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        生、麩炒蒼術(shù)對痰濕困脾模型大鼠治療效果

        2016-06-01 08:32:24許晨曦劉玉強(qiáng)劉陽芷
        中成藥 2016年5期
        關(guān)鍵詞:麩炒藥效學(xué)蒼術(shù)

        許晨曦, 劉玉強(qiáng), 劉陽芷, 賈 蕊, 才 謙

        (遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,遼寧大連116600)

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        生、麩炒蒼術(shù)對痰濕困脾模型大鼠治療效果

        許晨曦, 劉玉強(qiáng), 劉陽芷, 賈蕊, 才謙*

        (遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,遼寧大連116600)

        摘要:目的 探究蒼術(shù)麩炒前后對痰濕困脾模型大鼠的治療作用。方法 以飲食不節(jié)、潮濕環(huán)境、強(qiáng)迫游泳方法建立痰濕困脾模型大鼠,分別口服生、麩炒蒼術(shù)以及平胃散,用ELISA法測量不同組別大鼠給藥后消化道水通道蛋白2 (AQP2)、水通道蛋白3(AQP3)以及血清抗利尿激素(ADH)、胃泌素(GAS)、淀粉酶(AMS)活性和腸管含水量等指標(biāo)。結(jié)果 生、麩炒蒼術(shù)均使造模大鼠大腸腸管含水量下降,血清GAS含有量以及AMS上升,但麩炒蒼術(shù)在恢復(fù)消化道AQP2和AQP3含有量,以及血清ADH含有量方面優(yōu)于生蒼術(shù)。結(jié)論 麩炒有提升蒼術(shù)治療大鼠痰濕困脾的作用。

        關(guān)鍵詞:蒼術(shù);麩炒;痰濕困脾;水通道蛋白;藥效學(xué)

        KEY WORDS:Atractylodis Rhizoma;stir-fryingwith bran;spleen disorder due to dampness;AQP;pharmacodynamics

        蒼術(shù)為菊科植物茅蒼術(shù)Atractylodes lancea (Thunb.)DC.或北蒼術(shù)Atractylodes chinensi s (DC.)Koidz.的干燥根莖。味辛、苦,性溫,歸脾、腎、肝經(jīng)??稍餄窠∑ⅲ铒L(fēng)散寒,明目。用于濕阻中焦,脘腹脹滿,泄瀉,水腫,腳氣痿躄,風(fēng)濕痹痛,風(fēng)寒感冒,夜盲,眼目昏澀等癥[1]。蒼術(shù)是臨床上較為常用的中草藥,其藥用價(jià)值最早記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,并且被列做上品。蒼術(shù)的燥性歷代本草多有記載。燥性作為中藥固有的性能之一,除了會(huì)導(dǎo)致某些副作用外,還具有特定的功效,如《本草綱目》中以蒼術(shù)二兩、白芍藥一兩、黃芩半兩、淡桂二錢治療脾濕水瀉[2]。脾胃在水液代謝過程中重要性極高,傳統(tǒng)中醫(yī)理論認(rèn)為脾“喜燥而惡濕”。水濕過盛則易困脾,以致脾失健運(yùn)。故傳統(tǒng)理論認(rèn)為燥濕是治療人體脾胃疾病的重要方法之一。目前學(xué)者對蒼術(shù)的健脾機(jī)制研究較為透徹,然而對蒼術(shù)的燥濕原理研究尚不充分。本實(shí)驗(yàn)通過比較蒼術(shù)在炮制前后對大鼠的腸道含水量、血清ADH含有量以及兩種水通道蛋白含有量等指標(biāo)的影響,在一定程度上闡釋了蒼術(shù)燥濕的作用機(jī)理,也為蒼術(shù)炮制的進(jìn)一步研究以及其在臨床上的合理使用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

        1 材料

        1.1 藥品與試劑 蒼術(shù)飲片(安徽濟(jì)人藥業(yè)有限公司,藥品生產(chǎn)許可證號(hào)皖20100144);麩炒蒼術(shù)為自制,藥材與麥麩比例為10∶1(具體方法參考《中國藥典》2010年版麩炒法附錄ⅡD);平胃散(麩炒蒼術(shù)24 g,厚樸18 g,陳皮12 g,炙甘草6 g,麩炒蒼術(shù)為自制,方法同上,其他飲片均購自大連陽光藥店);豬油為自制,豬肥肉購自新瑪特超市;大鼠水通道蛋白2(AQP2)、胃泌素(GAS)、抗利尿激素(ADH)酶聯(lián)免疫試劑盒(上??婆d商貿(mào)有限公司,美國R&D Systems公司分裝,批號(hào)201503);磷酸鹽緩沖液(賽默飛世爾生物化學(xué)制品有限公司,批號(hào)NZD1132);動(dòng)物飼料購自遼寧長生生物技術(shù)有限公司。

