摘要：本文綜述了當(dāng)前檢測(cè)食品中甜蜜素的方法，包括氣相色譜法（FID檢測(cè)器、ECD檢測(cè)器、）、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用、液相色譜法（紫外檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器、二極管陣列檢測(cè)器）、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用、離子色譜法等常見(jiàn)分析方法。

關(guān)鍵詞：甜蜜素 測(cè)定 研究

中圖分類(lèi)號(hào)：TS201 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-5336（2014）18-0018-03

甜蜜素（Sodium Cyclamate） 學(xué)名環(huán)己基氨基磺酸鈉，化學(xué)式為C6H12NO3SNa，為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，無(wú)臭、味甜、易溶于水，但不溶于乙醇等有機(jī)溶劑，對(duì)熱酸堿穩(wěn)定，其水溶液呈中性，屬非營(yíng)養(yǎng)型合成甜味劑。相比較于蔗糖，在食品中添加甜蜜素可用3倍的價(jià)格獲得50～100倍的甜度。其常與糖精混合使用，在增強(qiáng)甜度并減少糖精的后苦味時(shí)，更能降低成本。甜蜜素可在清涼飲料、果汁、冰激凌、蜜餞及糕點(diǎn)等食品中作為食品甜味劑使用，也可與其它甜味劑混合使用，在醫(yī)藥上可用于肥胖癥、糖尿病等患者的甜食，同時(shí)還能起到很好的保持食品中原有風(fēng)味和延長(zhǎng)食品保存期的作業(yè)。

20世紀(jì)70年代，甜蜜素曾被懷疑有致癌性（代謝產(chǎn)生環(huán)己胺），在美、英等國(guó)被禁止使用；在多項(xiàng)長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)后，1982年JECFA排除了甜蜜素的致膀胱癌性； NRC/NAS在1985年報(bào)告甜蜜素有促進(jìn)致癌性。甜蜜素在我國(guó)于1986年被批準(zhǔn)使用，是目前我國(guó)食品行業(yè)中應(yīng)用最廣泛的一種甜味劑。食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 2760-2011規(guī)定甜蜜素在冷凍飲品、腌制蔬菜、腐乳類(lèi)、水果罐頭、復(fù)合調(diào)味料、飲料類(lèi)、配制酒、果凍、糕點(diǎn)、面包和餅干中最大使用量為0.65g/kg；在果醬和蜜餞涼果中最大使用量為1.0g/kg；果丹（餅）類(lèi)、涼果類(lèi)、話化類(lèi)（甘草制品）中最大使用量為8.0g/kg；帶殼熟制堅(jiān)果與籽類(lèi)中最大使用量為6.0g/kg，脫殼熟制堅(jiān)果與籽類(lèi)中最大使用量為1.2g/kg[1]。甜蜜素在我國(guó)廣泛使用，同時(shí)又有一定的潛在危險(xiǎn)性，為了加強(qiáng)對(duì)其特性的了解和分析，對(duì)其使用進(jìn)行更好的監(jiān)控，現(xiàn)將甜蜜素近十年來(lái)的的檢測(cè)方法綜述如下：

1 氣相色譜法

1.1 FID檢測(cè)器

氣相色譜法使用FID作為檢測(cè)器是國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.97-2003[2]中推薦的第一種方法，也是研究得最多，應(yīng)用得最廣泛的一種檢測(cè)方法。其原理是用FID作為檢測(cè)器，在硫酸介質(zhì)中環(huán)己基氨基酸磺酸鈉與亞硝酸反應(yīng)生成環(huán)己醇亞硝酸酯，使用填充柱氣相色譜法對(duì)其進(jìn)行定性和定量分析。隨著毛細(xì)管色譜柱得到了使用廣泛，多數(shù)研究人員用毛細(xì)管柱代替了填充柱。對(duì)方法進(jìn)行了不同的改進(jìn)，包括樣品的前處理，色譜柱的選擇，數(shù)據(jù)的處理均進(jìn)行了不同程度的改進(jìn)。周正香[3]、臧黎慧等[4]通過(guò)大量試驗(yàn)數(shù)據(jù)與CNAS比對(duì)結(jié)果驗(yàn)證，分析了溫度對(duì)反應(yīng)主產(chǎn)物環(huán)己醇量的影響。最終確定主副產(chǎn)物峰面積之和，能準(zhǔn)確測(cè)定甜蜜素含量。

