孫小靜 牛宇東 馮一凡 李 芳 陜西省渭南市第一醫(yī)院（渭南 714000）

五味佛手丸主要是由五味子、佛手等五味藥組成，功能補(bǔ)氣健脾，養(yǎng)肝益腎。五味子為方中的君藥，我們采用HPLC法測(cè)定對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制，結(jié)果表明，此法準(zhǔn)確，分離度效果好，精密度和重現(xiàn)性好，回收率高，陰性對(duì)照顯示制劑中其他成分對(duì)五味子乙素的測(cè)定無干擾，可作為該制劑的含量測(cè)定指標(biāo)。

1 儀器與試藥 儀器：高效液相色譜儀（Agilent1200型）；紫外檢測(cè)器；BP221S賽多利斯電子天平。試藥：甲醇為色譜純，水為重蒸餾水，其他試劑均為分析純，樣品自制，五味子乙素對(duì)照品購自中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)為0765－20003，供含量測(cè)定用。

2 實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果 2.1 色譜條件 色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱（200mm×4.6mm，5μm），流動(dòng)相：甲醇∶水＝78∶22，檢測(cè)波長(zhǎng)：250nm，柱溫：室溫，流量：0.8mL／min。在此條件下，五味子乙素與其他組分分離效果良好，達(dá)到基線分離，陰性無干擾。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取五味子乙素對(duì)照品適量，加甲醇使溶解制成每1mL含五味子乙素30μg的溶液。

2.3 供試品溶液的制備 取本品5袋，除去包衣，研細(xì)，混勻，取約5.0g，精密稱定，加入氯仿50mL，搖散，超聲處理30分鐘，濾過，用少量氯仿分次洗滌漏斗，洗液并入濾液中，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙廪D(zhuǎn)移至5mL量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得。

2.4 線性關(guān)系考察 精密稱取五味子乙素對(duì)照品10.3mg，置50mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取上述對(duì)照品溶液（200μg／mL）0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL，置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用。在上述色譜條件下，分別吸取上述溶液各10μL進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，結(jié)果見表1。以峰面積積分值為縱坐標(biāo)Y，五味子乙素濃度為橫坐標(biāo)X，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，表明五味子乙素在10.0μgmL～60.0μg／mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好?；貧w方程為 Y ＝471.19＋284.65X r＝0.9997。

2.5 精密度試驗(yàn) 分別精密吸取五味子乙素對(duì)照品溶液10μL，重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積積分值，以峰面積計(jì)算RSD為1.01%，表明本法精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取供試品溶液，依上述方法每隔2h測(cè)定一次，測(cè)定峰面積積分值，結(jié)果，五味子乙素峰面積的RSD為1.56%，表明供試品溶液在8小時(shí)內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批樣品，平行精密稱取6份，按供試品溶液的制備方法處理，進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算含量，結(jié)果五味子乙素的平均含量為0.0268mg／g，RSD為0.99%，表明本法重復(fù)性良好。

2.8 回收率試驗(yàn) 采用加樣回收法。分別精密稱取已知含量的供試品（010801，其五味子乙素含量為0.0268mg／g）6份，加入五味子乙素對(duì)照品適量，同重復(fù)性試驗(yàn)方法制成供試品溶液，測(cè)定五味子乙素含量，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

2.9 樣品測(cè)定 同重現(xiàn)性方法對(duì)3批產(chǎn)品中的五味子乙素進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表2。

表2 3批產(chǎn)品中五味子乙素含量測(cè)定

3 討 論 采用上述測(cè)定方法測(cè)定3批產(chǎn)品中五味子乙素的含量，含量范圍為0.0260～0.0280mg／g，考慮到生產(chǎn)和含量測(cè)定提取時(shí)五味子乙素的損失，暫定本品含量測(cè)定指標(biāo)和范圍為：本品含五味子以五味子乙素計(jì)為0.023mg／g。

實(shí)驗(yàn)中對(duì)供試品的提取條件進(jìn)行了考察，結(jié)果表明超聲提取時(shí)間為30分鐘時(shí)，五味子乙素已經(jīng)提取完全；提取溶劑經(jīng)對(duì)比了甲醇、氯仿作為提取溶劑，其他條件不變，結(jié)果顯示采用甲醇提取時(shí)，供試品色譜圖中雜質(zhì)峰較多，峰面積相對(duì)較小，而采用氯仿時(shí)，雜質(zhì)峰干擾較少，分離較好，基線平穩(wěn)。