        1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wistar大鼠100只,清潔級(jí),雄性,8周齡,體質(zhì)量為180~220 g,購自遼寧長生生物技術(shù)有限公司,生產(chǎn)許可證號(hào)SCXX(遼)2010-0001。

        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 352型酶標(biāo)儀(芬蘭Labsystems Multiskan MS);AC8型洗板機(jī)(芬蘭Thermo Labsystems);TGL-16低溫高速離心機(jī)(四川蜀科儀器有限公司);GNP-9080型隔水式恒溫培養(yǎng)箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司);FSH2-2A型可調(diào)高速勻漿機(jī)(常州普天儀器制造有限公司);FA1004型分析天平(上海越平科學(xué)儀器有限公司);101-1型電熱鼓風(fēng)干燥箱(天津市泰斯特儀器有限公司),RE-52C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(河南鞏義予華儀器有限責(zé)任公司);752型紫外可見分光光度計(jì)(上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司)。

        2 方法

        2.1 給藥量計(jì)算 根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與人之間的藥物劑量換算關(guān)系[3],大鼠與人每1 kg體質(zhì)量劑量的折算系數(shù)為6.25。而蒼術(shù)在《中國藥典》2015版中的劑量為3~9 g,以60 kg成人每天服用蒼術(shù)9 g計(jì)算,則大鼠的每天的常規(guī)給藥量應(yīng)為937.5 mg/kg。

        2.2 藥品制備 將生蒼術(shù)飲片用粉碎機(jī)制成粗粉,置于10倍體積的蒸餾水中浸泡1 h,再回流提取0.5 h,冷卻后減壓抽濾,濾去藥渣。將制得的藥液部分用蒸餾水配成折合生藥量為0.06 g/mL的低質(zhì)量濃度藥液;另一部分用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮為折合生藥量為0.18 g/mL的中質(zhì)量濃度藥液以及折合生藥量為0.54 g/mL的高質(zhì)量濃度藥液,都置于冰箱中備用。麩炒蒼術(shù)的提取方法與生蒼術(shù)完全相同。平胃散與蒼術(shù)提取方法相同,提取后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮成折合生藥量為0.18 g/mL的藥液置于冰箱中備用。

        2.3 分組及造模 大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后隨機(jī)分為10組,每組10只,分別為空白組,模型組,自然恢復(fù)組,生蒼術(shù)高、中、低劑量組,麩炒蒼術(shù)高、中、低劑量組以及陽性藥物組。傳統(tǒng)中醫(yī)理論認(rèn)為“脾喜燥而惡濕”,故本實(shí)驗(yàn)在造痰濕困脾模型大鼠時(shí),讓大鼠長期居住在潮濕環(huán)境中,具體方法為使用特制鼠籠,鼠籠中間為金屬網(wǎng)格作為隔板,老鼠站立在隔板之上,隔板下為3 cm高的水。每日讓大鼠在30 cm深、20℃的水中游泳20 min,且單數(shù)日給大鼠以豬油灌胃,劑量為20 mL/kg,雙數(shù)日以4℃冷水給大鼠灌胃,劑量為20 mL/kg,以模擬饑飽不均、飲食不節(jié),造模時(shí)間為7 d。造模期間僅空白組用蒸餾水灌胃,劑量為15 mL/(kg·d),其它各組均參與造模。

        2.4 給藥 造模結(jié)束后自然恢復(fù)組用蒸餾水灌胃。生蒼術(shù)高、中、低劑量組分別用高、中、低質(zhì)量濃度生蒼術(shù)提取液灌胃,折合生藥給藥量分別為8 437.5、2 812.5、937.5 mg/kg。麩炒蒼術(shù)高、中、低劑量組分別用高、中、低質(zhì)量濃度麩炒蒼術(shù)提取液灌胃,折合生藥給藥量分別為8 437.5、2 812.5、937.5 mg/kg。陽性藥物組用平胃散提取液灌胃,折合生藥給藥量為2 812.5 mg/kg。灌胃劑量都為15 mL/(kg·d),灌胃時(shí)間均為7 d。期間自由采食飲水,動(dòng)物房溫度為26℃。

