李偉　陳麗娟　王加志

皮膚光老化屬于光感性皮膚病范疇，本病的發(fā)生除與光線、光感物有關(guān)外，個體敏感性在發(fā)病過程中占重要地位。其臨床主要表現(xiàn)為皮膚紋理改變（干燥粗糙、皺紋加深）和皮膚色素異常（點狀色素沉著或色素減退斑點），嚴(yán)重者可誘發(fā)癌變。發(fā)病機制為表皮細胞萎縮，黑素細胞數(shù)量減少或分布局限，膠原纖維、彈力纖維組織結(jié)構(gòu)缺失，無定形彈力蛋白樣物質(zhì)沉積，毛細血管擴張等病理組織學(xué)改變等特點[1]?，F(xiàn)代研究認(rèn)為皮膚光老化的發(fā)生機理，主要集中在基質(zhì)異常降解、自由基、免疫抑制三方面[2-4]，其中自由基損傷一直是研究熱點，而隨著研究的深入，研究重點也由防護UV損傷到抗膠原降解和調(diào)節(jié)細胞信號通路上。

早在《素問·上古天真論》就有：“天壽過度，氣脈常通，腎氣有余也”的認(rèn)識，明確提出腎氣盛衰是機體生長壯老已之根本，也是判斷生長發(fā)育狀況及衰老程度的客觀標(biāo)志?！镀諠健ぶT虛門·補虛駐顏色》有云：“夫血氣者人之神，又心者生之本，神之變，其華在面，其充在血脈，服藥以駐顏色，當(dāng)以益氣血為先”，指明了中醫(yī)藥抗衰美容的治療方向。近年來，我國學(xué)者運用補益中藥在防治光老化方面進行了各種嘗試，肯定了中醫(yī)藥對皮膚光老化的防治作用，現(xiàn)分類綜述如下。

1 補腎藥

1.1杜仲：目前對杜仲的研究主要是其乙醇提取物對抗紫外線致皮膚成纖維細胞（ESF-1）皮膚角質(zhì)形成細胞（HaCaT細胞）光老化的作用上，以UVA、UVB梯度劑量照射細胞建立光老化模型，用不同濃度的杜仲乙醇提取物干預(yù)，測定細胞培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶（LDH）、超氧化歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量，采用ELISA法檢測細胞培養(yǎng)液中Ⅰ型膠原蛋白（ColⅠ）、基質(zhì)金屬蛋白酶-1（MMP-1）、基質(zhì)金屬蛋白酶-3（MMP-3）的含量。發(fā)現(xiàn)杜仲50%乙醇提取物能明顯提高細胞活性，提高SOD活性，降低細胞中的MDA含量及LDH活力，并且能抑制UVA引起的MMP-1及MMP-3的異常分泌，降低ColⅠ的降解，在體實驗與細胞實驗中均證實杜仲通過提高細胞抗氧自由基的能力，對UVA和UVB致ESF-1 細胞及HaCaT細胞的光老化具有良好的防護作用[5-7]。

1.2冬蟲夏草：通過在體和細胞實驗兩種方式，研究其主要活性成分蟲草多糖（CordycepsPolysac charides，CP）對光老化的保護作用，以8-甲氧補骨脂素聯(lián)合UVA（8-MOP/UVA）誘導(dǎo)皮膚成纖維細胞和小鼠皮膚致光老化，用HE染色、MTT、羥脯氨酸、丙二醛（MDA）含量檢測及SOD活力分析等方法觀察蟲草多糖對成纖維細胞光老化過程中的形態(tài)、活力、膠原合成及抗氧化能力的影響。結(jié)果光老化組細胞發(fā)生形態(tài)改變，增殖能力明顯下降，羥脯氨酸含量下降，MDA含量升高，SOD活力下降，蟲草保護組明顯改善[8-9]。