李春娟等[5]通過(guò)分析測(cè)定發(fā)現(xiàn)溫度、時(shí)間對(duì)甜蜜素衍生化反應(yīng)平衡的影響較大，在使用衍生化氣相色譜法測(cè)定甜蜜素的準(zhǔn)確度時(shí)，甜蜜素轉(zhuǎn)化率較為理想的介質(zhì)溫度是0～5℃。在充分考慮標(biāo)準(zhǔn)溶液、樣品溶液溫度的差異時(shí)，此溫度下能夠獲得理想的準(zhǔn)確度。

1.2 ECD檢測(cè)器

關(guān)于用ECD檢測(cè)器來(lái)檢測(cè)甜蜜素的報(bào)道比較少。蘇建國(guó)[6]建立了檢測(cè)糕點(diǎn)中甜蜜素含量的ECD頂空法技術(shù)，實(shí)驗(yàn)使用亞硝酸衍生，使用頂空法提取、進(jìn)樣，HP-5毛細(xì)管柱分離，ECD檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)分析，該方法快速準(zhǔn)確。

1.3 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用

隨著氣相色譜儀的發(fā)展，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)面世，質(zhì)譜具有更高的準(zhǔn)確度與精密度。段建發(fā)[7]、李羽翡[8]采用質(zhì)譜測(cè)定食品中的甜蜜素。將樣品衍生后進(jìn)入氣相色譜-質(zhì)譜儀中檢測(cè)，利用質(zhì)譜精準(zhǔn)的定位衍生化主要產(chǎn)物環(huán)己醇亞硝酸酯來(lái)進(jìn)行定性和定量。

胡強(qiáng)等[9]建立一種快速氣相色譜-質(zhì)譜檢測(cè)方法對(duì)不同食品中低含量甜蜜素的快速檢測(cè)。不同樣品經(jīng)除雜、超聲波提取、衍生，然后經(jīng)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀定性、定量測(cè)定。

林雁飛等[10]建立了準(zhǔn)確可靠、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便的氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）選擇離子監(jiān)測(cè)法（SIM），對(duì)維生素C泡騰片中甜蜜素的測(cè)定。將樣品衍生之后使用有機(jī)試劑進(jìn)行提取，測(cè)定在選擇離子模式下進(jìn)行，用保留時(shí)間和特征離子比例定性，單離子定量。

2 比色法

比色法是一種相對(duì)古老的方法，是國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.97-2003中推薦的第二種方法，其原理是：甜蜜素會(huì)在硫酸介質(zhì)中與亞硝酸鈉反應(yīng)，產(chǎn)生環(huán)己醇亞硝酸酯，并用磺胺重氮化，其與鹽酸萘乙二胺偶合生成染料（紅色），波長(zhǎng)選擇550nm測(cè)吸光度，用標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量。劉超等[11]利用分光光度法間接測(cè)定調(diào)味面制品中甜蜜素的含量。

桑宏慶等[12]對(duì)該方法進(jìn)行了改進(jìn)，將甜蜜素中的氮轉(zhuǎn)化為銨，與水楊酸鈉-次氯酸鈉反應(yīng)（堿性條件下）生成藍(lán)色物質(zhì)，對(duì)波長(zhǎng)為658nm處的吸光度用分光光度法進(jìn)行定量。

3 薄層色譜法

薄層層析法是國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.97-2003中推薦的第三種方法，試樣經(jīng)酸化后用乙醚提取，將提取液（濃縮）點(diǎn)于薄層層析板上，展開(kāi)和顯色，根據(jù)薄層板上環(huán)己基氨基磺酸鈉的比移值和顯色斑深淺，與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，從而定性、概略和定量。此方法只能用于快速粗篩，不能精確定量。

4 高效液相色譜法

4.1 紫外檢測(cè)器

王敏[13]、張良興[14]等，采用次氯酸鈉（強(qiáng)酸條件下）將甜蜜素轉(zhuǎn)變?yōu)椤癗，N-二氯環(huán)己胺”，用正己烷或環(huán)己烷萃取的柱前衍生法，將甜蜜素衍生后在314nm或310nm檢測(cè)波長(zhǎng)下進(jìn)行色譜分析。該法操作簡(jiǎn)單，適合大范圍的，適用于低含量甜蜜素的檢測(cè)。

