摘要：采用高效液相色譜法同時(shí)檢測(cè)鱘魚（Acipenser sturio L.）中的孔雀石綠、隱色孔雀石綠、結(jié)晶紫和隱色結(jié)晶紫。采用冷凍的方法除去樣品中所含的油脂，討論了過(guò)柱與否對(duì)回收率的影響。結(jié)果表明，該方法測(cè)得的回收率為61.24%～105.81%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.2%～6.3%，孔雀石綠的檢出限為2 μg/kg，其他3種物質(zhì)的檢出限均為1 μg/kg。該方法處理簡(jiǎn)單，節(jié)省時(shí)間，可用于大量樣品的快速分析。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜（HPLC）；鱘魚（Acipenser sturio L.）；孔雀石綠；結(jié)晶紫

中圖分類號(hào)：X131 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2013）11-2647-03

隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大，養(yǎng)殖產(chǎn)品出現(xiàn)的疾病種類亦逐年增加，導(dǎo)致孔雀石綠、結(jié)晶紫等危害性較大的藥品廣泛使用，從而對(duì)水環(huán)境和水產(chǎn)品造成嚴(yán)重污染。

孔雀石綠、結(jié)晶紫均系三苯甲烷類染料，可用作殺菌劑、驅(qū)蟲劑，是藥用染料中抗菌效果較強(qiáng)的一類。在水產(chǎn)養(yǎng)殖中對(duì)魚類水霉病、爛鰓病、爛鰭病、寄生蟲病等都有很好的預(yù)防和治療效果[1-2]。但是許多研究表明，孔雀石綠、結(jié)晶紫及其代謝物具有高毒、高殘留和致畸、致癌、致突變等副作用[3-5]，而且較難降解[6-7]，已經(jīng)被許多國(guó)家明令禁止用于食用水產(chǎn)品中。目前，孔雀石綠、結(jié)晶紫及其代謝產(chǎn)物的檢測(cè)方法主要有分光光度法[8]、高效液相法[9]、酶聯(lián)免疫檢測(cè)法[10]、液質(zhì)聯(lián)用法[11]及毛細(xì)管電泳法[12]。本研究采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定孔雀石綠 （MG）、隱色孔雀石綠（LMG）、結(jié)晶紫（CV）、隱色結(jié)晶紫（LCV）殘留量，試驗(yàn)表明，該方法操作簡(jiǎn)單，靈敏度和準(zhǔn)確度較高，可用于日常分析。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

3 小結(jié)與討論

在本試驗(yàn)中，由于鱘魚樣品中含有大量油脂，為了不影響檢測(cè)效果，除脂是非常重要的一步。采用常用正己烷除脂測(cè)得回收率偏低。為了保證回收率，本試驗(yàn)采用冷凍除脂，在二氯甲烷層合并以后，將梨形瓶放入冰箱中冷凍30 min，之后將其中上層白色物質(zhì)除去，旋蒸、定容、待測(cè)。從過(guò)柱與未過(guò)柱的鱘魚樣品測(cè)定結(jié)果可以得出，過(guò)柱與否對(duì)色譜圖的影響很大，而且過(guò)柱后用乙腈沖洗被測(cè)物很難完全沖洗下來(lái)，導(dǎo)致回收率偏低，所以為了簡(jiǎn)化試驗(yàn)步驟，減少損失，降低成本，本試驗(yàn)沒(méi)有使用固相萃取小柱。方法的回收率為61.24%～105.81%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.2%～6.3%，孔雀石綠的方法檢出限為2 μg/kg，其他3種物質(zhì)的方法檢出限均為1 μg/kg。

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