代啟樹

摘 要：本文就基層獸醫(yī)豬病料采集的原則進行了介紹，提出了不同病料常用的采集操作技術(shù)，希望能夠為基層獸醫(yī)提供參考以及借鑒，不斷提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

關(guān)鍵詞：基層獸醫(yī);豬;病料;采集;原則;技術(shù)

基層獸醫(yī)在日常對豬病診斷過程中，常常會遇到很難通過感官確診或者定性的疾病，此時需要采取實驗室診斷方法確診。在實驗室診斷前，首先需要采集病料，只有掌握豬病料采集技術(shù)要點，嚴(yán)格并且嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶嵤┎×喜杉趴杀ＷC疫病監(jiān)測以及治療工作的順利開展。

1 病料采集的原則

1.1無菌采集。在病料采集過程中，必須保證全程無菌操作。尤其是需要進行血清學(xué)檢查以及微生物檢查的樣本。所采用容器以及器械等必須經(jīng)過嚴(yán)格的消毒處理，嚴(yán)格按照相關(guān)無菌操作規(guī)程進行操作。

1.2典型性。應(yīng)保證所采集用于檢疫的飼料具備代表性以及針對性。結(jié)合病害流行的特點明確需要采集病料的種類，在此基礎(chǔ)上選擇病料組織、分泌物以及排泄物等。

在此過程中需要注意，在選取動物過程中需要遵循典型性原則，保證所選擇動物沒有經(jīng)過藥物治療，其臨床癥狀具備代表性，在檢查細(xì)菌性傳染性疾病時尤為重要。

另外，選取病料時也需遵循典型性原則，盡可能選擇病原體含量較高的病料。在準(zhǔn)備采集病料前，首先需要對感染病害進行初步診斷，重點對常常受到病原體侵害的部位采集。

1.3適時性。應(yīng)當(dāng)準(zhǔn)確把握病料的采集時間，尤其在夏季需要將采集時間控制在4h以內(nèi)。如果采集時間過長，常常會導(dǎo)致病料組織發(fā)生腐爛現(xiàn)象，很難檢測出原有病原組織。如果情況所需，應(yīng)對早期發(fā)病的活體組織進行急宰并采集病料組織[1]。

1.4安全采集。在樣本采集過程中，必須保證操作的安全性，在防止人員受到感染的同時避免因病原菌發(fā)生擴散而導(dǎo)致感染面積的增大。如果病豬為疑似炭疽病，不得立即為其剖檢，而是需要切開其頸靜脈處的皮膚，將少量血液抽出后制作壓片以開展血片檢查。

2 病料采集操作技術(shù)

2.1 采集前準(zhǔn)備。

2.1.1 人員。在病料采集前，必須對采集人員開展相關(guān)業(yè)務(wù)培訓(xùn)工作，保證其具備足夠的生物安全意識。例如，如果病豬患有疑似非洲豬瘟疫情，采集人員在采集之前必須明確掌握非洲豬瘟傳播、感染以及預(yù)防相關(guān)知識，同時能夠?qū)ιi進行熟練保定病采集病料。

2.1.2 物品。結(jié)合需要采集的病料制定一個科學(xué)合理的采集計劃，同時做好所需物品的準(zhǔn)備工作。通常情況下，需要為采集操作準(zhǔn)備各種類型的手術(shù)器械、病料包裝袋、容器以及消毒劑等。

對于在病料采集過程中需要使用的各種手術(shù)器械，必須提前在121℃下高壓滅菌30min。對于注射器、采血針以及采血管等，需要使用一次性無菌制品;如果不具備一次性物品，必須再使用前落實無菌處理。對病料采集過程中需對70%的酒精、福爾馬林固定液、保存液、其他消毒液等各種所需溶液進行配制。另外，還需提前準(zhǔn)備防護服、防護口罩、無菌手套、病料采集單、記號筆、護目鏡以及膠靴等。

2.1.3 環(huán)境。在采集病料之前，首先需要選擇最為適宜的病料采集位置，同時對病料采集環(huán)境進行嚴(yán)格的消毒。嚴(yán)格處理各種廢棄物，防止病毒傳播擴散，避免發(fā)生污染。

在病料采集過程中所使用的手術(shù)刀片以及注射器針頭等在使用完畢后需要立即置于封閉的銳器盒內(nèi)，同時進行嚴(yán)格的無害化處理;對于一次性防護用品以及注射器等，則需置入密封袋無害化處理。

在病料采集工作結(jié)束后，需要及時采用消毒劑對動物尸體進行噴灑消毒，接著裝入密封袋中無害處處理。采集人員需要更衣消毒，對環(huán)境進行有效的清潔以及徹底的消毒。

2.2 病料采集方法。采集人員需要嚴(yán)格按照相關(guān)操作規(guī)程開展病料采集工作。

2.2.1 血液采集。豬只不僅脂肪層較厚，同時具備較厚的肌肉層，通常情況下很難直接觸及其血管，因而對其采集血液難度較大。在臨床上，血液采集方法較多，但是要想在獲取大量血液的同時使采血速度得到保障，通常采用頸靜脈采血方式以及前腔靜脈采血方式?？梢越Y(jié)合豬只大小等各種客觀因素靈活選擇適宜的采血方法[2]。