        2.5 檢測指標(biāo)

        2.5.1 血清ADH含有量測定 各給藥組在最后一次給藥后(空白組與自然恢復(fù)組在最后一次灌服蒸餾水后)1 h稱重并眼內(nèi)眥取血1 mL,取血管已用肝素抗凝,模型組在為期7 d的造模結(jié)束后取血,方法相同。將全血靜置20 min后放入離心機(jī)中以3 000 r/min離心20 min。離心后用移液槍取上清血清,置于冰箱中待測。按照大鼠抗利尿激素(ADH)酶聯(lián)免疫試劑盒說明書操作,測量樣品中ADH含有量。

        2.5.2 淀粉酶活性檢測 取一份大鼠血清用生理鹽水分別稀釋到2、4、8、16、32、64、128、256倍,再取0.1 mL樣品按試劑盒說明書操作,分別測量不同濃度的吸光度,其中稀釋32倍與64倍的樣品吸光度符合說明書要求。故本實(shí)驗(yàn)將所有血清樣本稀釋32倍后再按照試劑盒說明書進(jìn)行操作,并用紫外分光光度計(jì)于660 nm處進(jìn)行測量,記錄并處理數(shù)據(jù)。

        2.5.3 腸管含水量的測定 將取血后的大鼠脫頸處死,解剖后取大腸5 cm左右,將腸管剖開,用生理鹽水洗去食物殘?jiān)约皻埩粞?,濾紙擦干,置于一張潔凈的濾紙上,連紙稱重并記錄。將稱重后的腸管置于烘箱中在60℃下恒溫烘干10 h。10 h后取出并連帶濾紙一同稱重,計(jì)算腸管含水量。

        2.5.4 大鼠大腸AQP2和胃AQP3的含有量測定取部分大腸或靠近賁門的部分胃組織,稱重后放入10 mL的EP管中,用移液槍吸取大腸或胃質(zhì)量9倍量的磷酸鹽緩沖液(pH 7.2~7.4),加入EP管中并用高速勻漿機(jī)勻漿。將勻漿液放入低溫高速離心機(jī)中,在4℃下以3 000 r/min離心20 min,取上清液置于凍存管中,于-18℃環(huán)境中冷凍待測。按照AQP2、AQP3試劑盒的說明書進(jìn)行操作,測量樣品中的AQP2、AQP3含有量,并記錄數(shù)據(jù)。2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理,組間數(shù)據(jù)均采用單因素方差分析進(jìn)行均值比較。

        3 結(jié)果

        3.1 對大鼠行為的影響 大鼠在造模一段時(shí)間后出現(xiàn)明顯的毛發(fā)蓬松、身形消瘦、白色糞便、肛門處污穢的現(xiàn)象,而且行為上經(jīng)常抱團(tuán)、易怒、好斗。給藥后大鼠逐漸恢復(fù)正常。

        3.2 對大鼠消化道AQP2、AQP3,血清ADH、GAS含有量的影響 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,在造模之后大鼠大腸AQP2含有量出現(xiàn)了一定程度上的上升,雖然并不顯著(p>0.05),但綜合其它指標(biāo)可以看出造模成功,自然恢復(fù)效果并不明顯(p> 0.05)。各給藥組除生蒼術(shù)高劑量組外,均明顯好于自然恢復(fù)組(p<0.05,p<0.01)。生品在此指標(biāo)上低劑量的效果要好于高劑量,炮制品的量效關(guān)系并不明顯。在生品與炮制品的對比中,僅在高劑量情況下炮制品明顯好于生品(p< 0.01)。

        大鼠在造模之后胃AQP3含有量顯著上升(p<0.01),說明造模成功;自然恢復(fù)組與模型組比較,AQP3水平明顯下降,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p< 0.05);給藥后大鼠與自然恢復(fù)組比較,AQP3水平明顯下降,差異顯著(p<0.01),且呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系,劑量越高療效越好。生品以及炮制品的中、高劑量的療效還明顯好于陽性藥(p< 0.01)。炮制品的中劑量組療效明顯好于生品的中劑量組(p<0.05),其它給藥劑量生品與炮制品無明顯差異(p>0.05)。

