岑妍慧，趙飛蘭，范 蓉(綜述)，何國珍(審校)

(廣西中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，南寧 530001)

中醫(yī)根據(jù)“腎主生殖”的理論，認為不孕癥屬于腎虛證，而現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認為卵子發(fā)育成熟和排出以及精子成熟障礙是臨床不孕癥的主要原因之一，其發(fā)生均受到下丘腦-垂體-生殖腺軸等功能活動的調(diào)節(jié)。近年大量的實驗研究表明,以補腎法為主的方藥對生殖腺軸有多水平、多靶點的調(diào)節(jié)作用。該文就生殖相關(guān)的腎虛證的本質(zhì)和補腎方藥對下丘腦-垂體-生殖腺軸的作用機制進行綜述。

1 生殖相關(guān)腎虛證本質(zhì)的研究進展

1.1器官組織形態(tài)學(xué)和功能上的變化 大量的動物實驗顯示,生殖相關(guān)的腎虛證存在著下丘腦-垂體-生殖腺各器官形態(tài)學(xué)和分泌功能上的變化。陳英華等[1]和謝玲玲等[2]的實驗顯示，用“房事不節(jié)”方法12周后建立的腎虛雄性小鼠的睪丸重量、精子活動率和密度、精子畸形率、母鼠懷孕胚胎數(shù)明顯下降,精子特異性酶乳酸脫氫酶-X相對活性下降,同時可見曲細精管退化變性、生精上皮顯著變薄和出現(xiàn)空泡,生精細胞層數(shù)減少明顯。包宇等[3]的實驗提示,應(yīng)用氫化可的松建立的腎陽虛雄性小鼠出現(xiàn)體質(zhì)量下降、血清睪酮水平下降、性腺雄激素受體和mRNA表達下降。杜惠蘭等[4]的實驗表明，雄激素誘導(dǎo)無排卵腎虛模型雌性大鼠中出現(xiàn)卵巢各級卵泡減少，子宮內(nèi)膜變薄和腺體減少，卵巢和子宮的雌激素受體和孕激素受體表達水平下降。宋春風(fēng)等[5-6]的實驗顯示，醋酸可的松建立的腎陽虛大鼠的下丘腦正中隆起的結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯變化，垂體促腎上腺皮質(zhì)激素細胞和睪丸細胞出現(xiàn)結(jié)構(gòu)上的改變。李燦東等[7]研究提示腎虛原發(fā)性不孕癥患者的性激素水平低于正常健康人。錢風(fēng)雷等[8]研究觀察長期大運動量游泳運動所致腎虛大鼠發(fā)現(xiàn)其出現(xiàn)低血睪酮以及下丘腦-垂體-性腺軸各器官在光鏡和電鏡結(jié)構(gòu)上的變化。用雷公藤多苷片造成雌性生殖功能障礙大鼠腎虛模型[9-10]，結(jié)果顯示雌性小鼠動情周期紊亂、生殖激素水平降低、子宮重量減輕及血清T水平高于正常等。

1.2分子形態(tài)學(xué)上的改變 隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，對于生殖相關(guān)的腎虛證的本質(zhì)已經(jīng)深入到分子水平的研究。宋潔等[11]應(yīng)用基因芯片的方法對腎陽虛小鼠模型的基因改變，篩選出大量的差異表達基因。張昕賢等[12]采用雷公藤多苷造成的生殖功能減退腎虛模型，顯示雷公藤多苷對生殖相關(guān)基因的表達有影響。王劍等[13]的實驗應(yīng)用RNA基因芯片技術(shù)顯示，與正常大鼠相比，去卵巢組大鼠下丘腦基因譜出現(xiàn)多個基因的上調(diào)和下調(diào),這些基因與更年期綜合征腎陰虛病變密切相關(guān)。

2 補腎中藥治療生殖相關(guān)腎虛證的研究進展

2.1補腎中藥對生殖相關(guān)腎虛證動物模型的實驗研究 近些年實驗顯示補腎中藥可改善生殖相關(guān)腎虛證動物模型的形態(tài)結(jié)構(gòu)、分子結(jié)構(gòu)和調(diào)節(jié)性腺軸的分泌功能。包宇等[3]和李波等[14]的實驗顯示，淫羊藿苷可以緩解腎陽虛小鼠睪酮及性腺雄激素受體基因的表達下調(diào)以及提高腎陽虛小鼠血清的皮質(zhì)醇和睪酮的水平,并能調(diào)控促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(corticotropin-releasing hormone，CRH)和阿片黑色素促皮質(zhì)激素原(proopiomelanocortin,POMC)基因表達。郭瑞新等[15]和金紅蘭等[16]的實驗表明，冬蟲夏草可提高腎陽虛模型小鼠的生殖功能，并改善睪丸形態(tài)等指標。許翠萍等[17]實驗顯示，腎陽虛小鼠腎上腺組織形態(tài)學(xué)及超微結(jié)構(gòu)均發(fā)生退行性改變，而腎氣丸治療后可使腎陽虛小鼠異常的腎上腺細胞形態(tài)得以恢復(fù)。陳蓉等[18]應(yīng)用資沖顆粒直腸給藥能促進晚幼大鼠卵泡發(fā)育，提高去勢小鼠雌激素水平，提示補腎中藥促卵泡發(fā)育的作用可能與提高雌激素水平有關(guān)。張昕賢等[19]的實驗顯示，雷公藤生殖減退模型小鼠的精子形態(tài)、睪丸結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，同時睪酮、雌二醇、卵泡刺激素、尿人絨毛膜促性腺激素等性激素水平發(fā)生改變，而補益腎陽藥物可以改善這些改變，起到干預(yù)作用，提示中醫(yī)“腎”蘊含著下丘腦-垂體-性腺部分生殖內(nèi)分泌的功能。

