摘要:采用菌絲生長速率法對由棕櫚疫霉(Phytophthora palmivora)引起的木薯(Manihot esculenta)根腐病進(jìn)行了15種藥劑的篩選。結(jié)果表明,殺毒礬(56%代森錳鋅·8%惡霜靈WP)、氟嗎·乙鋁(5%氟嗎啉·45%三乙膦酸鋁WP)和甲霜·霜霉威(15%甲霜靈·10%霜霉威鹽酸鹽)的EC50最小,抑菌效果最好;霜霉威鹽酸鹽(72.2%霜霉威鹽酸鹽EC)的EC50最大,抑菌效果最差。建議生產(chǎn)上使用殺毒礬、氟嗎·乙鋁和甲霜·霜霉威來防治木薯根腐病。
關(guān)鍵詞:棕櫚疫霉(Phytophthora palmivora);木薯(Manihot esculenta);根腐?。凰巹┖Y選
中圖分類號:S533;S436.631.1+6 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:0439-8114(2013)11-2552-03
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 培養(yǎng)基和菌株 病原菌的培養(yǎng)采用PDA 培養(yǎng)基(參照方中達(dá)[4]的方法制備)。棕櫚疫霉菌株CPPHN01由中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院環(huán)境與植物保護(hù)研究所提供。
1.1.2 供試藥劑 供試殺菌劑共15種,其中可濕性粉劑(WP)共13種,乳油(EC)2種,具體見表1。
1.2 方法
棕櫚疫霉菌株CPPHN01在PDA平板上培養(yǎng)一周,用無菌打孔器打取直徑7 mm的菌餅備用。
采用含毒介質(zhì)法配制培養(yǎng)基[5]。分別稱取表1中所列出的殺菌劑,計算有效成分含量,WP類加入適量無菌水,EC類加入適量丙酮,制備一定濃度的母液,充分溶解后備用。用梯度濃度稀釋法制備表1中所列各殺菌劑處理濃度100倍的母液0.5 mL,加入滅菌后冷卻至約50 ℃的49.5 mL PDA培養(yǎng)基中,充分混勻后均勻倒入3個培養(yǎng)皿(直徑9 cm)中以制備帶毒平板,分別用0.5 mL無菌水(WP類)或丙酮(EC類)做對照。將病原菌菌餅接種在平板的中央,各處理接種3個平板,28 ℃培養(yǎng)5 d。用十字交叉法測量菌落直徑,每個濃度重復(fù)3 次,取平均值按以下公式計算抑菌率:
抑菌率=(對照菌落直徑-處理菌落直徑)/(對照菌落直徑-菌餅直徑)×100%。
計算濃度對數(shù)(x)與抑制菌落生長百分率的幾率值(y),利用最小二乘法分別求得各殺菌劑對該菌的毒力回歸方程y=a+bx和EC50。
2 結(jié)果與分析
2.1 供試藥劑的綜合分析
2.2.2 復(fù)配類 56%代森錳鋅·8%惡霜靈WP、4%精甲霜靈·64%代森錳鋅WP、1%甲霜靈·48%代森錳鋅WP和64%代森錳鋅·8%霜脲氰WP都屬于取代苯類和苯酰胺類的混配殺菌劑,從表2可以看出,56%代森錳鋅·8%惡霜靈WP的EC50最小,為0.120 8 mg/L,在15種藥劑中抑菌效果最好的。4%精甲霜靈·64%代森錳鋅WP和1%甲霜靈·48%代森錳鋅WP的EC50分別為1.980 8 mg/L和1.891 6 mg/L,抑菌效果較好,而64%代森錳鋅·8%霜脲氰WP的EC50值為8.700 9 mg/L,抑菌效果也較好。
60%代森錳鋅·9%烯酰嗎啉WP是烯酰嗎啉類和取代苯類的混配殺菌劑,從表2可以看出,其EC50值為1.369 7 mg/L,抑菌效果較好,明顯優(yōu)于兩種組分單用。
15%甲霜靈·10%霜霉威鹽酸鹽WP和6.25%氟吡菌胺·62.5%霜霉威鹽酸鹽WP屬于苯酰胺類和霜霉威鹽酸鹽的混配殺菌劑。由甲霜靈和霜霉威鹽酸鹽混配的15%甲霜靈·10%霜霉威鹽酸鹽WP的殺菌效果很好,EC50值為0.433 8 mg/L。6.25%氟吡菌胺·62.5%霜霉威鹽酸鹽WP的EC50值為1.997 4 mg/L,抑菌效果較好。
5%氟嗎啉·45%三乙膦酸鋁WP是由氟嗎啉和三乙膦酸鋁復(fù)配而成,其EC50值為0.255 2 mg/L,抑菌效果很好。
3 小結(jié)與討論
木薯根腐病是中國木薯種植中的新發(fā)病害,病原菌危害木薯的根系,破壞水分和營養(yǎng)物質(zhì)的輸送能力,消弱植株的長勢,影響塊根的產(chǎn)量和品質(zhì),嚴(yán)重時整株死亡。該病是一種世界性病害,在東南亞、非洲和拉丁美洲的木薯種植區(qū)均有發(fā)生[6]。2010年,該病首先在海南省儋州市被發(fā)現(xiàn),隨后在云南、廣東等地均有發(fā)現(xiàn),是生產(chǎn)中值得重視的一個新問題。
