虢紅梅 孫小靜 鄭可農(nóng) 陜西新藥技術(shù)開發(fā)中心（西安710075）

地榆燒傷涂膜劑是由地榆、大黃、血余炭等7味藥組成的中藥復(fù)方制劑，具有解毒收斂的作用，主要用于治療各類燒傷、燙傷。為了合理地利用藥材，節(jié)約成本，且使本品的制備工藝能夠適應(yīng)大生產(chǎn)的需要，我們按照學(xué)界公認(rèn)的正交試驗(yàn)的方法，以大黃素為指標(biāo)，確定本品的最佳提取工藝。

1 儀器與試藥 1.1 儀 器 LC2010A型高效液相色譜儀（日本島津），CLASS－VP色譜數(shù)據(jù)工作站；電子分析天平（型號(hào)：BP211D，d＝0.01mg德國(guó)賽多利斯公司）。

1.2 試藥 色譜純甲醇（TEDIA公司）。其余試劑均為分析純；實(shí)驗(yàn)用藥材購自北京同仁堂西大街店，經(jīng)檢驗(yàn)，均符合《中國(guó)藥典》2010年版的相關(guān)規(guī)定［1］；大黃素對(duì)照品（批號(hào)110756－200110，購自中國(guó)食品藥品檢定研究院）。

2 方法與結(jié)果 2.1 水提工藝 采用正交試驗(yàn)的方法［2］，對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，以對(duì)提取影響較大的加水量、提取時(shí)間、提取次數(shù)為考查因素，擬定3個(gè)水平進(jìn)行考察，選擇L9（34）正交表進(jìn)行試驗(yàn)。因素水平表見表1。

表1 水提正交試驗(yàn)因素水平

2.2 評(píng)價(jià)指標(biāo)的確定 地榆為方中的主藥，但其中所含的鞣質(zhì)類成分，別的藥材里也有，專屬性不強(qiáng)，因此，選取大黃里的大黃素為指標(biāo)性成分進(jìn)行測(cè)定。

2.3 樣品溶液的制備 稱取處方量地榆、大黃等藥材，按擬定的因素水平，照L9（34）正交表進(jìn)行試驗(yàn)，乙醇液濃縮至500mL，備用。

2.4 大黃素的含量測(cè)定 2.4.1 C18色譜柱（4.6mm×150mm，5μm，江蘇漢邦公司生產(chǎn)），流動(dòng)相：甲醇－0.1%磷酸溶液（85：15），檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm，流速：1.0mL／min，柱溫：30℃。

2.4.2 對(duì)照品溶液的制備：取大黃素對(duì)照品適量，加流動(dòng)相制成每1mL含0.05mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.4.3 供試品的制備：分別吸取提取液4.0mL，加入8%鹽酸5mL和三氯甲烷10mL，回流1h，冷卻，移置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液用三氯甲烷提取2次，每次約10mL，合并三氯甲烷，揮去三氯甲烷，殘?jiān)状歼m量溶解，置10mL的量瓶中，甲醇稀釋至刻度，搖勻，0.45um的濾膜濾過，作為供試品溶液。

2.4.4 測(cè)定方法：在上述色譜條件下吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液各10μL，進(jìn)樣，記錄色譜圖，計(jì)算大黃素提取率。

2.5 試驗(yàn)結(jié)果及分析 正交試驗(yàn)結(jié)果見表2，方差分析結(jié)果見表3。

表2 提取正交試驗(yàn)表

表3 方差分析表

由正交試驗(yàn)結(jié)果可見，提取因素影響大小依次為C＞A＞B，故最佳工藝條件為A3B2C3，由于提取時(shí)間對(duì)提取率沒有顯著的影響，本著節(jié)約能源，節(jié)省成本的原則，與生產(chǎn)實(shí)際相結(jié)合，工藝確定為：藥材加水12倍量，提取3次，每次2h。

2.5 驗(yàn)證試驗(yàn) 按處方量稱取藥材共3份，按照所選提取條件實(shí)驗(yàn)，并測(cè)定大黃素的含量。結(jié)果見表4。

表4 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果可見，驗(yàn)證試驗(yàn)大黃素的提取率與正交試驗(yàn)優(yōu)選結(jié)果相近，由此確定提取的最佳工藝條件為：藥材加12倍量的水，提取3次，每次2h。

3 討 論 在對(duì)水提取工藝的優(yōu)選中，還可以選擇地榆中的主要成分沒食子酸為指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定［3］，但是因?yàn)槠渌幉睦镆埠羞@種成分，專屬性不強(qiáng)，因此選擇大黃中的大黃素作為指標(biāo)成分進(jìn)行測(cè)定。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典［S］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：22.

［2］朱慶玲，李瑞和，石文宏.大黃中大黃素的提取工藝研究［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2006，17（3）：388－389.

［3］孫立立，江 波，袁振海，等.HPLC測(cè)定地榆飲片中沒食子酸的含量［J］.中成藥，2006，28（8）：1144－1148.