        造模后大鼠血清胃泌素含有量明顯下降,(p<0.01),說明造模較為成功,且自然恢復(fù)效果較好(p<0.05)。生品跟炮制品的高劑量組與自然恢復(fù)組比較,明顯升高,差異均顯著(p< 0.01),說明高劑量蒼術(shù)的療效較為明確。同時(shí)生品跟炮制品的高劑量組的療效還顯著好于陽性藥物組(p<0.01)。生品與炮制品均呈現(xiàn)出一定的量效關(guān)系,劑量高者療效較好。高劑量組的炮制品療效明顯好于生品(p<0.05),其它劑量無明顯差別(p>0.05)。

        大鼠在造模之后血清ADH含有量顯著升高(p<0.05),說明造模較為成功,且自然恢復(fù)效果較好(p<0.01)。生品高劑量、炮制品中劑量與自然恢復(fù)組比較均差異顯著(p<0.01,p<0.05),且這兩個(gè)給藥組的療效還明顯好于陽性藥物組(p<0.01,p<0.05)。在各給藥劑量中,炮制品僅有中劑量組明顯好于生品組(p<0.01)。而生品高劑量組的療效明顯好于同等劑量的炮制品(p<0.01),各給藥組量效關(guān)系并不明顯。具體實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果見表1。

        表1 生、麩炒蒼術(shù)對AQP2、AQP3、GAS、ADH水平的影響(±s,n=10)Tab.1 Effects of Atractylodis Rhizoma processed w ith and w ithout stir-frying w ith bran on AQP2,AQP3,GAS and ADH levels(±s,n=10)

        表1 生、麩炒蒼術(shù)對AQP2、AQP3、GAS、ADH水平的影響(±s,n=10)Tab.1 Effects of Atractylodis Rhizoma processed w ith and w ithout stir-frying w ith bran on AQP2,AQP3,GAS and ADH levels(±s,n=10)

        注:與模型組比較,○p<0.05,●p<0.01;與自然恢復(fù)組比較,△p<0.05,▲p<0.01;與陽性藥物組比較,□p<0.05,■p<0.01;相同給藥劑量炮制品組與生品組比較,☆p<0.05,★p<0.01

        組別 AQP2/(ng·L-1) AQP3/(ng·L-1) GAS/(ng·L-1) ADH/(ng·L-1)空白組 340.93±33.19 653.75±83.39● 97.78±12.81● 86.91±7.69○模型組 386.55±53.42 1 570.92±102.26 52.77±8.29 101.35±14.38自然恢復(fù)組 367.23±22.20 1 411.50±120.04○ 65.19±8.28○ 79.61±11.21●生蒼術(shù)高劑量組 367.14±25.32 599.71±106.21●▲■ 87.73±8.11●▲■ 62.13±8.36●▲■★生蒼術(shù)中劑量組 301.79±42.64●▲ 748.31±113.08●▲■ 71.22±7.64● 96.43±10.87生蒼術(shù)低劑量組 289.55±29.83●▲ 1 150.84±132.67●▲ 62.47±9.26○ 85.94±11.83○麩炒蒼術(shù)高劑量組 245.80±36.43●▲★ 614.08±144.75●▲■ 97.93±8.31●▲■☆ 74.07±9.44●麩炒蒼術(shù)中劑量組 307.23±61.17●△ 639.81±110.79●▲■☆ 69.70±7.76● 68.90±9.71●△□★麩炒蒼術(shù)低劑量組 262.77±37.54●▲ 1 167.59±105.26●▲ 66.02±8.04● 76.22±12.71●陽性藥物組 213.59±21.48●▲ 985.82±108.77●▲ 68.10±8.25● 84.30±16.04○

        3.3 對大鼠大腸腸管含水量、體質(zhì)量以及血清淀粉酶活性的影響 根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果,大鼠在造模之后腸管含水量出現(xiàn)明顯的上升(p< 0.01),且自然恢復(fù)效果較差(p>0.05)。而蒼術(shù)對大鼠大腸的腸管含水量作用明顯,灌服高劑量生品以及中、高劑量炮制品,大鼠大腸含水量均明顯低于模型組(p<0.05,p<0.01),且具有一定的量效關(guān)系。生品以及炮制品的高劑量組的腸管含水量還明顯好于自然恢復(fù)組(p< 0.05),中、低劑量組在此方面效果甚微(p> 0.05)。相同給藥劑量情況下,炮制品與生品之間差距并不明顯(p>0.05)。