2 補氣藥

2.1黃芪：王詩晗[10]以無毛小鼠UV照射建立光老化模型，以黃芪醇提物不同濃度（4g/Kg，8g /Kg，16g /Kg）混懸液灌胃給藥進行干預(yù)，通過觀察不同組別的小鼠皮膚光老化模型皮膚組織中HYP含量、MDA含量及SOD活性的變化，來評價皮膚受損程度和藥物的防治作用。發(fā)現(xiàn)各濃度的黃芪醇提物均可提高無毛小鼠皮膚組織SOD活性和增加HYP含量，減少MDA生成，呈劑量依賴。李燃等[11]探討黃芪甲苷水包油乳膏外用對皮膚光老化的保護作用機制。以BALB/c小鼠為實驗對象，分為模型組、模型+基質(zhì)組、模型+黃芪甲苷組和正常對照組。RT-PCR測定轉(zhuǎn)化生長因子受體II（TGF-βRII）、Smad 7的mRNA表達水平，免疫組化觀察TGF-βRII、Smad 7在小鼠皮膚組織中的蛋白表達情況。結(jié)果黃芪甲苷可以通過上調(diào)TGF-βRⅡ表達和下調(diào)Smad 7表達而改變TGF-B通路的信號傳導(dǎo)參與抗光老化。劉昕等[12]觀察黃芪甲苷對長波紫外線（UVA）輻射導(dǎo)致的人成纖維細胞衰老的抑制以及對基質(zhì)金屬蛋白酶-1（MMP-1）和金屬蛋白酶組織抑制因子l（TIMP-1）等老化相關(guān)基因表達的影響。分離培養(yǎng)人原代成纖維細胞，分為空白對照組、黃芪甲苷組、UVA 組和UVA+黃芪甲苷組，以10J/cm2 UVA進行照射，并加入20g/ml黃芪甲苷干預(yù)處理。采用免疫組織化學(xué)染色法檢測衰老相關(guān)β半乳糖苷酶表達，以酶聯(lián)免疫吸附法檢測上清液中轉(zhuǎn)化生長因子-βl（TGF-β1）的含量，實時聚合酶鏈反應(yīng)法檢測MMP-l和TIMP-l的mRNA表達水平變化。結(jié)果： UVA組β半乳糖苷酶陽性細胞數(shù)則顯著升高，其它各組β半乳糖苷酶陽性細胞比率明顯降低；UVA照射則明顯減少成纖維細胞TGF-β1分泌量，UVA 照射前加入黃芪甲苷可增加TGF-β1分泌量；UVA 能夠誘導(dǎo)MMP-l和TIMP-1的mRNA表達水平升高，而黃芪甲苷可在一定程度上對兩種基因表達起抑制作用。黃芪甲苷可有效延緩UVA所致的人成纖維細胞光老化進程，其機制可能與促進TGF分泌和抑制膠原降解有關(guān)。

2.2紅景天：沈干等[13] 研究紅景天苷對UVB輻射誘發(fā)的人角質(zhì)形成細胞光老化的防護機制，發(fā)現(xiàn)紅景天苷能促進角質(zhì)形成細胞增殖，提高SOD、GSH、CAT等抗氧化酶的活性，減少脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的產(chǎn)生。結(jié)果證實紅景天對UVB輻射所造成的皮膚光老化的防護作用機理，可能是通過促進角質(zhì)細胞的增殖、提高抗氧化酶的活性以減少自由基損害來實現(xiàn)的。

