汪小葛，唐 新，浦雄勇，孫王偉

（江蘇省昆山市第一人民醫(yī)院檢驗科 215300）

關于檢測系統(tǒng)，目前還沒有一個權(quán)威機構(gòu)對此作出確切的定義，但一般認為，完成一個檢驗項目的測定所涉及的儀器、試劑、校準品、質(zhì)控品、消耗品、操作程序、質(zhì)量控制程序、維護保養(yǎng)程序等的組合［1］。國際上特別強調(diào)使用固定組合的檢測系統(tǒng)，稱為標準檢測系統(tǒng)，使用這樣的檢測系統(tǒng)對患者樣本進行檢驗，其檢驗結(jié)果可溯源至參考方法，具有溯源性和可比性［2］。保證不同的檢測系統(tǒng)檢測同一個項目時其結(jié)果的一致性以及準確性是實驗室質(zhì)量管理的最終目的，這個目標主要是通過方法學之間的比較來實現(xiàn)的。腺苷脫氨酶（adenosine deaminase ADA）是嘌呤核苷代謝過程的重要限速酶，能催化（脫氧）腺苷脫氨轉(zhuǎn)變?yōu)榇吸S嘌呤（脫氧）核苷，再經(jīng)嘌呤核苷磷酸化酶作用生成次黃嘌呤，最終氧化成尿酸排出體外，ADA與機體細胞免疫活性關系密切，測定血清、體液中的ADA及其同工酶水平對某些疾病的診斷、鑒別診斷、治療及免疫功能的研究有著重要的臨床意義［3］。原裝ADA試劑雖然有很好的溯源性，但成本高，限制了臨床常規(guī)開展，而Roche Modolar DPP全自動生化分析儀有部分開放的試劑通道，可以使用國產(chǎn)ADA試劑，其成本相比原裝試劑低，適合臨床常規(guī)開展，但是檢測結(jié)果的溯源性不足。為了能夠?qū)崿F(xiàn)自建ADA檢測系統(tǒng)的檢測結(jié)果與參考系統(tǒng)的檢測結(jié)果具有可比性，本文依據(jù)臨床和實驗室標準化協(xié)會（CLSI）標準中EP9-A文件對北京利德曼ADA檢測試劑盒進行評估并建立檢測系統(tǒng)，與Roche Modolar DPP參考系統(tǒng)進行方法學比較。

1 材料與方法

1.1 標本來源 采用門診患者新鮮血清標本，標本無溶血、脂血、黃疸。每天采用8份標本，連續(xù)5d一共40份，標本濃度要盡量覆蓋方法檢測的線性范圍。

1.2 儀器與試劑 Roche Modolar DPP全自動生化分析儀。北京利德曼ADA檢測試劑盒及配套校準品，Roche原裝試劑，Cfas校準品，美國Randox質(zhì)控品。

1.3 方法

1.3.1 檢測系統(tǒng)建立 自建系統(tǒng)（Y）：Roche Modolar DPP全自動生化分析儀，北京利德曼ADA檢測試劑盒及配套校準品。參考系統(tǒng)（X）：Roche參考系統(tǒng)，參考系統(tǒng)的室內(nèi)質(zhì)控在控，參加江蘇省室間質(zhì)控評比成績優(yōu)秀。兩個系統(tǒng)檢測都嚴格按試劑盒的說明書進行操作，所有標本都在2h以內(nèi)測定完畢。

1.3.2 方法學比對試驗 每天測定8份標本，每份標本都用自建系統(tǒng)和參考系統(tǒng)進行雙份檢測，連續(xù)5d，共40份標本。測定時先對標本排序，再按1→8，8→1各測定1次，檢測結(jié)果取均值。

1.3.3 統(tǒng)計學方法 方法內(nèi)以及方法間的離群點檢驗，判斷限為配對資料小于其4倍的差值均值；一般情況下，若相關系數(shù)（r）≥0.975或r2≥0.95時，認為 X的取值范圍合適，然后計算線性回歸方程Y＝aX＋b。使用Excel軟件按CLSI EP9-A統(tǒng)計程序操作。