        大鼠在造模后體質(zhì)量明顯下降(p<0.05)且自然恢復(fù)效果較差(p>0.05),給藥后陽性藥物組以及生品與炮制品的中、高劑量組的體質(zhì)量明顯高于自然恢復(fù)組(p<0.05,p<0.01),給藥組呈現(xiàn)出較為明顯的量效關(guān)系,給藥量大者體質(zhì)量增加明顯。相同給藥劑量的生品與炮制品比較差別并不明顯(p>0.05),但數(shù)值上炮制品略大于生品。

        造模后大鼠血清淀粉酶活性明顯下降(p< 0.01),且自然恢復(fù)效果不明顯(p>0.05)。在給藥之后各組呈現(xiàn)出不同程度的恢復(fù)。所有劑量的炮制組與生品的中、高劑量組的血清淀粉酶活性均較自然恢復(fù)組明顯提高(p<0.05)。生品以及炮制品的中、高劑量組的恢復(fù)情況還明顯好于陽性藥物組(p<0.05),低劑量組在此方面效果甚微(p> 0.05)。各給藥組呈現(xiàn)出一定的量效關(guān)系,劑量高者療效顯著。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。

        表2 生、麩炒蒼術(shù)對大腸腸管含水量、體質(zhì)量以及AMS的影響(±s,n=10)Tab.2 Effects of Atractylodis Rhizoma processed w ith and w ithout stir-frying w ith bran moisture content of large intestine,body mass and AMS(±s,n=10)

        表2 生、麩炒蒼術(shù)對大腸腸管含水量、體質(zhì)量以及AMS的影響(±s,n=10)Tab.2 Effects of Atractylodis Rhizoma processed w ith and w ithout stir-frying w ith bran moisture content of large intestine,body mass and AMS(±s,n=10)

        注:與模型組比較,○p<0.05,●p<0.01;與自然恢復(fù)組比較,△p<0.05,▲p<0.01;與陽性藥物組比較,□p<0.05

        組別  大腸腸管含水量/%  體質(zhì)量/g AMS/(U·dL-1)空白組 44.63±3.70● 216.3±10.41○ 1 960.42±179.45●模型組 49.25±2.20 203.1±15.65 1 518.19±285.32自然恢復(fù)組 48.79±6.51 208.2±12.57 1 559.27±259.58生蒼術(shù)高劑量組 43.21±3.55●△ 264.9±21.74●▲ 1 844.06±243.46○△□生蒼術(shù)中劑量組 46.99±3.75 227.3±20.71○△ 1 796.29±132.52○△□生蒼術(shù)低劑量組 48.66±6.23 217.0±8.06○ 1 606.43±343.50麩炒蒼術(shù)高劑量 44.95±3.27●△ 267.7±24.59●▲ 1 815.28±222.50○△□麩炒蒼術(shù)中劑量 45.42±4.35○ 233.4±14.06●▲ 1 799.96±137.57○△□麩炒蒼術(shù)低劑量 47.38±6.05 219.6±18.00○ 1 773.62±153.98○△陽性藥物組 45.65±4.06○ 257.1±24.09●▲1 600.93±220.46

        4 討論

        水通道蛋白(AQP)是上個(gè)世紀(jì)末被人類所發(fā)現(xiàn)的一類與水液代謝密切相關(guān)的蛋白質(zhì),而在哺乳動(dòng)物的大腸中分布的則以AQP2為主[4]。平胃散是由蒼術(shù)、厚樸、陳皮以及炙甘草4味藥材組成的,是治療痰濕困脾證的驗(yàn)方。陳繼蘭[5]等人以平胃散治療痰濕困脾模型大鼠取得了較好的結(jié)果,大鼠的結(jié)腸中的AQP2造模后表達(dá)上升,經(jīng)過平胃散給藥后AQP2表達(dá)下降。故本實(shí)驗(yàn)選用平胃散為陽性藥物,以AQP2作為評價(jià)的指標(biāo)之一。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,痰濕困脾大鼠的大腸AQP2含有量明顯上升,以蒼術(shù)水煎液灌胃后出現(xiàn)明顯緩解,提示通過調(diào)控腸道水通道蛋白的含有量,可能是蒼術(shù)健脾燥濕的作用機(jī)理之一。