4.2 示差折光檢測(cè)器

徐燁等[15]在同時(shí)測(cè)定碳酸飲料中甜蜜素、山梨酸、苯甲酸和糖精鈉時(shí)，使用了高效液相色譜示差折光檢測(cè)器。示差折光檢測(cè)器是利用連續(xù)測(cè)定參比池與樣品池中溶液折射率變化來(lái)測(cè)量物質(zhì)含量的檢測(cè)器，具有較強(qiáng)的通用性。但是其靈敏度不高，不適合于痕量分析，對(duì)溶劑和溫度的變化很敏感，不能用于梯度洗脫。

4.3 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器

蒸發(fā)光散射檢測(cè)器利用分離物質(zhì)的沸點(diǎn)分離檢測(cè)物質(zhì)，高沸點(diǎn)組分的小液滴進(jìn)入散射池，光束穿過(guò)時(shí)將被散射，光電管接收散射光后獲得電信號(hào)，可以檢測(cè)沒(méi)有紫外吸收的有機(jī)物質(zhì)。

武金忠等[16]建立了超高效液相色譜蒸發(fā)光散射檢測(cè)法測(cè)定白酒中安賽蜜糖精、甜蜜素、阿斯巴甜、紐甜和甜菊糖苷等6種甜味劑的方法，樣品前處理簡(jiǎn)單，只需對(duì)樣品進(jìn)行脫醇。

4.4 二極管陣列檢測(cè)器

二極管陣列檢測(cè)器的原理是從氘燈發(fā)出的紫外光通過(guò)一個(gè)消色差透鏡系統(tǒng)聚焦到流動(dòng)池上經(jīng)狹縫后光束照到一個(gè)全息光柵上，經(jīng)色散分光后所有波長(zhǎng)的光抵達(dá)一組光電二極管陣列上，從而測(cè)出光譜信息（幾毫秒）。該檢測(cè)器的掃描速度比色譜峰的出峰速度要快很多，故可檢測(cè)每瞬間的吸收光譜圖，提供的色譜和光譜信息極為豐富，可對(duì)每一樣品的分離峰進(jìn)行定量分析，協(xié)助對(duì)色譜峰進(jìn)行定性和純度鑒定。

蔣曉彤等[17]建立了采用二極管陣列檢測(cè)器作為檢測(cè)器同時(shí)測(cè)定甜蜜素等6種人工合成甜味劑的高效液相色譜分析方法。6種甜味劑的線性范圍在0.4～120mg/L。該方法凈化效果較好，相對(duì)快速和簡(jiǎn)便，可用于食品中6種甜味劑的同時(shí)測(cè)定。

應(yīng)洪波等[18]建立并驗(yàn)證了用高效液相色譜配二極管陣列檢測(cè)器法測(cè)定飲料中甜蜜素添加量的方法。用次氯酸鈉（酸性條件下）對(duì)樣品中甜蜜素進(jìn)行衍生化處理，處理液經(jīng)過(guò)正己烷萃取，過(guò)濾后，以高效液相色譜儀—二極管陣列檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，以相對(duì)保留時(shí)間定性，峰面積定量。該方法對(duì)飲料中甜蜜素的測(cè)定，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，最低檢出限為0.5mg/kg。

4.5 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用

質(zhì)譜分析的基本原理是先使所研究的對(duì)象形成離子，然后對(duì)形成的離子按質(zhì)荷比（m/z）進(jìn)行分離。2007年、2013年國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)總局和吉林省質(zhì)監(jiān)局分別制定了行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)與地方標(biāo)準(zhǔn)，分別用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法對(duì)進(jìn)出口食品與乳制品（含乳飲料）中環(huán)己基氨基磺酸鈉檢測(cè)[19][20]。試料經(jīng)亞鐵氰化鉀溶液、乙酸鋅溶液除蛋白，陰離子交換固相萃取柱凈化，離心后過(guò)濾，液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測(cè)定，外標(biāo)法定量。

徐春祥等[21]研究建立了在ESI負(fù)離子模式下測(cè)定白酒中甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜的液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法。該方法沒(méi)有對(duì)樣品衍生化，操作簡(jiǎn)便，檢出限為0.01mg/L，檢測(cè)靈敏度高。胡梅等[22]研究建立了HPLC/MS，測(cè)定食品中甜蜜素、苯甲酸、山梨酸和糖精鈉4種添加劑。其定量檢測(cè)限優(yōu)于0.1mg/kg，測(cè)定的線性范圍是10～5000ng/mL。徐琴等[23]等采用Agilent ZORBAX SB-C18柱分離，質(zhì)譜檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法定量檢測(cè)泡菜樣品水提物中的甜蜜素含量，線性范圍為0.1～5.0mg/kg，定量檢測(cè)限為0.1mg/kg。胡貝貞[24]等采用陰離子交換固相萃取柱處理樣品后經(jīng)C18柱分離，質(zhì)譜作為檢測(cè)器檢測(cè)食品中的甜蜜素。