（1）頸靜脈采血。對豬只進行站立式保定，保證被保定豬只頭部處于垂直上舉狀態(tài)，同時身體與頭部垂直不存在扭曲現(xiàn)象。操作人員需要從豬只頸靜脈溝處將針刺入，對著微偏中心線背部方向抽取血液。

（2）前腔靜脈。與頸靜脈采血方式采取同樣的保定方法。在保定好后，豬只頸根部以及胸骨之間會出現(xiàn)一個凹陷窩。在采血過程中，將針頭對著凹陷窩的位置刺入，刺入方向為一側(cè)肩胛骨頂端方向。另外，病豬機體左側(cè)內(nèi)，心臟以及膈肌內(nèi)存在著較多的迷走神經(jīng)，但是其右側(cè)較少。在扎針過程中，一旦碰到迷走神經(jīng)，常常會導(dǎo)致豬只出現(xiàn)抽搐以及呼吸困難等各種癥狀。因而，在采血過程中在凹陷窩位置入針以后將插針方向控制在向右肩胛骨方向。

（3）血液處理方法。在病原學(xué)檢測過程中，需要采用具備抗凝功能的血液。在采集過程中，所采用真空采血管內(nèi)應(yīng)當(dāng)已經(jīng)加入了枸櫞酸鈉、EDTA或者肝素等各種抗凝劑，或者抽取果抗凝劑浸潤過的注射器。嚴(yán)禁對所采集血液進行冷凍保存，將其保存溫度控制在2-10℃，嚴(yán)格控制保存時間，不得超過24h。如果保存時間過長，紅細(xì)胞極容易發(fā)生變形或者破裂，使顯微鏡的觀察受到影響。

如果需要進行血清學(xué)檢測，在檢測之前首先需要制備血清。通常情況下通過離心分離來制備血清，在離心之前，需要將血液保存于溫度為4℃的冰箱內(nèi)2h，以促進血清的析出[3]。離心過程中，將離心機的轉(zhuǎn)速控制在2000r/min，離心時間控制在10min。另外，也可以將血液在采血管內(nèi)自然放置12-24h從而將血清析出?？梢圆捎美鋬龇绞綄ρ暹M行保存，但是冷凍保存方式保存時間不宜超過7天。在此過程中需要注意，反復(fù)凍融會導(dǎo)致血清內(nèi)物質(zhì)的活性遭到破壞，使評價工作受到影響。

2.2.2 組織采集方法。在組織病料采集過程中，需要遵循無菌操作，保證一畜一套器械。在采集心臟、淋巴結(jié)、腎臟以及脾臟等病變臟器組織時，必須保證操作迅速，尤其是在氣溫較高的夏季，需要將采集時間控制在4h內(nèi)，如果采集時間過長，組織器官常常會發(fā)生自溶、腐敗以及變性等各種情況，使檢驗效果受到影響。在活體病料采集過程中，如果為多只動物發(fā)病，首先對存在明顯癥狀的豬只采集。需要將所采集病料置于50%的甘油緩沖液內(nèi)保存并送檢。如果需要開展病理組織學(xué)檢查，需要將所采集組織置于95%的酒精中或者福爾馬林溶液當(dāng)中。固定組織以及固定液的體積比為1：10，通常在固定后24h需要對固定液進行1次更換。對待送檢病料進行編號，同時做好其記錄工作。妥善包裝送檢病料，例如組織病料以及血液需要冷藏保存，而病理學(xué)材料不得冰凍。

2.2.3 尿液。在豬只排尿過程中，采取一次性塑料杯接取其尿液。

2.2.4 糞便。采用無菌棉拭子從豬只直腸內(nèi)或者肛門內(nèi)壁部位沾取新鮮的糞便，接著將棉拭子置于密封袋內(nèi)，在此過程中折斷并舍棄手拿捏棉拭子柄的位置，以防所采集糞便受到污染[4]。

2.2.5 鼻分泌物。采用無菌棉拭子沾取豬只鼻腔內(nèi)或者鼻鏡內(nèi)的黏液。接著采用與糞便采集同樣的方式將其置于密封袋內(nèi)。

2.2.6 皮膚。采用鋒利的外科刀具從病變皮膚部位刮取皮屑、結(jié)痂以及毛發(fā)等并置于容器內(nèi)。

2.2.7 乳汁。采用消毒液對乳房、乳房附近毛發(fā)進行消毒。棄取最初幾股乳汁，接著采集10-20ml乳汁并置于滅菌容器當(dāng)中。

參考文獻

[1] 陳峰， 黨安坤， 徐淑華， 等. 豬的病料采集方法和注意事項[J]. 現(xiàn)代畜牧科技， 2019， （8）： 15-16.

[2] 伊軍. 基層獸醫(yī)病料采集的要點分析[J]. 畜牧與飼料科學(xué)， 2016， 37（5）： 111-112.

[3] 姚奕蕾. 基層獸醫(yī)之言是樣品采集、工作中必須注意的問題與建議[J]. 國外畜牧學(xué)—豬與禽， 2016， 36（5）： 93-95.

[4] 尕吉. 動物檢疫中病料采集的原則及常用的方法[J]. 中國畜牧獸醫(yī)文摘， 2016， 32（6）： 103.