李松賓 李 紅

（河南省商丘市食品藥品檢驗(yàn)所，商丘476000）

HPLC法測(cè)定芩斛利咽合劑中黃芩苷的含量

李松賓 李 紅

（河南省商丘市食品藥品檢驗(yàn)所，商丘476000）

目的建立芩斛利咽合劑中黃芩苷的HPLC含量測(cè)定方法。方法采用ODS-C18色譜柱5μm（4.6×250mm），流動(dòng)相：甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）；流速：1.0ml·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm。結(jié)果黃芩苷在0.02638～0.1319μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r＝0.9999），平均加樣回收率為98.38%，RSD＝1.39%（n＝6）。結(jié)論本方法簡(jiǎn)便快速、結(jié)果準(zhǔn)確，可較好地控制該制劑的質(zhì)量。

芩斛利咽合劑；黃芩苷；高效液相色譜法

芩斛利咽合劑是經(jīng)過(guò)多年臨床經(jīng)驗(yàn)證明，質(zhì)量穩(wěn)定，療效可靠的醫(yī)院制劑，由黃芩，石斛，麥冬，地黃，赤芍等12味中藥材加工制成。黃芩苷為黃芩的主要有效成分，黃芩苷具有清熱燥濕，瀉火解毒，止血，安胎。用于濕溫、暑濕，胸悶嘔惡，濕熱痞滿，瀉痢，黃疸，肺熱咳嗽，高熱煩渴，血熱吐衄，癰腫瘡毒，胎動(dòng)不安的作用，對(duì)芩斛利咽合劑療效的發(fā)揮起重要作用。國(guó)內(nèi)現(xiàn)行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中未收載含量測(cè)定項(xiàng)目，為了有效地控制制劑質(zhì)量，本文采用HPLC測(cè)定了黃芩中黃芩苷的含量，可較好地控制該制劑的質(zhì)量?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1儀器AUW-220D電子分析天平Agilent 1200高效液相色譜儀。

1.2試藥黃芩苷對(duì)照品（批號(hào)：110715-201016，來(lái)源：中國(guó)藥品生物制品檢定所）；水純化水，甲醇為色譜純，磷酸為分析純。芩斛利咽合劑（樣品由柘城縣人民醫(yī)院提供，批號(hào)120615、121225、130516）。

2 方法與結(jié)果

2.1色譜條件色譜柱：ODS-C18色譜柱5μm（4.6× 250mm），甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；流速1.0ml·min-1；進(jìn)樣量10μl。理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算不低于2500［1］。

2.2對(duì)照品制備取在60℃減壓干燥4小時(shí)的黃芩苷對(duì)照品13.19mg，至容量瓶中，加甲醇適量溶解并稀釋至刻度。精密量取5ml對(duì)照溶液至50ml容量瓶中，加甲醇至刻度，作為對(duì)照品溶液。

2.3供試品溶液的制備取本品5ml，精密稱定，加70%乙醇40ml，加熱回流3小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液置100ml量瓶中，用少量70%乙醇分次洗滌容器和殘?jiān)匆簽V入同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，搖勻。精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

2.4線性關(guān)系考察取黃芩苷對(duì)照品溶液，按照“2.1”項(xiàng)色譜條件，分別進(jìn)樣2、4、6、8、10μl，記錄黃芩苷峰面積值，以峰面積（A）為縱坐標(biāo)，以對(duì)照品進(jìn)樣量（C）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：Y＝43.842X＋1.0371 r＝0.9999。結(jié)果顯示，在0.02638～0.1319μg范圍內(nèi)黃芩苷進(jìn)樣量與峰面積值呈良好的線性關(guān)系。

2.5干擾試驗(yàn)取不含黃芩的陰性樣品（自制）約5ml，照供試品溶液制備方法制備，注入液相色譜儀，進(jìn)樣量10μl，陰性對(duì)照液對(duì)測(cè)定無(wú)干擾，結(jié)果見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.6精密度試驗(yàn)取同一濃度的對(duì)照品溶液（13.19μg／ml），重復(fù)進(jìn)樣6次，每次10μl，測(cè)定黃芩苷峰面積，RSD＝0.34%（n＝6），表明儀器精密度良好。

2.7穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一濃度供試品溶液，分別在0、2、4、8、12h進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果黃芩苷峰面積RSD＝0.74%，顯示供試品溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

2.8加樣回收率試驗(yàn)稱取已知含量為2.232mg／ml的樣品6份，每份1ml，精密量取，分別精密加入對(duì)照品儲(chǔ)備液13.19μg／ml的溶液10ml，按照供試品溶液制備方法制備，按照“2.1”項(xiàng)色譜條件，分別測(cè)定，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.9含量測(cè)定取3批樣品，按制備供試品溶液制備方法制備樣品溶液，按照“2.1”項(xiàng)色譜條件測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算黃芩苷的含量，結(jié)果見表2。

表2 3批樣品中黃芩苷的含量

3 討論

本法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確，精密度高，線性關(guān)系、重復(fù)性好，空白無(wú)干擾，可作為芩斛利咽合劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)含量測(cè)定方法。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì)．中國(guó)藥典［S］．2010年版一部．北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010．

Determination of Baicalin in Qinhu Liyan Mixture by HPLC

Li Songbin Li hong
（Shangqiu Institute for food and drug control,Shandong provicine,Shangqiu,476000,China）

ObjectiveTo establish a HPLC method for determination of Baicalin in Qinhu Liyan Mixture．MethodsUsing ODS C18chromatographic column 5μm（4．6×250mm），using Methanol－water－phosphoric acid（47∶53∶0.2）as mobile phase．The content was detected at a waveleng of 280nm，the flow rate was 1.0ml·min-1．ResultsThe Baicalin have a good linear relationship in the range of 0.02638～0.1319μg（r＝9999），the average recovery was 98.38%，RSD＝1.39%（n＝6）．ConclusionThe established method is accuracy，sensitive and simple．It can be used for quality control of Qinhu Liyan Mixture．

Qinhu Liyan Mixture；Baicalin；HPLC

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.06.095

：1672-2779（2014）-06-0150-02

蘇 玲 本文校對(duì)：王偉麗

2013-12-20）