5 離子色譜法

傅暉蓉等[25]建立了自動(dòng)淋洗液發(fā)生裝置-電導(dǎo)抑制離子色譜測(cè)定食品中甜蜜素的方法。其對(duì)試樣沉淀前處理，AS18陰離子分析柱分離，高純氫氧化鉀（自動(dòng)淋洗液發(fā)生器產(chǎn)生）進(jìn)行淋洗，電導(dǎo)抑制檢測(cè)，當(dāng)甜蜜素含量在0.1～100.0 mg/L范圍內(nèi)線性良好，定量檢測(cè)限為0.10 mg/kg，定性檢測(cè)限為0.030 mg/kg。該方法快速、簡(jiǎn)單、可靠。

郭瑩瑩等[26]采用淋洗液發(fā)生器陰離子交換抑制電導(dǎo)檢測(cè)法，同時(shí)分離和檢測(cè)水果飲料中的甜蜜素、阿斯巴甜、安賽蜜和糖精4種甜味劑。該方法得到的高純度氫氧根淋洗液為流動(dòng)相，結(jié)合在堿性溶液中甜蜜素等4種甜味劑電離呈陰離子的特點(diǎn)，采用陰離子交換抑制電導(dǎo)進(jìn)行檢測(cè)得到很低的背景電導(dǎo)。試驗(yàn)操作簡(jiǎn)單，不需對(duì)樣品衍生處理，靈敏度高分析速度快，甜蜜素的檢測(cè)限為0.045 mg/L，可以實(shí)現(xiàn)甜蜜素的高靈敏度檢測(cè)和分離。鄧永利等[27]采用了833型DialyssUnit英藍(lán)滲析技術(shù)對(duì)牛奶進(jìn)行滲析處理后通過(guò)離子色譜檢測(cè)其中的甜蜜素含量，檢測(cè)限為0.05mg/L。

卜宇宏等[28]同時(shí)對(duì)白酒中甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜的含量進(jìn)行測(cè)定。其選用IonPacRAG17-C為保護(hù)柱，IonPacRAS17-C為分析柱，樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋過(guò)濾后進(jìn)行直接進(jìn)樣色譜分析，建立離子交換-電導(dǎo)檢測(cè)離子色譜法。確定三種物質(zhì)的檢出限分別為：0.035mg/L，0.092mg/L，0.083mg/L。該方法檢驗(yàn)快速、準(zhǔn)確，相關(guān)性好，靈敏度高，線性范圍廣。

趙丹瑩[29]、王愛(ài)樂(lè)等[30]分別建立了快速、簡(jiǎn)便的同時(shí)測(cè)定果汁和碳酸飲料中甜蜜素、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜含量的固相萃取離子色譜法。其樣品過(guò)尼龍濾膜和Cleanert-IC C18前處理柱，以除去雜質(zhì)和有機(jī)物，通過(guò)IonPac AS17-C陰離子交換分析柱，經(jīng)離子色譜電導(dǎo)檢測(cè)后，測(cè)定5種添加劑含量。該方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、可靠，尤其適用于大批量的樣品測(cè)定。

參考文獻(xiàn)

[1]GB2760-2011食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)[S].

[2]GB/T5009.97-2003 食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的測(cè)定[S].

[3]周正香.食品中甜蜜素氣相色譜方法測(cè)定的研究[J].食品科技，2012，37（4）：274-276，280.

[4]臧黎慧，錢(qián)曉燕，史俊文，等.食品中甜蜜素檢測(cè)定量方法的改進(jìn)[J].江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué)，2013，24（1）：65-67.

[5]李春娟，李東剛，劉曉玲.氣相色譜法分析溫度、時(shí)間對(duì)甜蜜素衍生化反應(yīng)平衡的影響[J]. 化學(xué)工程師，2013，7：78-79，82.

[6]蘇建國(guó).ECD頂空法測(cè)定糕點(diǎn)中甜蜜素含量方法研究[J].淮陰工學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，20（1）：69-71.

[7]段建發(fā)，林超，林文.氣相色譜—質(zhì)譜法測(cè)定食品中甜蜜素[J].中國(guó)分析化學(xué)，2012，48（9）：1112-1114.