2.2補腎中藥對生殖相關(guān)腎虛證的作用機制的實驗研究 大量實驗表明，補腎中藥可通過改變和調(diào)控下丘腦-腦垂體-性腺軸的形態(tài)結(jié)構(gòu)和基因而發(fā)揮作用。

2.2.1補腎中藥對下丘腦和腦垂體的調(diào)節(jié)作用 崔建梅等[20]實驗提示，用補腎中藥能提高腎陽虛大鼠模型的運動能力,其機制可能與補腎中藥提高力竭運動大鼠血清睪酮水平，同時降低大鼠血清皮質(zhì)醇水平及下丘腦室旁核c-fos的過度表達有關(guān)。孫鑫等[21]的實驗顯示，腎陽虛大鼠下丘腦中蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)α與PKCβ2的表達發(fā)生改變,?？战M大鼠與正常組大鼠存在顯著差異，而補腎中藥可調(diào)節(jié)下丘腦中PKCα與PKCβ2的表達，說明PKC的變化可能是腎虛發(fā)生的生物學(xué)機制之一。蔣淑君等[22]的實驗結(jié)果顯示，腎陽虛動物睪丸組織的鈣調(diào)蛋白mRNA的表達較正常對照高，說明腎陽虛動物性腺水平的損傷與鈣調(diào)蛋白mRNA表達升高也有關(guān)，補腎中藥淫羊藿總黃酮的補腎壯陽調(diào)整腎陽虛作用與抑制下丘腦組織鈣調(diào)蛋白mRNA基因表達可能有密切關(guān)系。李波等[14]的實驗發(fā)現(xiàn)，腎陽虛動物血中皮質(zhì)醇和睪酮水平降低的同時,下丘腦CRH基因表達量增加,同時垂體POMC基因表達量降低,而補腎中藥能改變血中激素水平以及下丘腦CRH基因和垂體POMC基因的表達情況。李嬪等[23]的實驗表明，滋陰瀉火與益腎填精中藥可通過對下丘腦生長抑素基因表達與蛋白表達的調(diào)控，調(diào)節(jié)垂體生長激素的合成及釋放。

2.2.2補腎中藥對性腺和激素受體的調(diào)節(jié)作用 補腎中藥可促進性腺的內(nèi)調(diào)節(jié)因子的分泌和調(diào)節(jié)性激素及其受體的作用，從而改變性腺的微環(huán)境,調(diào)節(jié)性腺的功能。錢汝紅等[24]的實驗提示，腎虛動物的雄激素和雄激素受體的水平下降,補腎中藥能調(diào)節(jié)這一過程,顯示腎虛時性激素水平影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能,腦內(nèi)雄激素、雄激素mRNA與5-羥色胺神經(jīng)遞質(zhì)都有相應(yīng)的變化,補腎中藥對中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能有調(diào)節(jié)作用。王莉等[25]的實驗提示，補腎中藥可以降低腎虛不孕的動物模型的血雄激素和胰島素，使胰腺雄激素mRNA表達水平下降，是不孕動物模型出現(xiàn)了排卵。趙銳等[26]應(yīng)用補腎寧對氫化可的松法復(fù)制腎陽虛模型大鼠灌服，結(jié)果顯示腎陽虛模型大鼠卵巢基質(zhì)金屬蛋白酶9 mRNA表達減弱，可能與卵泡發(fā)育異常及排卵障礙有關(guān)，補腎寧能夠通過增強腎陽虛模型大鼠卵巢基質(zhì)金屬蛋白酶9 mRNA的表達，起到促卵泡發(fā)育和促排卵的作用。李沛霖等[27]的實驗表明，補腎調(diào)沖方可通過調(diào)節(jié)卵巢顆粒細胞的分泌功能，進而改善卵巢功能。夏天等[28]的實驗證實，補腎調(diào)沖方在無卵泡刺激素作用的條件下，可直接促進顆粒細胞內(nèi)胰島素樣生長因子1 mRNA的表達，使細胞內(nèi)腺苷環(huán)磷酸的水平增加,從而調(diào)節(jié)顆粒細胞增殖與分泌功能。補腎中藥可通過調(diào)節(jié)卵巢性激素的分泌及其受體的水平，而影響卵泡的發(fā)育和排卵。陳金秀等[29]的補腎方劑保坤丹丸能顯著增加正常大鼠和腎虛小鼠的卵巢重量,可顯著提高正常大鼠血清卵泡刺激素、黃體生成素的水平，提示保坤丹丸可能具有微量類雌激素樣作用,能促進蛋白合成,提高卵巢和子宮重量；同時保坤丹丸還可以增加腎虛小鼠的自主活動次數(shù)、探究次數(shù)，說明保坤丹丸的治療作用不是單純改善生殖內(nèi)分泌的功能,可能還參與全身各系統(tǒng)的調(diào)節(jié),尤其對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有一定的調(diào)節(jié)作用。

3 結(jié) 語

生殖相關(guān)的腎虛證存在著多個器官的組織形態(tài)學(xué)和功能上的改變，尤其以下丘腦-腦垂體-生殖腺軸系列器官系統(tǒng)組織學(xué)形態(tài)上的變化和功能上的改變最為顯著，對生殖相關(guān)的腎虛證的研究目前已經(jīng)深入到基因和分子水平?；诖耍a腎中藥對生殖相關(guān)的腎虛證的治療作用機制研究也取得了很大的進展，但仍存在一些不足，特別是對生殖相關(guān)的腎虛證動物模型的造模法的客觀性仍有待于進一步探討和商榷。

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