方應(yīng)權(quán)

（重慶三峽醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校藥學(xué)系，萬州404120）

巫溪大寧黨參不同的炮制方法對5-HMF的含量影響※

方應(yīng)權(quán)

（重慶三峽醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校藥學(xué)系，萬州404120）

目的對5-羥甲基糠醛在大寧黨參炮制研究中的現(xiàn)狀進(jìn)行系統(tǒng)的分析，為大寧黨參炮制研究提供科學(xué)依據(jù)。方法對大寧黨參炮制的炮制方式、輔料等因素進(jìn)行改變，測定5-HMF含量，考察對5-羥甲基糠醛含量的影響。結(jié)果大寧黨參經(jīng)過炮制后產(chǎn)生5-羥甲基糠醛成分，其中蜜制產(chǎn)生的5-羥甲基糠醛含量最高。結(jié)論5-羥甲基糠醛在炮制過程中產(chǎn)生，其作用和意義仍需進(jìn)一步研究。

大寧黨參；5-羥甲基糠醛；炮制

5-羥甲基糠醛（5-HMF）是葡萄糖等單糖化合物在弱酸或高溫等條件下脫水產(chǎn)生的一個(gè)醛類化合物，廣泛存在于含有糖類物質(zhì)的中藥中。在中藥研究中，已經(jīng)從黨參、西南忍冬、云木香、板藍(lán)根、半夏、紅花、沙棘等分離得到了5-HMF。在中藥復(fù)方生脈散煎劑中分離鑒定了原三種藥材中沒有的5-HMF，并具有很好的抗氧化及心血管系統(tǒng)作用［1-4］。近年來研究發(fā)現(xiàn)許多中藥經(jīng)炮制加熱后產(chǎn)生5-HMF或者使其含量明顯增加，本文就5-HMF在中藥黨參炮制中的含量因素進(jìn)行探討，試圖發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生5-HMF的原理及外在因素。

1 炮制方法

1.1酒制取黨參用米酒拌勻，放置1小時(shí)，炒或烘干。每黨參500g，用米酒60g（《集成》）［5］。

1.2蜜制取煉蜜，用適量開水稀釋后，加入黨參片拌勻，燜透，置鍋內(nèi)，用文火加熱，炒至黃棕色，不黏手時(shí)取出放涼。每黨參片100kg，用煉蜜20kg［6-8］。

1.3土制先將灶心土置鍋內(nèi)炒松，倒入黨參，用中火炒至表面呈土黃色，聞到黨參香氣為度，取出，篩去土，放涼。每黨參500g，用灶心土150g（《四川中藥炮制規(guī)范》）。

1.4麩制取黨參片，用麩皮拌炒至徽黃色，篩去麩皮。每黨參片500g，用麩皮90g［9］。

1.5米制將米置鍋內(nèi)加熱，噴水少許至米粘貼鍋上，候煙冒出時(shí)，加入黨參段，輕輕翻炒至顯黃色，取出，放涼，去凈米粒即得。每黨參段100kg，用米20kg（《中國藥典》2010版。

2 儀器與試藥

2.1儀器高效液相色譜儀Agilent 1100；超聲波清洗器；Kromasil C18色譜柱；超純水器。

2.2試劑與藥材5-MHF（中國藥品生物制品檢定所，批號：20120012），純度98%；試劑為色譜純；大寧黨參（三峽庫區(qū)巫溪）。

2.3色譜條件色譜柱：（150*4.65μm），流動相為CH3CN：H2O，體積為5∶95，流速1ml／min，柱溫：25℃，檢測波長：280nm。

2.4對照品和供試品的配制對照品配制：精密稱取5-MHF2.88mg于10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。精密移取0.5ml定容至10ml量瓶中配成濃度為0.0150mg／ml的對照品溶液，備用。

供試品的配制：分別稱取麩炒黨參、生黨參、米黨參、蜜汁黨參0.23g左右，精密量取甲醇50ml，稱重，超聲30min，放置，補(bǔ)足重量，過濾。備用。

3 方法與結(jié)果［10］

3.1線性關(guān)系考察分別精密吸取5-MHF 2、4、6、8、10、12、14、16μl，注入色譜儀，依色譜條件操作，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，回歸方程為y＝7160.6x＋12.982，r＋0.9998，線性關(guān)系良好。說明在0.0875～0.2009μg范圍內(nèi)，有良好的線性關(guān)系。

3.2精密度試驗(yàn)精密吸取對照品5-MHF 10μl，注入色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6次，峰面積分別為1057.5、1068.5、1057.8、1046.4、1039.8，1049.01，RSD%為0.20，說明精密性良好。