        有實(shí)驗(yàn)研究表明,濕阻中焦大鼠胃賁門處組織的AQP3表達(dá)顯著上升,在用平胃散給藥后明顯恢復(fù)[6]。有研究表明參苓白術(shù)散可顯著改善大鼠結(jié)腸組織AQP3蛋白及其mRNA的表達(dá)[7]。故本實(shí)驗(yàn)將胃AQP3含有量列為評價(jià)指標(biāo)之一。結(jié)果表明,蒼術(shù)對于痰濕困脾模型大鼠的胃組織AQP3含有量有顯著降低作用,使得轉(zhuǎn)運(yùn)到胃細(xì)胞的水液量減少,從而起到燥濕健脾的作用。

        血清胃泌素含有量是衡量脾虛模型的常用指標(biāo)之一。胃泌素主要有刺激胃酸分泌的作用,還可以促進(jìn)胃腸黏膜和壁細(xì)胞的生長,并促進(jìn)胃、腸以及胰中蛋白質(zhì)、DNA和RNA的合成[8]。李冀等人的研究顯示香,砂六君子具有抗脾虛胃潰瘍的作用,其作用機(jī)制是降低血清胃泌素水平[9]。故胃泌素是衡量脾虛動(dòng)物模型的重要指標(biāo)之一。通常認(rèn)為血清中的胃泌素含有量降低,是脾虛患者消化功能低下或紊亂的原因之一。本實(shí)驗(yàn)在造模后大鼠血清胃泌素的含有量顯著降低,說明造模成功。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,生、麩炒蒼術(shù)對痰濕困脾模型大鼠有一定治療作用,且炮制品效果略好與生品,與傳統(tǒng)炮制理論中的蒼術(shù)麩炒后健脾作用增強(qiáng)相符。

        ADH是一種重要的神經(jīng)激素。他的主要功能是提高腎遠(yuǎn)曲小管與集合管上皮細(xì)胞對水的通透性,促進(jìn)水的重吸收,使尿液得以濃縮,從而降低尿量。其分泌主要受到血清滲透壓的調(diào)節(jié)[10],正常狀態(tài)下機(jī)體ADH的分泌量與血漿滲透壓成反比[11]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,模型組大鼠血清ADH含有量相較于正常組明顯升高,說明模型組大鼠遠(yuǎn)端腎小管以及集合管的水分重吸收作用明顯加強(qiáng),排尿量減少,使其體內(nèi)的水、鈉大量積聚,從而出現(xiàn)濕阻中焦之證。模型大鼠在被灌服蒼術(shù)水煎液后其血清ADH含有量明顯下降,而高劑量組效果尤其明顯。說明蒼術(shù)可以通過抑制ADH合成和釋放,增加排尿量,促進(jìn)體內(nèi)積聚的水、鈉排泄,從而調(diào)節(jié)機(jī)體的水、電解質(zhì)平衡來實(shí)現(xiàn)燥濕的作用。

        蒼術(shù)作為臨床常用的燥濕健脾藥物,其燥性主要發(fā)揮在消化系統(tǒng)。其它具有燥性的止瀉藥物如益智仁等有降低腸管含水量的作用[12],故本實(shí)驗(yàn)選用腸管含水量作為評價(jià)蒼術(shù)燥性的指標(biāo)之一。結(jié)果顯示蒼術(shù)降低大腸腸管含水量的作用明顯,提示蒼術(shù)可能主要通過降低大腸含水量來實(shí)現(xiàn)燥濕作用,符合“蒼術(shù)生品長于燥濕,制品長于健脾”的傳統(tǒng)觀點(diǎn)。

        中醫(yī)傳統(tǒng)理論認(rèn)為“脾主運(yùn)化”,脾虛則食少納呆,故鼠體質(zhì)量也檢驗(yàn)大鼠脾虛模型是否成功的重要指標(biāo)之一。結(jié)合本實(shí)驗(yàn)其它指標(biāo)表明,蒼術(shù)可以通過調(diào)節(jié)胃泌素分泌來促進(jìn)消化,通過調(diào)節(jié)消化道水通道蛋白來改善機(jī)體水液失調(diào),從而達(dá)到增進(jìn)大鼠食欲,改善大鼠消瘦的作用。

