mg/mL，基體為純水）。

1.2 標準溶液的配制

精密量取甲醛標準液1mL加水并稀釋至250mL，形成40μg/mL的標準貯備液，放置4℃冰箱中。精密量取5mL甲醛標準貯備液加水并稀釋至100mL搖勻，形成2μg/mL的工作標準液（應使用當天配制）[3]。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：賽默飛世爾Syncronis C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈-水（60：40）；柱溫：35℃；流速：0.3mL/min；紫外檢測器波長：355nm。高效液相色譜圖見圖1。

2.2 樣品的制備

將米粉切碎，至于干燥箱中105℃±5℃烘干后，粉碎成粉，備用。精確稱取粉末5g，按GB/T21126-2007上的處理方法進行前處理。

2.3 結(jié)果

分別精密量取工作標準液，0mL、0.25mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、4.0mL置25mL比色管中（相當于0.0μg、0.5μg、1.0μg、2.0μg、4.0μg、8.0μg），分別加入2.0mL鹽酸-氯化鈉溶液、1mL磷酸氫二鈉溶液、0.5mL衍生劑，然后補加水至10mL，蓋上塞子搖勻，作為對照溶液；置50℃水溶中加熱衍生后，取出用流水冷卻至室溫。精密加入5.0mL正己烷，將比色管傾斜放置。

取10μL萃取液進樣，記錄色譜，以甲醛標準工作液中甲醛的質(zhì)量（μg，X）為橫坐標、甲醛衍生物苯腙的峰面積（Y）為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方程Y=2.8641X+1.1338，R2=0.9990。結(jié)果表明，進樣量為0～8μg時，甲醛的質(zhì)量與甲醛衍生物苯腙的峰面積呈良好線性關(guān)系，檢出限為0.2mg/kg（S/N=3）。通常甲醛或吊白塊作為食品添加劑在食品中的加入量遠高于10μg/g才有防腐的效果，故此本方法檢出限完全滿足食品分析的要求。

樣品測定：稱取粉末5.0g，準確加入50.0mL鹽酸-氯化鈉溶液放入水浴振蕩器中，振蕩后，離心取上清液2.0mL于25mL比色管中，加入1mL磷酸氫二鈉溶液、0.5mL衍生劑，然后補加水至10mL，蓋上塞子搖勻，作為對照溶液；置50℃水溶中加熱衍生后，取出用流水冷卻至室溫。精密加入5.0mL正己烷，將比色管傾斜放置后取萃取液上高效液相色譜儀測定。

3 討論

3.1 樣品提取時間的選擇

樣品加鹽酸-氯化鈉溶液后搖勻放置過夜，與樣品振蕩提取20min、30min、40min、50min后離心處理后的回收率比較，振蕩40min后回收率最好，可達到95%以上，滿足實驗要求。見表1。

3.2 衍生時間的選擇

GB/T21126-2007規(guī)定衍生條件為50℃衍生40min，選取衍生20min、30min、40min、50min來確定最佳衍生時間，最終顯示衍生30min回收率最高。見表1。

3.3 萃取時間的選擇

GB/T21126-2007規(guī)定加正己烷后萃取1小時，并每5min振搖幾次，選取萃取20min、30min、40min、50min，并放置搖床持續(xù)振搖來確定最佳萃取時間，最終顯示萃取20min即可達到最佳回收率。見表1。

3.4 流動相比例和流速的選擇

參考標準要求流動相為乙腈-水（70：30），流速為0.8mL/min，發(fā)現(xiàn)在此條件下甲醛衍生物苯腙的峰形很差，通過改變色譜條件最終確定乙腈-水（60：40），流速為0.3mL/min，苯腙峰能夠滿足要求。

3.5 樣品測定

按上述條件處理樣品后，精密吸取對樣品溶液和標準溶液的正己烷萃取液各10μL，分別注入液相色譜儀，測定峰面積，按標準曲線法計算含量，同時做回收率。結(jié)果見表2。由表2可知，甲醛含量計算結(jié)果均不超過10μg/g，檢測限度符合標準規(guī)定，反映我市米粉樣品質(zhì)量狀況符合要求。

4 結(jié)語

利用優(yōu)化的提取、衍生化條件能更好地使提取甲醛衍生物—2，4-二硝基苯腙，衍生物在高效液相色譜上分離效果好，利用該法測定米粉中甲醛次硫酸氫鈉線性、重復性好。本方法樣品處理簡單、結(jié)果計算直觀，能夠較準確地反映米粉中添加甲醛次硫酸氫鈉的量，可以制定較成熟的檢驗操作規(guī)范，為日常的食品監(jiān)督抽驗中較快速的檢驗依據(jù)。

參考文獻

[1]劉華.面制食品中甲醛合次硫酸氫鈉測定方法可行性討論.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2002，12（4）：485-486.

[2]李慶龍.面粉漂白劑的安全及對營養(yǎng)破壞評價.陜西糧油科技，1995，20（l）：44-47.

[3]GB/T21126-2007，小麥粉與大麥粉及其制品中甲醛次硫酸氫鈉含量的測定[S].