3.3穩(wěn)定性試驗(yàn)稱取麩炒黨參0.2200g，精密取甲醇50ml，精密稱重，超聲45min，補(bǔ)足重量，過濾。于0、4、8、12、16、20、24小時(shí)分別精密吸取10μl注入色譜儀，計(jì)算相對偏差RSD%為1.45，說明供試品在24h內(nèi)穩(wěn)定。3.4重復(fù)性試驗(yàn)精密稱取同一批次樣品6份，稱樣量分別為0.2376、0.2469、0.2389、0.2360、0.2405、0.2396g按上述供試品方法制備，分別精密吸取10μl注入色譜儀，計(jì)算相對偏差RSD%＝1.80，重復(fù)性試驗(yàn)效果良好。

3.5回收率實(shí)驗(yàn)精密稱取樣品0.12g，加入對照品0.3455mg，按上述供品方法制備，吸取10μl連續(xù)進(jìn)樣6次，回收率的平均值為99.85%，RSD%為1.35，試驗(yàn)表明標(biāo)準(zhǔn)品平均加樣回收率效果良好。

3.6含量測定分別稱取麩炒黨參、生黨參、米黨參、蜜汁黨參0.2g左右，精密量取甲醇50ml，稱重，超聲30min，放置，補(bǔ)足重量，過濾，備用。見表1。

表1 不同炮制方法黨參中5-HMF的含量（mg／g）

3.7均差值比較對相關(guān)數(shù)據(jù)采用SPSS14進(jìn)行方差分析，見表2。

表2 均差值比較

4 討論

由上表數(shù)據(jù)分析可知，麩炒、酒制、土制、米制黨參炮制后5-MHF沒有顯著性差異，而蜜制黨參中的5-MHF卻明顯增加，與其他4組差異性明顯，可能與蜂蜜中化學(xué)成分有關(guān)，據(jù)報(bào)道［10-11］蜂蜜中含有一定的阿魏酸，而阿魏酸有幫助黨參中的糖類成分在高溫下轉(zhuǎn)化成5-MHF，而蜂蜜中本身所含糖類成分較高，而5-MHF的產(chǎn)生主要是糖類成分在高溫下分解氧化的結(jié)果，因此，蜜制黨參中含5-MHF較高，與其所用輔料有關(guān)，而黨參中炮制產(chǎn)生的5-MHF主要與外在的溫度有關(guān)。體內(nèi)的糖類成分在高溫下所產(chǎn)生的化學(xué)變化導(dǎo)致5-MHF的產(chǎn)生。

［1］嚴(yán)永清，朱丹妮，陳婷，等．5-羥甲基-2-糠醛的醫(yī)藥用途［D］．中國專利：CN1182589A，1998-5-2．

［2］元藝蘭．黨參的藥理作用及臨床應(yīng)用［J］．中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育，2012，10（19）：113-114．

［3］陳軍，舒翔．中藥黨參質(zhì)量控制研究［J］．中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育，2012，10（14）：154-155．

［4］張冬冬．黨參中微量元素測定及臨床意義［J］．中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育，2010，8（10）：200-201．

［5］中國中醫(yī)研究院中藥所．中藥炮灸經(jīng)驗(yàn)集成［M］．北京：人民衛(wèi)生出版社，1963：123．

［6］江蘇新醫(yī)學(xué)院．中藥大辭典（下冊）［M］．上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1988：1838．

［7］中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所．中藥志［M］．2冊．北京：人民衛(wèi)生出版社，1981：164．

［8］中華人民共和國藥政管理局．全國中藥炮制規(guī)范［M］．北京：人民衛(wèi)生出版社，1988：87．

［9］湖北省衛(wèi)生局．中草藥炮制規(guī)范［M］．湖北：湖北科學(xué)技術(shù)出版社，1983：74．

［10］周玥，李飛．黨參炮制原理探討［J］．世界中醫(yī)藥，2009，4（3）：116-119．

［11］耿放，王喜軍．5-羥甲基-2-糠醛（5-HMF）在中藥復(fù)方中的研究現(xiàn)狀及相關(guān)藥效探討［J］．世界科學(xué)技術(shù)·中藥現(xiàn)代化，2005，7（6）：52．

Effect on the Content of 5－HMF by the Different Processing in the Codonopsis Pilosula

Fang Yingquan
（Chongqing Sanxia medical college,wanzhou,404120,China）

Codonopsis pilosula；5-HMF；Processing

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.06.096

：1672-2779（2014）-06-0151-02

蘇 玲 本文校對：張建海

2013-12-24）

重慶市教委自然科學(xué)基金項(xiàng)目［No：kt121805］

Abstrat：Objectivesystematic analysis of status in the study on the processing of Codonopsis pilosula 5-hydroxymethyl furfural，and provide scientific basis for the research on processing of Codonopsis pilosula．MethodsCodonopsis processing processing way，accessories and other factors change，determine the content of 5－HMF，of 5-hydroxymethyl furfural content．ResultsCodonopsis 5-hydroxymethyl furfural components after processing，the honey produced 5-hydroxymethyl furfural content in the highest．Conclusion5-hydroxymethyl furfural produced in the processing process，its role and significance needs further study．