2 結(jié) 果

2.1 兩個檢測系統(tǒng)的精密度評價 使用Randox水平2，水平3質(zhì)控品連續(xù)20次盲測，計算均值（x）、標準差（s）和變異系數(shù)（CV%），結(jié)果見表1，其CV均小于廠家聲明的5%。

表1 兩個系統(tǒng)精密度評價

2.2 自建檢測系統(tǒng)和參考系統(tǒng)之間比較 自建檢測系統(tǒng)與參考系統(tǒng)結(jié)果均數(shù)及標準差分別為12.2、6.5，12.1、6.5，二者之間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）?；貧w方程為Y＝1.001 4 X＋0.073 2，r2＝0.998 4，顯示自建系統(tǒng)和參考系統(tǒng)之間具有顯著相關性，結(jié)果見圖1。自建系統(tǒng)和參考系統(tǒng)偏倚圖見圖2，其平均偏差為2.32%。

圖1 自建系統(tǒng)與參考系統(tǒng)比較

圖2 自建系統(tǒng)和Roche系統(tǒng)偏倚

3 討 論

一致性是指在統(tǒng)一計量單位的基礎上，無論何種檢測系統(tǒng)其測量結(jié)果都應該在給定的區(qū)間內(nèi)一致。也就是說，測量結(jié)果應是可重復、可再現(xiàn)、可比較的［4］。由于原裝試劑價格較貴，如果在保證標本的檢驗質(zhì)量不降低的前提下，使用既適合本科室檢測儀器，能夠降低成本，又能讓臨床上接受的國產(chǎn)試劑成為作者要解決的問題。現(xiàn)在很多醫(yī)院的檢驗科都有根據(jù)自身情況選擇儀器、校準品、試劑等建立檢測系統(tǒng)的情況，雖然降低了檢測的成本，但是需要解決的是自建檢測系統(tǒng)的結(jié)果可比性和臨床可接受性。同一儀器使用不同試劑的現(xiàn)象在國內(nèi)較為普遍，對不同試劑系統(tǒng)檢測結(jié)果的可比性評估就顯得非常重要［5］。在目前國產(chǎn)試劑建立的檢測系統(tǒng)還不完善的情況下，可以對自建的檢測系統(tǒng)進行方法學比較，以保證臨床檢測結(jié)果的準確性以及可比性。CLSI標準中EP9-A文件為臨床各實驗室提供了方法學比較的標準化途徑。由表1可見，兩個檢測系統(tǒng)的精密度均符合臨床要求，對比實驗數(shù)據(jù)是可靠的，這是進行下一步對比實驗的前提。兩個檢測系統(tǒng)相關性分析顯示，其回歸方程為Y＝0.998 7 X＋0.090 2，r2＝0.998 4，兩個系統(tǒng)的平均偏差為2.32%，表明北京利德曼ADA檢測試劑盒在Roche Modolar DPP全自動生化分析儀上建立的檢測系統(tǒng)與Roche參考系統(tǒng)之間具有很好的可比性，相關性好，自建系統(tǒng)的檢測結(jié)果可以被臨床所接受。但是自建檢測系統(tǒng)與參考檢測系統(tǒng)結(jié)果有很好的可比性，相關性好，只能表明自建系統(tǒng)的檢測結(jié)果可以替代參考系統(tǒng)檢測臨床標本，其檢測結(jié)果可以被臨床接受，但不能證明自建系統(tǒng)具有與參考檢測系統(tǒng)一樣的可溯源性。

［1］ 葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程［M］.3版.南京：東南大學出版社，2006：14-16.

［2］ 叢玉隆.臨床實驗室管理［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2004：48-50.

［3］ 劉九江，張立.腺苷脫氨酶活性測定方法學及臨床應用［J］.國際檢驗醫(yī)學雜志，2007，30（7）：690-691.

［4］ 楊振華.臨床實驗室質(zhì)量管理［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：143-146.

［5］ 馮仁豐.臨床檢驗質(zhì)量管理技術基礎［M］.上海：上海科學技術文獻出版社，2003：12-16.