        淀粉酶的全稱為1,4-α-D-葡聚糖水解酶,由胰腺與唾液腺分泌,可以催化淀粉以及糖原水解。當(dāng)?shù)矸勖傅姆置诹坎蛔銜r(shí)會(huì)影響食物的消化和營養(yǎng)物質(zhì)的吸收[13]。有研究表明,脾陽不足泄瀉模型大鼠的血清淀粉酶活性明顯低于正常大鼠,經(jīng)溫脾實(shí)腸顆粒治療后模型大鼠血清中血清淀粉酶活性明顯提高[14]。故淀粉酶活性是衡量脾虛模型是否成功的重要指標(biāo)之一。傳統(tǒng)中醫(yī)理論認(rèn)為脾與水液代謝密切相關(guān)。一方面燥濕可以健脾,另一方面脾的功能得到改善也有助于人體水谷精微的正常散布,從傳統(tǒng)中醫(yī)理論解釋燥濕與健脾是密不可分的。本實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,中、高劑量的蒼術(shù)對大鼠淀粉酶活性有顯著的提升作用,提示改善血清淀粉酶活性是蒼術(shù)燥濕健脾的途徑之一。

        血清淀粉酶活性與血清胃泌素含有量是衡量脾虛模型的公認(rèn)指標(biāo),本次實(shí)驗(yàn)兩項(xiàng)指標(biāo)均顯示造模成功。蒼術(shù)的健脾功效前人已有充分證實(shí),在此不做贅述。消化道AQP2、AQP3以及血清ADH含有量是影響機(jī)體水液代謝的重要指標(biāo),生品以及麩炒蒼術(shù)均有一定療效。相同給藥劑量情況下,多數(shù)組別生品與炮制品差異并不明顯,但這3種指標(biāo)均有炮制品療效好于生品的劑量組,生品僅有一個(gè)指標(biāo)的一個(gè)劑量組好于炮制品,在一定程度上說明蒼術(shù)炮制后對痰濕困脾明顯大鼠的治療作用有所提升。

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        Therapeutic effect of Atractylodis Rhizoma processed w ith and w ithout stir-frying w ith bran on rats w ith sp leen disorder due to dam pness

        XU Cheng-xi, LIU Yu-qiang, LIU Yang-zhi, JIA Rui, CAIQian*
        (School of pharmacy,Liaoning University of Traditional ChineseMedicine,Dalian 116600,China)

        ABSTRACT:AIM To study the effects of Atractylodis Rhizoma procesed with and without stir-frying with bran on ratswith spleen disorder due to dampness.METHODS The ratmodel for spleen disorder due to dampness was established by improper diet,damp environmentand forced swimming.Modeled ratswere then orally administered Atractylodis Rhizoma processed with and without stir-fryingwith bran and Pingwei Powder.Their AQP2 levels in large intestine,AQP3 levels in stomach and levels of ADH,GAS and AMS in serum weremeasured by ELISA. Theirmoisture contents of large intestine were also measured.RESULTS Atractylodis Rhizoma processed with and without stir-fryingwith bran made themoisture content in large intestine decrease and GAS level in serum and AMS increase in modeled rats.But Atractylodis Rhizoma processed with stir-frying with bran decreased more AQP2 and AQP3 levels in stomach,and ADH level in serum than it without stir-frying with bran did.CONCLUSION Stir-frying with bran can markedly improve Atractylodis Rhizoma's therapeutic effect on rats with spleen disorder due to dampness.

        *通信作者:才 謙(1972—),女,教授,從事中藥化學(xué)和中藥炮制學(xué)方面的研究。Tel:(0411)85890125,E-mail:caiqianmail@sina.com

        作者簡介:許晨曦(1989—),男,碩士生,研究方向?yàn)橹兴幓瘜W(xué)。Tel:13019469832,E-mail:jamesherb@163.com

        基金項(xiàng)目:國家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)藥行業(yè)科研專項(xiàng)項(xiàng)目(20110700712);國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81202919,81573601)

        收稿日期:2015-11-03

        doi:10.3969/j.issn.1001-1528.2016.05.004

        中圖分類號(hào):R285.5

        文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

        文章編號(hào):1001-1528(2016)05-0978-06

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