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        禽沙門氏菌分離鑒定和藥敏實驗

        2013-12-03 07:15:04
        中國畜牧獸醫(yī)文摘 2013年8期
        關(guān)鍵詞:病料卵子涂片

        (遼寧省朝陽市動物疫病預防控制中心,遼寧朝陽 122000)

        朝陽市某雞場飼養(yǎng)210日齡2 000只蛋雞,于4月下旬發(fā)現(xiàn)部分雞出現(xiàn)精神萎頓、頭翅下垂、產(chǎn)蛋下降或停產(chǎn)并伴有腹瀉癥狀,連續(xù)幾日共10余只雞,經(jīng)臨床檢查、實驗室檢測確診為禽沙門氏菌感染。

        剖檢變化為卵子變形、變色、質(zhì)地改變以及卵子呈囊狀,受害的卵子呈油脂或干酪樣,卵黃膜增厚,變性的卵子或仍附在卵巢上,有長短粗細不一的卵蒂(柄狀物)與卵巢相連,脫落的卵子深藏在腹腔的脂肪性組織內(nèi)。有些卵則自輸卵管逆行而墜入腹腔,有些則阻塞在輸卵管內(nèi),引起廣泛的腹膜炎及腹腔臟器粘連??梢园l(fā)現(xiàn)腹水;心臟變化稍輕者見心包膜透明度較差,含有微混的心包液,重者心包膜變厚而不透明,逐漸粘連,心包液顯著增多,在腹腔脂肪中或肌胃及腸壁上發(fā)現(xiàn)琥珀色干酪樣小囊包。

        筆者等采取細菌分離鑒定和藥敏試驗,即以沙門氏菌的培養(yǎng)為基礎(chǔ)對病死雞中的病原進行分離鑒定,并且對分離的病原進行藥敏實驗。

        1 材料和方法

        1.1 病料

        疑似病例病死雞的肝臟。

        1.2 培養(yǎng)基

        麥康凱瓊脂,伊紅美藍瓊脂,普通瓊脂。

        1.3 器械

        ZDX-35B型座式自動電熱壓力蒸汽滅菌器(上海申安醫(yī)療器械廠),JC303-4電熱恒溫培養(yǎng)箱(上海嘉程儀器設(shè)備廠),J0107托盤天平(浙江省岱山縣教學儀器廠),光學顯微鏡 JNOEC XS-212-201 004126,普通平板,三角瓶,電爐子,載玻片,松柏油,革藍氏染色套具,瑞氏染色液,手術(shù)刀,眼科剪子,鑷子,方盤,膠頭滴管,牛皮紙,紗布,濾紙,酒精燈,接種環(huán)(針),小矬子,封口繩,記號筆,1ml注射器,5ml注射器,剪毛剪,無菌試管,試管架,游標卡尺,計算器,移液管,小燒杯,吸耳球等。

        1.4 藥敏紙片

        上海伊華醫(yī)學科技有限公司生產(chǎn)。

        1.5 病原分離

        將上述病料直接涂片,進行革蘭氏染色,低倍鏡下觀察菌體的形狀、顏色。將病料劃線接種于麥康凱瓊脂,37℃培養(yǎng)18~24 h,觀察菌落的形狀、顏色及大小,然后挑取單個可疑菌落涂片,進行革蘭氏染色,鏡下觀察。將上述病料劃線接種于伊紅美藍瓊脂,37℃下培養(yǎng)18~24h,觀察菌落的形態(tài)顏色,然后挑取疑似菌落涂片、革蘭氏染色及鏡下觀察。

        1.6 藥敏試驗

        藥物:丁胺卡那霉素、卡那霉素、慶大霉素、胺芐青霉素、鏈霉素、新霉素、土霉素、四環(huán)素、紅霉素、強力霉素、氟派酸。

        方法:將瓊脂斜面的培養(yǎng)物挑取少許溶于生理鹽水,搖勻后澆到瓊脂平板上,微微搖晃,待均勻后將水倒掉,貼上上述藥物的藥敏片,37℃培養(yǎng)18~24h,記錄藥敏圈直徑,對照藥敏試驗判斷標準,得出結(jié)果。

        2 結(jié)果

        2.1 病原分離的結(jié)果

        2.1.1 病料的直接涂片、染色結(jié)果 鏡下菌體呈現(xiàn)紅色,兩端鈍圓,長度約為1.5~3.0μm的短桿菌,多數(shù)單個存在,偶見有2~3個菌體連在一起。

        2.1.2 麥康凱瓊脂 經(jīng)過37℃培養(yǎng)24h,瓊脂表面形成紅色的,圓形隆起,光滑,邊緣整齊的小菌落。鏡檢結(jié)果:鏡下菌體呈現(xiàn)紅色,兩端鈍圓,長度約為1.5~3.0μm的短桿菌,多數(shù)單個存在,偶見有2~3個菌體連在一起。

        2.1.3 伊紅美藍瓊脂 表面形成黑色帶金屬閃光的菌落。

        鏡檢結(jié)果:鏡下菌體呈現(xiàn)紅色,兩端鈍圓,長度約為1.5~3.0μm的短桿菌,多數(shù)單個存在,偶見有2~3個菌體連在一起。

        2.2 藥敏試驗的結(jié)果

        藥物敏感程度由《獸醫(yī)微生物學》判定。

        表1 藥敏試驗判斷標準表

        表2 藥敏試驗抑菌直徑統(tǒng)計表

        表3 藥敏試驗結(jié)果

        上述兩表可以看出:沙門氏菌對丁胺卡那霉素、慶大霉素敏感,對青霉素、強力霉素中度敏感,而對紅霉素、鏈霉素等均已產(chǎn)生了耐藥性。

        根據(jù)藥敏試驗結(jié)果采用5%丁胺卡那霉素100g/200kg飲水,每日2次,3日后雞群恢復正常。

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