[8]李羽翡，周春紅.頂空氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定甜蜜素初探[J].食品與發(fā)酵科技，2012，48（2）：101-103.

[9]胡強(qiáng)，王延云.氣相色譜-質(zhì)譜法對(duì)不同食品中甜蜜素的測(cè)定[J].食品科學(xué)，2009，30（14）：235-237.

[10]林雁飛，胡小鐘，王鵬，等.氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定維生素C泡騰片中的甜蜜素[J].光譜實(shí)驗(yàn)室，2006，23（2）：338-341.

[11]劉超，羅紅霞，句榮輝，等.分光光度法間接測(cè)定調(diào)味面制品中甜蜜素的含量[J].中國(guó)食品添加劑，2013，1：222-226.

[12]桑宏慶，王麗，王光新.分光光度法測(cè)定甜蜜素[J].中國(guó)調(diào)味品， 2011，3（36）：105-108.

[13]王敏，郭德華，韓麗，等.HPLC法快速分離和檢測(cè)食品中微量甜蜜素含量[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2007，17（8）：1421-1422.

[14]何良興，林賽君，柯春暉，等.高效液相色譜柱前衍生法測(cè)定蜜餞中的甜蜜素[J].食品科學(xué)，2009，30（04）：204-206.

[15]徐燁，李麗君，王乃芝，等.高效液相色譜法測(cè)定飲料中防腐劑和甜味劑[J].食品科學(xué)，2008，29（6）：339-341.

[16]武金忠，鐘其頂，王昌祿，等.UPLC-ELSD 同時(shí)測(cè)定白酒中六種甜昧劑方法初探[J].釀酒，2008，35（1）：65-68.

[17]蔣曉彤，陳國(guó)松，姜玲玲，等.高效液相色譜法同時(shí)檢測(cè)6種甜味劑[J].食品科學(xué)，2011，32（06）：165-168.

[18]應(yīng)洪波，楊曉燕，艾明.高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器測(cè)定飲料中甜蜜素添加量[J].現(xiàn)代科學(xué)儀器，2013，8（4）：190-192.

[19]SN/T1948-2007進(jìn)出口食品中的環(huán)己基氨基磺酸鈉的檢測(cè)方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法[S].

[20]DBS22/006—201食品安全地方標(biāo)準(zhǔn)乳制品及含乳飲料中環(huán)己基氨基磺酸鈉的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法[S].

[21]徐春祥，秦金平.液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用直接測(cè)定白酒中的甜蜜素[J].食品與發(fā)酵工程，2006，32（2）：106-107.

[22]胡梅，王駿，祝建華. HPLC/MS 測(cè)定食品中的苯甲酸、山梨酸、甜蜜素、糖精鈉[J].糧食與食品工業(yè)，2010，l17（3）：60-62.

[23]徐琴，牟志春，郝杰，等.高效液相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定輸韓泡菜中的甜蜜素[J].食品科學(xué)，2012，33（04）：186-188.

[24]胡貝貞，宋偉華，董文洪.固相萃取-液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定黃酒中的甜蜜素[J].化學(xué)分析計(jì)量，2012，1，21（1）：55-57.

[25]傅暉蓉，謝維平，黃盈煜，等.自動(dòng)淋洗-電導(dǎo)抑制離子色譜法測(cè)定食品中甜蜜素[J].中國(guó)食品衛(wèi)生雜志，2007，19（2）：126-128.

[26]郭瑩瑩，朱巖，葉明立.淋洗液發(fā)生器離子色譜抑制電導(dǎo)法測(cè)定甜味劑[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)（理學(xué)版），2004，3（14）：435-437.

[27]鄧永利，周光明，羅振亞，等.離子色譜法直接測(cè)定牛奶中的甜蜜素[J]. 西南大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2007，29（7）：79-82.

[28]卜宇宏，李明，李靜.離子色譜測(cè)定白酒中甜蜜素、糖精鈉和安賽蜜[J]釀酒，2011，38（5）：71-73.

[29]趙丹瑩，溫雅，郭蒙京，等.果汁中5種添加劑固相萃取離子色譜測(cè)定法[J].職業(yè)與健康，2013，29（6）：699-701，704.

[30]王愛(ài)月，翟志雷，盧素.離子色譜法同時(shí)測(cè)定碳酸飲料中5種添加劑的方法研究[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2013，40（11）：2106-2109.