2.3人參：鄧茂等[14]通過紫外線誘導(dǎo)經(jīng)8-甲氧補骨脂素處理過的體外培養(yǎng)真皮成纖維細胞建立光老化模型，用人參皂苷Rb與芳維A酸乙酯分別對其進行干預(yù)，免疫組織化學(xué)法檢測細胞內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-1和MMP-3）表達的改變。結(jié)果人參皂甙Rb與陽性對照芳維A酸乙酯均能明顯抑制成纖維細胞的MMP-1和MMP-3表達。人參皂甙Rb對光老化成纖維細胞有一定的防治作用，其強度與芳維A酸乙酯大致相當(dāng)。程基焱等[15]為闡明人參皂苷Rb1對光老化的防治機理，探索中藥對光老化的防治手段，建立體外培養(yǎng)成纖維細胞光老化模型，芳維A酸乙酯為陽性對照藥，免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測基質(zhì)金屬蛋白酶的表達，研究人參皂苷Rb1對光老化皮膚中成纖維細胞胞質(zhì)內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶表達的影響。結(jié)果顯示，人參皂苷Rb1與芳維甲酸乙酯對培養(yǎng)成纖維細胞胞質(zhì)基質(zhì)金屬蛋白酶的表達有顯著抑制作用；中藥組和陽性對照組與其表達的抑制作用相比較，差異無顯著性。說明人參皂苷對光老化的防護作用機理可能均通過調(diào)節(jié)MMPs活性實現(xiàn)的。

2.4絞股藍：王麗紅等[16]用絞股藍提取液灌胃給藥，研究藥物對光老化模型小鼠皮膚組織的影響，發(fā)現(xiàn)絞股藍組的小鼠皮膚組織變化與正常小鼠最為接近，不同濃度的絞股藍均能明顯提高SOD活性并使MDA含量明顯降低，中高劑量組還使HYP 含量明顯提高，絞股藍對紫外線引起的皮膚光老化的防護機理可能是提高SOD活性，清除自由基和增加HYP含量。陶冶等[17]探討絞股藍總皂苷含藥血清對光老化人永生化皮膚角質(zhì)形成細胞株（HaCaT）細胞分泌腫瘤壞死因α（TNF-α）及調(diào)節(jié)核因子-κβ（NF-κβ）表達的干預(yù)作用。采用中波紫外線（UVB）照射建立光老化HaCaT細胞模型，并給予含不同濃度絞股藍總皂苷的大鼠血清進行干預(yù)，采用ELISA、Western blot方法檢測各組細胞分泌TNF-α含量及NF-κβ蛋白的表達水平。結(jié)果與正常對照組比較，紫外線（UV）模型組細胞培養(yǎng)上清液TNF-α含量及細胞NF-κβ表達水平顯著上調(diào)；低、中、高劑量含藥血清組中TNF-α含量及NF-κβ蛋白表達水平顯著下調(diào)。絞股藍總皂苷皮膚光老化的保護作用與NF-κβ信號通路可能相關(guān)。

3 小結(jié)與展望

隨著環(huán)境的破壞、光污染的日益嚴(yán)重，皮膚光感疾病發(fā)病越來越高，人們對皮膚光老化的防治日益迫切。中藥在中醫(yī)理論指導(dǎo)下，注重辨證施治的個體化方案，更使得其在皮膚光老化的防治中占有獨特的優(yōu)勢。大部分補腎益氣藥能夠提高皮膚抗氧化酶活性，抑制ROS誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，清除和減少自由基代謝產(chǎn)物的堆積，提高或維持皮膚膠原蛋白含量、調(diào)節(jié)基質(zhì)金屬蛋白酶及TGF-β通路的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等，從分子機制上肯定了中藥對抗皮膚光老化的作用，使得中藥防治皮膚光老化有效可行。但從目前的研究可以看出，人們對中藥防治光老化的機制研究大多數(shù)集中在抗自由基和調(diào)節(jié)基質(zhì)金屬蛋白酶活性方面，對于皮膚光老化免疫機制和相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)深入研究較少。在中藥抗皮膚光老化藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究中，以提取物研究居多，單體成分較少，這也顯示了中醫(yī)藥在光老化的預(yù)防及治療方面具有巨大潛力可供發(fā)掘。怎樣合理運用現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)的研究手段，結(jié)合中醫(yī)理論，進一步探討中醫(yī)藥防治光老化的作用機理、效量關(guān)系，使中醫(yī)藥為皮膚光老化防治方面做出更大貢獻，是我們今后努力的方向。

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[收稿日期]2014-05-07 [修回日期]2014-06-10

編輯/李陽利