本研究利用由中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院環(huán)境與植物保護(hù)研究所提供的棕櫚疫霉菌株CPPHN01,采用菌絲生長速率法進(jìn)行了15種常見殺菌劑的室內(nèi)毒力測定。各種殺菌劑中,取代苯類的惡霜·錳鋅的EC50值最小,抑菌效果最好,而霜霉威鹽酸鹽的EC50值最大,抑菌效果最差。供試15種藥劑的抑菌效果排序為:56%代森錳鋅·8%惡霜靈WP>5%氟嗎啉·45%三乙膦酸鋁WP>15%甲霜靈·10%霜霉威鹽酸鹽WP>60%代森錳鋅·9%烯酰嗎啉WP>1%甲霜靈·48%代森錳鋅WP>4%精甲霜靈·64%代森錳鋅WP>6.25%氟吡菌胺·62.5%霜霉威鹽酸鹽WP>50% 烯酰嗎啉WP>70%丙森鋅WP>75%百菌清WP>80%代森錳鋅WP>64%代森錳鋅·8%霜脲氰WP>20%苯醚甲環(huán)唑 EC>50%敵克松WP>72.2%霜霉威鹽酸鹽EC。結(jié)果表明,56%代森錳鋅·8%惡霜靈WP、5%氟嗎啉·45%三乙膦酸鋁WP和15%甲霜靈·10%霜霉威鹽酸鹽WP的抑菌效果最好,適用于田間防治該病害。甲霜靈屬苯酰胺類殺菌劑,長期使用容易誘導(dǎo)病原菌產(chǎn)生抗性[7],為了避免長期使用同一種藥劑使病菌產(chǎn)生抗藥性,建議輪換使用這幾種殺菌劑進(jìn)行防治。
棕櫚疫霉能夠侵染橡膠樹[8]、胡椒、菠蘿[9]、可可[10]、番木瓜、大豆[11]等多種作物,許多研究者也進(jìn)行了防控方面的研究。例如馮巖等[12]進(jìn)行了番木瓜棕櫚疫霉病菌的藥劑篩選,結(jié)果發(fā)現(xiàn)50%安克(烯酰嗎啉)WP、64%殺毒礬WP和70%杜邦·克露WP抑菌活性較好;王自然等[13]發(fā)現(xiàn)68%精甲霜·錳鋅WP和50%烯酰嗎啉WP對侵染檸檬的棕櫚疫霉抑菌作用較好;周曉云等[14]發(fā)現(xiàn)50%烯酰嗎啉AS、80%代森錳鋅WP和50%氟嗎·乙鋁等對侵染金錢樹的棕櫚疫霉抑菌作用較好,這些研究結(jié)果和本研究類似,但數(shù)據(jù)之間略有差異,可能是菌株不同所造成的。
參考文獻(xiàn):
[1] 李開綿,林 雄,黃 潔.國內(nèi)外木薯科研發(fā)展概況[J].熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué),2001,89(1):56-60.
[2] 王 蔚.我國培育成功轉(zhuǎn)基因木薯[J].陜西科技報,2008(1):1-4.
[3] GUO H, LI C P, SHI T, et al. First report of Phytophthora palmivora causing root rot of cassava in China[J]. Plant Disease,2012,96(7): 1072.
[4] 方中達(dá).植病研究方法[M].第三版.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1998.
[5] 孫廣宇,宗兆鋒.植物病理學(xué)實驗技術(shù)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2002.
[6] 張開明.木薯病害[J].熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué),1986(1):77-82.
[7] 楊宇紅,馮蘭香,謝丙炎,等.致病疫霉對苯酰胺類殺菌劑抗性研究概述[J].中國蔬菜,2002(1):51-54.
[8] 黃貴修,許燦光.中國天然橡膠病蟲草害識別與防治[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2012.
[9] 楊雄飛,李加智.云南熱帶作物疫霉屬真菌的研究[J].云南熱作科技,1996,19(3):2-7.
[10] DOMINIQUE C, WILBERT P,F(xiàn)RITZ P J,et al.Quantitative trait loci analysis in Theobroma cacao using molecular markers. Inheritance of polygenic resistance to Phytophthora palmivora in two related cacao populations[J]. Euphytica,2000, 114(1):25-36.
[11] 李長松.大豆疫霉根腐病研究進(jìn)展[J].大豆科學(xué),1993(2):165-171.
[12] 馮 巖,陳 健,羅金棠.番木瓜抗棕櫚疫霉菌及殺菌劑的室內(nèi)毒力測定[J].中國熱帶農(nóng)業(yè),2009(5):52-55.
[13] 王自然,郭 俊,周東果,等.檸檬苗期一種新病害的病原鑒定及防治藥劑的室內(nèi)篩選[J].植物保護(hù),2012,38(4):166-170.
[14] 周曉云,馬凱生,陳小冠,等.7 種殺菌劑對金錢樹疫病病原菌的室內(nèi)毒力測定[J].江西植保,2011,34(1):25-27.